153 resultados para EDTA


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采用DEAE-sephadex A-50、Sephadex G-100、CM-sepharose cl-6B三步柱层析,从烙铁头(T. mucrosquamatus)蛇毒中纯化得到的精氨酸酯酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳(pH 8.3)和SDS-聚丙烯酰胺凝胼电泳中均呈现单一的蛋白带。其分子量为29000,等电点pI为5.2;由225个氨基酸残基组成,其中Gly,Asp和Glu的含量较高。它是一个糖蛋白,含有0.5%的中性已糖和0.75%的唾液酸,对热及酸碱变化较稳定。在280nm波长处有典型的蛋白质吸收峰,此时的消光数E0.1%/1cm为1.332。该酶具有较强的精氨酸酯酶活性和纤维蛋白原溶解活性,无出血活性、酪蛋白水解活性以及粗毒中含有的其它酶活性。从烙铁头(T. mucrosquamatus)蛇毒中纯化的具纤维蛋白原溶解活性的精氨酸酯酶(MFAE)是一丝氨酸蛋白酶,其活性可被PMSF抑制而不受EDTA的影响。MFAE酶促反应的最适pH为8.4,最适温度55 ℃; pH7.6、37 ℃时水解BAEER的米氏常数K_m为20 * 10~(-3)M。该酶能降解纯化人纤维蛋白原的Bβ链以及纯化牛纤维蛋白原的Aα和Bβ链,并有一定的纤维蛋白溶解活性。它能明显延长兔血浆的凝血酶时间和复钙时间。纯化的MFAE无出血活性、凝血酶样活性及血小板聚集活性,对ADP、AA、TMVA、Melittin等诱导的血小板聚集也无抑制或解聚作用。本文还测定了它对凝血酶及胞浆毒特异性合成三肽底物的水解活性。

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血栓栓塞性疾病严重影响人类的健康,是导致死亡率最高的病因之一。在过去 的几十年中,已经开发了针对血液凝固、血小板激活和聚集、血栓溶解的不同步骤而 起作用的基础和临床药物,但是许多抗血栓药物经常被包括低血压、出血等系统性的 副作用所限制,因此,需要开发新型的更具潜力和特异性的抗血栓药物。 吸血节肢动物与宿主相互作用的分子机制研究是目前国际研究的热点之一,通过 该类研究可以发现大量的具有药用前景的先导分子和提供节肢动物控制策略。我们通 过生物化学、分子生物学以及药理学研究手段首次从中国特有的姚虻(Tabanus yao Macquart)唾液腺发现了同时具有水解纤维蛋白原和抑制血小板聚集的双功能的 丝氨酸蛋白酶Tablysin、纤维蛋白水解酶TY6和腺苷三磷酸双磷酸酶Tabapy等3个家 族的抗血栓活性成分。并研究了这3类因子在牛虻唾液腺中的分子多样性、它们的结 构基础及发挥抗血栓功能的作用机制,通过实验动物模型研究体内外抗血栓能力,深 入解析了牛虻作为传统抗血栓中药的物质基础,为发掘具有良好抗血栓功能的新型候 选药物分子,为传统活血化瘀中药牛虻的现代化开发提供了广阔的思路和打下了坚实 的基础。 研究表明,姚虻纤维蛋白原水解酶Tablysin为一种单链蛋白。其表观分子量为 27kDa。此酶为一种丝氨酸蛋白酶家族的新成员,其活性不受金属离子螯合剂EDTA 和还原剂DTT的影响。血浆蛋白酶抑制剂Aprotinin,α-macroglobulin能部分抑制该 酶活性。此酶适应的pH范围较广(pH 2.4-10.0),但对热变化不具很好的耐受性。 Edman降解法进行氨基酸测序分析发现,此酶的N-末端有封闭现象,后经Q-TOF质 谱分析,确定此酶的部分氨基酸序列。此外,我们成功构建了具有完整性的姚虻唾液 腺cDNA文库,获得2×106 pfu个重组子,进一步的筛选了Tablysin的编码基因。 对此酶的溶栓机制进行分析发现,其具有直接水解纤维蛋白原的活性,不具有纤 溶酶原激活剂的活性。此酶能明显地水解纤维蛋白原的α-链,而对β-链的水解活性较 低,不能水解γ链(α > β > γ)。此酶不能有效地水解纤维蛋白,不会水解层粘连蛋白 (Laminin)和纤维粘连蛋白(Fibronectin)等基质蛋白。不具有出血活性。进 一步探讨此酶的作用机制,发现其能以剂量依赖的方式抑制ADP诱导的血小板聚 集。利用流式细胞仪检测到该酶能与血小板膜糖蛋白受体GPIIb / IIIa结合,因此推测其可能是通过抑制血小板和纤维蛋白原结合的作用机制来抑制血小板 的聚集。 我们通过将目的基因连接到pET-32a+载体,并在大肠杆菌表达体系中得到 了高效表达。体外活性检测表明重组蛋白质与天然产物活性相当,用其检测了 其对角叉菜胶致小鼠尾静脉血栓模型体内血栓形成的影响, 实验结果表明 Tablysin具有明显的抗静脉血栓作用。该工作对有潜力开发成为新型单组分抗血栓 药物的姚虻活性蛋白进行了较为系统的理化性质研究,为该分子的进一步开发和研究 奠定了基础。 我们从姚虻唾液腺中分离纯化到一组具有水解纤维蛋白原α-链活性的酶, 命名为TY6家族。对TY6的生化性质进行研究,表明此酶为一种单链的丝氨酸蛋白 酶,其表观分子量为27 kDa,其活性不受金属离子螯合剂EDTA的影响,但能被PMSF 所抑制。Molish反应显示为阴性,说明此酶不是一种糖蛋白。从姚虻唾液腺cDNA 文库中克隆得到其编码序列,发现该酶家族的编码基因在一级结构上表现出丰 富的多样性。通过Western blotting检测到其能与牛虻叮咬后过敏患者血清特异性IgE 结合。推测该基因的多样性是吸血昆虫适应吸血寄生生活而采取的进化策略。 该工作为牛虻唾液腺抗血栓功能基因的继续筛选和分析奠定了基础,并为牛虻的生物 防治提供了思路和对策。 我们从姚虻唾液腺中分离纯化到一个具有水解ADP活性的酶(Apyrase), 命名为Tabapy。活性检测发现Tabapy具有明显的水解ADP的活性,并能以剂量 依赖的方式抑制ADP诱导的血小板聚集。通过Western blotting检测到Tabapy能与 牛虻叮咬后过敏患者血清特异性IgE结合。用PCR方法从姚虻唾液腺cDNA文库中 克隆得到编码序列,经BLAST分析表明,该酶与来源于斑虻唾液腺的血小板聚 集抑制剂Chrysoptin具有90%的序列相似性,并经过Q-TOF分析确证,有5个肽段 的氨基酸残基与该cDNA序列推导的多肽链匹配。该工作为研究吸血节肢动物 吸血生理及进一步研究Apyrase的结构和功能打下了基础。

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近年来,土壤重金属污染的植物修复得到世界各国的重视,将花卉植物应用于污染土壤修复方面的研究应该说是刚刚兴起,但具有巨大的修复潜力。我国的铅污染形势十分严峻,大量的铅污染土壤亟待修复。铅在土壤中生物有效态的含量很低,因此必须采用一些有效的强化手段(如施用螯合剂)来提高植物的修复效率。 本研究以草本花卉为研究对象,通过室外盆栽筛选实验,分析了30 种花卉植物对Pb 的耐性特征和积累特性,并与螯合诱导技术相结合,强化花卉植物的修复效果,同时尽量减少可能造成的环境风险和健康危害。 根据超积累植物应具备的4 个基本特征,对参试的30 种花卉植物进行盆栽初步筛选分析。实验结果表明,对Pb 污染耐性较强且积累能力较强的花卉有9种;对Pb 污染耐性较强但积累能力较弱的花卉共12 种,这些植物在植物稳定修复方面可能有一定价值;其它9 种花卉对Pb 污染耐性较弱且积累能力较弱,是Pb 的非超积累植物。 盆栽浓度梯度筛选实验表明,满天星和火炬鸡冠是具有铅超积累植物特征的花卉。满天星转移系数大于1,地上部铅含量超过了铅超积累植物需要达到的临界含量标准,但对高浓度铅污染耐性较差且富集系数小于1;火炬鸡冠耐性较强且地上部铅含量超过了铅超积累植物需要达到的临界含量标准,但转移系数和富集系数均小于1。 水培实验表明:EDTA、NTA 强化效果较好;矮牵牛幼苗土培强化实验确定:先加EDTA,一周后加入NTA,且二者的比例为2:1 时修复效率最高;在7 种铅积累能力较强的花卉植物成熟后,收获前按上述方法分两次施加混合螯合剂,实验结果证实此修复方法具有有效性、经济性、安全性和公众可接受性。

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由于近年来有害微生物的肆虐和人们防病抗菌意识的增强,社会对各种新型抗菌材料的需求越来越迫切。抗菌不锈钢是一种兼具良好机械和抗菌性能的新型功能材料,具有广泛的应用前景。开发和推广抗菌不锈钢,具有重要的经济和社会意义。 本文以中科院金属研究所研制的两种抗菌不锈钢为研究对象,对其抗菌性能和抗菌机理进行了研究,以期为抗菌不锈钢的深入研发和推广提供理论依据。 本文获得了如下主要结论: 1.采用覆膜法研究了抗菌不锈钢的抗菌广谱性,铁素体和奥氏体抗菌不锈钢对供试的17株菌(除产气肠杆菌外),均显示了较强的杀灭作用,证明其具有抗菌广谱性。两种材料对非孢子(或芽孢)产生菌的杀灭作用强于孢子(或芽孢)产生菌。但是,两种材料对产气肠杆菌均无杀灭作用。 2.考察了铁素体和奥氏体的杀菌率随时间和菌浓度的变化情况。两种材料分别在作用3h时和9h时,对菌体浓度为1×107CFU/mL的大肠杆菌(ATCC25922)的杀菌率均达到99.5%。对菌体浓度≤1×107CFU/mL的大肠杆菌在24h内均可全部杀灭。 3.随打磨次数的增加,抗菌率没有变化,表明打磨不影响铁素体和奥氏体抗菌不锈钢的抗菌性能;抗菌率不受温度的影响,0~37℃之间,未观察到抗菌率受温度变化的明显影响。 4.从抗菌不锈钢中溶出的铜在杀菌过程中可能起重要作用。铁素体和奥氏体抗菌不锈钢与添加了终浓度为1mmol/L的EDTA的菌液作用后,杀菌率分别降为46.8%和38.8%,因为EDTA络合了溶液中的金属离子,间接表明铜离子在杀菌过程中起重要作用。 5.两种抗菌不锈钢中O2-的产生速率分别为0.117 nmol•min-1•g-1和0.107nmol•min-1•g-1,显著高于普通不锈钢(0.062 nmol•min-1•g-1)。细胞膜不饱和脂肪酸过氧化的终产物丙二醛含量分别为1.96 nmol/g和1.93 nmol/g。显著高于普通对照的1.08 nmol/g,表明存在脂肪酸被氧化的现象。这些结果为抗菌过程中存在O2-的氧化杀菌作用提供了间接证据。 6.通过透射电镜和原子力显微镜观察,与抗菌不锈钢作用后的细胞外形多发生变化,细胞壁和细胞膜破裂,细胞内容物漏出,有的菌体完全溶解为碎片,显示两种不锈钢对细胞膜和细胞壁形态的显著影响。随作用时间延长,菌液中钾离子浓度亦显著升高,在3h时,分别达到2.57mg/L和2.79mg/L(普通对照为1.61mg/L)。 7.在巯基氧化实验中,添加终浓度为5 mmol/L的L-cys,作用8h,铁素体的抗菌率降为11.1%,薄层层析结果显示,半胱氨酸可能被氧化成胱氨酸,表明抗菌不锈钢可能对还原性酶具有氧化作用。 8.提取与抗菌不锈钢作用后菌的DNA,凝胶电泳观察并未出现smear现象。表明在本实验条件下尚不能检测到抗菌不锈钢对细菌遗传物质的氧化切割作用。 关键词: 抗菌材料 抗菌不锈钢 抗菌性能 抗菌机理 O2-

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本论文以镉超富集植物龙葵(Solanum nigrum L.)为材料,研究化学强化剂对龙葵修复镉-多环芳烃复合污染的作用,并对筛选出的强化剂在不同浓度水平镉-多环芳烃复合污染土壤的适用性进行研究,以期为镉-多环芳烃复合污染土壤的植物修复强化技术提供理论指导。 (1)采用室内盆栽试验的方法,研究外源半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸及其复合处理对超富集植物龙葵修复镉-多环芳烃复合污染土壤的影响。试验表明,各浓度水平的单因素处理对植物株高及地上部干重并没有显著影响(p>0.05),而复合处理则具有显著的促进作用(p<0.05)。各处理能够显著增强龙葵对镉的吸收和富集能力,其中半胱氨酸处理使重金属提取率分别达到1.80%及1.83%,与对照相比提高1.80及1.83倍。研究发现甘氨酸、谷氨酸及半胱氨酸复合处理能够促进镉及多环芳烃在土壤环境中的去除作用,且0.3mmol•kg-1甘氨酸+0.3mmol•kg-1谷氨酸+0.3mmol•kg-1半胱氨酸处理效果最佳,与对照相比龙葵地上部Cd含量增加2.26倍,土壤多环芳烃总量的去除率提高5.46倍。 (2)采用室内盆栽试验的方法,研究EDTA、水杨酸、TW80及其复合处理对超富集植物龙葵修复镉-多环芳烃复合污染土壤的影响。研究发现,单因素EDTA处理对龙葵具有很强的植物毒性作用,显著降低了龙葵地上部干重(p<0.05)。水杨酸及TW80处理促进了土壤中多环芳烃的生物降解作用,其中以0.9mmol•kg-1水杨酸处理效果最佳,芴、苯并(a)蒽、 、苯并(b)荧蒽、苯并(a)芘及苯并(g,h,i) 的降解率分别达到52.3、35.1、60.7、54.5、69.3及68.8%。此外,研究结果显示水杨酸对龙葵地上部提取镉总量具有很好的促进作用,即水杨酸处理能够促进污染物镉和多环芳烃的在土壤环境中的去除作用。 同样,复合处理0.1mmol•kg-1EDTA+0.5mmol•kg-1TW80和0.5mmol•kg-1EDTA+0.3mmol•kg-1水杨酸对以上两种污染物的去除均有很好的促进作用,表明在化学强化剂的协助条件下利用超富集植物修复重金属和有机复合污染土壤是可行的。 (3)采用室外盆栽试验的方法,研究化学强化剂0.1mmol•kg-1EDTA、0.9mmol•kg-1半胱氨酸、0.9mmol•kg-1水杨酸、0.3mmol•kg-1TW80及其复合处理对不同类型的镉和苯并(a)芘土壤修复适用性进行研究。研究发现,高浓度镉和苯并(a)芘对其在土壤环境中的去除产生抑制作用,其抑制强度随浓度的升高而增强。研究结果显示,不同类型的污染土壤对化学强化剂的需求不同,当土壤投加5mg•kg-1Cd时,EDTA+半胱氨酸及EDTA处理对龙葵吸收镉具有显著的促进作用,而土壤镉投加浓度为15mg•kg-1Cd时,仅EDTA+半胱氨酸处理的促进效果最佳;当土壤投加1mg•kg-1Bap时,水杨酸+TW80处理能够显著增强Bap的降解作用,而土壤投加2mg•kg-1Bap时,TW80处理的强化效果最佳;当土壤投加5mg•kg-1Cd和1mg•kg-1Bap时,水杨酸+TW80+EDTA处理对土壤中两种污染物去除均有很好的促进作用,而土壤投加15mg•kg-1Cd和2mg•kg-1Bap时,半胱氨酸+TW80处理效果最佳。

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有机磷是植物和微生物的重要磷源,其各化合物含量组成在一定程度上可反映土壤供磷情况。31P 核磁共振谱仪(31P NMR)通过监测核磁共振频率可以将有机磷不同组分加以区分,是测定土壤有机磷组分的理想工具。本文以吉林省公主岭市不同施肥处理(不施肥处理Control;无机肥处理NPK;有机肥处理M1 、M2;有机无机配施处理M1+NPK、M2+NPK)的长期试验地典型黑土为研究对象,对其有机磷组分应用31P NMR技术进行了研究。结果发现: 1、上机样品的浓度对谱图的影响大,同一批样品需按照同一方法配制,且浓度不是越高越好。冻干前浸提液不中和,试验中未发现磷酸二酯,土壤的NaOH-EDTA浸提液在冷冻干燥前中和,可以减少磷酸二酯的水解;土壤全碳对实验谱图的分辨率有较大的影响。 2、Control处理和NPK处理磷酸单酯含量占浸提液全磷量的比例最高,分别为41%和38%,M2 + NPK处理比例最低为13% 。肌醇六磷酸盐含量占总有机磷量的比例在7% ~ 28%之间,Control处理最高,显著高于NPK处理、M1处理、M1 + NPK处理和M2 + NPK处理。土壤焦磷酸盐含量占浸提液全磷含量比例为0.01% ~ 0.31%,施有机肥处理土壤焦磷酸盐含量显著高于Control处理和NPK处理。 3、土壤浸提液冷冻干燥前中和,测定结果均发现胞壁酸(属磷酸二酯)的峰,中和后的测定磷酸二酯含量占浸提液全磷量的比例在0.53%和3.75%之间;且在Control处理发现-5.28ppm、-26.19ppm和-27.54ppm处发现三个未知峰;Control处理未知化合物占总有机磷的比例为0.35%。

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本文研究了热带假丝酵母(C. tropicalis)和解脂假丝酵母(C. lipolytica)利用混和正烷烃(C_(10)-C_(18))生长过程中胞外乳化物的产生及作用。结果表明胞外乳化物质的大量产出现于对数生长后期和生长平衡期,热水抽提菌体所得细胞表面物质具有乳化性能,其乳化性能与细胞生长密切相关,生长旺盛细胞表面具有较高乳化性能。以冷丙酮(3:1)沉淀发酵上清液,获得胞外主要乳化物质,经反复沉淀、透析及冷冻干燥,初步纯化乳化物产率为0.5 g/L,C. tropicslis胞外主要乳化物为脂蛋白-多糖复合物,其中,糖46%、脂40%、蛋白3%。脂由多种中性脂组成,糖单元为果糖及两种未知单糖,蛋白中80%为极性氨基酸,C. lipolytica胞外乳化物质主要是脂-糖蛋白复合物,主要组成:糖66%、脂17%、蛋白6%。脂由中性脂和极性脂组成,糖蛋白组成:糖95、蛋白5%。糖单元为甘露糖、果糖,蛋白中80%为极性氨基酸(主要为成糖氨基酸)。两种胞外乳化物均为水溶性大分子复合物,在低浓度(<10mg/L)即具有良好乳化性能。去除蛋白后的胞外乳化物对烷烃的乳化性能降低90%,pH在中性时,乳化性能最佳。CaCl_2(10-50 mM),NaCl(1-20%), EDTA(2.5-10 mM)对C. lipolytica胞外乳化物质的乳化性能影响较大,而对C. tropiclis胞外乳化物影响较小,两种胞外提取物对产生菌利用烃生长有刺激作用。槐糖脂、C. lipolytica胞包提取乳化物对C. tropicalis利用烃的生长有刺激作用,鼠李糖脂、吐温80则表现出抑制作用。胞外生物乳化剂对酵母菌利用烷烃的生长有着重要作用。

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用二氧化氯(含量≥8%)日投量1g/m3水体两天处理一次水质,海洋胶红酵母(浓度为1×1010cfu/mL)日投量1~10mL/m3水体、光合细菌(浓度为2×1010cfu/mL)日投量1~10mL/m3水体、生化黄腐酸(含量≥60%)日投量5~10g/m3水体在海参育苗中应用。试验结果表明:与用恩诺沙星日投量1g/m3水体、EDTA螯合剂日投量2g/m3水体,及常规投饵方式进行比较,海参幼体烂边病发病率从20.0%降低到10.0%,烂胃病发病率从23.0%降低到10.0%。在海参养殖中应用海洋胶红酵母、光合细菌(球形红假单胞菌),可提高成参产量14.3%~16.4%。海洋胶红酵母、光合细菌和生化黄腐酸在海参育苗和养成中应用具有广阔前景。

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Al3+在一定酸度及1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(PAN)存在的条件下,与Cu(Ⅱ)-EDTA发生定量交换反应,生成物Cu(Ⅱ)-PAN可被氯仿萃取,通过测定水相残余铜,从而间接测定铝。本文利用这一原理,进行了火焰原子吸收光谱法测定水和废水中铝的试验。结果表明,铝浓度在0.1~1.0 mg/L范围内有良好的线性关系,方法检测范围为0.05mg/L~100mg/L。本法用于不同加标水样中铝的测定,相对标准偏差为3.2%~7.2%,加标回收率为94%~106%。方法灵敏度高,精密度和准确度好,检测范围宽,检出限低,完全满足现行卫生标准对水体中铝检验的要求,且实验仪器普通易得,便于推广应用。

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A plasticized Cr3+ ion sensor by incorporating 2,3,8,9-tetraphenyl-1,4,7,10-tetraazacyclododeca-1,3,7,9-tetraene (TTCT) ionophore exhibits a good potentiometric response for Cr3+ over a wide concentration range (1.0×10-6-1.0×10-1 M) with a slope of 19.5 mV per decade. The sensor response is stable for at least three months. Good selectivity for Cr3+ in comparison with alkali, alkaline earth, transition and heavy metal ions, and minimal interference are caused by Li+, Na+, K+, Co2+, Hg2+, Ca2+, Pb2+ and Zn2+ ions, which are known to interfere with other chromium membrane sensors. The TTCT-based electrode shows a fast response time (15 s), and can be used in aqueous solutions of pH 3 - 5.5. The proposed sensor was used for the potentiometric titration of Cr3+ with EDTA and for a direct potentiometric determination of Cr3+ content in environmental samples.

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Thiosemicarbazone derivatives have been used as ion carriers for the preparation of PVC-matrix based mercury(II)-selective membrane sensors. The electrodes give near-Nernstian responses in the linear concentration range of 1.0×10-1-5.0×10-6 M with detection limits of the order of 10-6 M. The stable potentiometric signals are obtained within a short time period of 20-25s. The effect of different plasticizers has been studied and dioctylsebacate (DOS) found to give a better response in comparison to other plasticizers. Selectivity coefficient values (log KPotHg,M) have been evaluated using fixed interference method. Better selectivity for mercury(II) ions is observed over many of the monovalent (Na+, K+ and NH4+) and divalent ions (Mg2+, Ca2+, Zn2+, Pb2+, Ni2+, Co2+, etc.). The sensors have also been used as indicator electrodes in potentiometric titration of mercury(II) ions with EDTA and its determination in synthetic water samples.

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通过室内模拟试验,采用振荡淋洗的方法研究了乙二胺四乙酸(EDTA)浓度、pH、淋洗时间对重金属去除效果的影响.利用一级反应动力学模型对试验数据进行拟合,并测定了EDTA处理前后土壤中重金属形态的变化.结果表明,EDTA溶液在浓度为0.1mol.L-1、pH7、淋洗时间1d的条件下能达到对污染土壤重金属的最大去除率,去除率分别为Cd89.14%、Pb34.78%、Cu14.96%、Zn45.14%.模型拟合结果表明,Cd的质量转移系数最大,其次是Zn、Pb和Cu.说明在土壤淋洗过程中,Cd和Zn最先达到质量转移的平衡状态,然后是Pb和Cu.形态分级结果表明,EDTA能有效地去除交换态、碳酸盐结合态和氧化物结合态重金属,而对有机态和残余态部分重金属作用效果不明显.

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为探讨螯合剂对植物吸收重金属的影响,采用盆栽试验,研究了螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)和柠檬酸(CA)对土壤重金属Cd的的的态的及的用的的的(Beta vulgaris var.cicla L)富集Cd能力的影响。结果表明:EDTA的添加比柠檬酸更显著增加了土壤重金属镉的的的态含量,同时提高了的用的的的茎的的富集系数和转运能力;施用螯合剂促进了Cd从的用的的的茎的菜部菜茎的的菜菜,的用的的的茎的含Cd量显著增加,EDTA的作用是柠檬酸的2~3倍。

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选用六种不同树脂,对含有单一及复合重金属(Cd、Pb)的水溶液和EDTA溶液进行了吸附和洗脱试验。结果表明:吸附和洗脱效果的重要影响因子是被吸附和洗脱的清(淋)洗液(或污水)的类型,而不是吸附和洗脱时间。在所试的六种树脂中,集最佳的吸附回收与洗脱纯化效果于一体的树脂是110H号(北京产)。

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在实验室条件下,通过生理盐水浸提、硫酸铵分级沉淀、亲和层析、阴离子交换层析以及凝胶过滤层析,从纳豆中提取纳豆激酶。纯化后的纳豆激酶样品在SDS-PAGE银染中呈单一条带,纯度经密度扫描证实在95%以上,纤溶活性总收率达到52.9%。纳豆激酶性质研究结果发现,其最适pH值为7.5,对温度变化敏感,纤溶活性可被Ca2+,Ba2+,Na+等金属离子激活。纳豆激酶在水溶液中受EDTA强烈抑制及低离子强度条件下产生自我降解现象。