BFJ-21诱变小轮虫品系在不同饵料培养下的增殖、营养及其对黑鲷（Sparus macrocephalus）仔鱼的饵料效果

BFJ-21是从褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)中人工诱变产生的一个小型品系。本文从“饵料—轮虫—仔鱼”的食生链角度研究了该轮虫品系在三种海洋微藻及面包酵母培养下的增殖、营养及其对黑鲷 (Sparus macrocephalus)仔鱼的饵料效果。结果表明：在单一饵料培养下，轮虫摄食球等鞭金藻(Isochrysis galbana)增殖最快(r = 0.6297)，摄食三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)次之(r = 0.5976)，摄食小球藻(chlorella sp.)再次(r = 0.5096)，摄食面包酵母增殖最慢(r = 0.2041)。各饵料所培养的轮虫，其营养质量及饵料效果由优至劣依次为，小球藻轮虫，褐指藻轮虫，金藻轮虫和酵母轮虫。但酵母轮虫经小球藻营养强化12小时后，营养质量及饵料效果则明显改善。另外，轮虫在小球藻及金藻的混合饵培养下比单用小球藻或金藻培养有更高的种群增长率(r = 0.6492)。对各饵料及轮虫的营养成分含量及其相互关系进行了考查，结果表明酵母中不含w3HUFA，而小球藻中含量很丰富(24.7%)。w3HUFA含量在饵料与轮虫之间有明显的正相关关系。蛋白质及糖含量在饵料及轮虫之间则不相关。脂肪含量在藻类饵料及其培养的轮虫之间亦有正相关性。对不同饵料下轮虫个体培养的生长繁殖亦作了研究。同时，通过与非诱变轮虫作对照，进一步证实了该诱变轮虫系的某些优良特性。最后，对如何在大量培养中使BFJ-21轮虫品系既可快速增殖又具高营养质量的培养方法进行了探讨。

刺参遗传连锁图谱构建及卵母细胞成熟过程研究

第一部分 刺参遗传连锁图谱的构建 利用AFLP和微卫星标记以一个远缘地理杂交家系为作图群体，以拟测交理论为作图策略，构建了刺参Apostichopus japonicus的雌性和雄性遗传连锁图谱。利用62对AFLP引物组合，对亲本和93个个体进行了分离分析，共得到3572个标记，其中具有多态性的标记为点数为1133个，多态性比例为31.5%。平均每个引物对产生18.3个多态片段。1133个多态性位点中，294个标记在父母本中都出现并在后代中分离，839个标记在父本或母本中出现并在子代分离，其中母本443(52.8%)个分离标记，父本396(47.2%)个分离标记。卡方检验显示，556个标记符合孟德尔1:1分离。筛选微卫星标记中30个在家系中具有作图信息，其中19个可用于母本作图，19个可用于父本作图。 利用Mapmaker 3.0/EXP软件对分离标记进行连锁分析。358个分子标记用于雌性遗传连锁分析，其中包括19个微卫星标记，199个AFLP标记和11个微卫星标记定位在雌性框架图谱中。雌性框架图谱共有25个连锁群，总长度为3148.3 cM。标记之间最大间隔为37.5 cM，平均间隔为17.0 cM，连锁群的分子标记数最大为21个最小为4个。用于雄性连锁分析的分子标记共有332个，其中包含19个微卫星标记。207个标记定位于23个连锁群上，其中AFLP标记数为196个，微卫星标记数为11个。23个连锁群总长度为3059.8 cM，标记间最大间隔38.6 cM，平均间隔16.6 cM。每个连锁群的长度范围在40 cM到271.4 cM之间，标记数在18到4个之间，包括二、三连体在内的雄性连锁图谱共覆盖3227 cM。雌雄基因组的预测长度分别为4053.7 cM和3816.3 cM，因此，所构建的雌雄连锁图谱覆盖率分别为84.0%和84.5%。通过共有微卫星标记，有3个连锁群在两个图谱中对应。分子标记在两个图谱中呈均匀分布，没有成簇现象。 分子标记筛选、遗传图谱的构建为刺参分子标记辅助选择育种，经济性状QTL定位和比较基因作图打下基础，并且最终将促进中国刺参遗传改良和新品种的培育工作。 第二部分 卵母细胞成熟过程研究 对刺参卵母细胞的体外诱导成熟方法进行探索，并且通过透射电子显微镜、扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜结合超薄切片技术及间接免疫荧光染色技术研究卵母细胞成熟的生物学过程。 分别利用在海参中有诱导作用的海星神经提取液和二硫苏糖醇(DTT)对从成熟卵巢解剖出的刺参卵母细胞进行诱导成熟试验，结果显示，刺参的卵母细胞在海水中不会发生自发成熟，海星神经提取液以及神经提取液加滤泡悬浮液对卵母细胞没有诱导成熟的作用，而二硫苏糖醇处理可以诱导卵母细胞生发泡破裂，当DTT溶液的浓度处于10-1 mol/L到10-3 mol/L之间时，对刺参卵母细胞的促熟作用较为明显，在10-2 mol/L左右时，卵母细胞的诱导成熟率可以达到90%以上。未成熟的卵母细胞处于第一次减数分裂前期，不具备受精能力。经DTT诱导后，生发泡发生移动并破裂，染色体排列到赤道板上，然后第一、二极体先后排出，诱导成熟的卵母细胞排出极体的时间与自然受精的卵子一致。在卵母细胞成熟过程中有受精膜举起的现象，说明精子入卵不是受精膜举起的必要条件。卵母细胞只有在生发泡破裂之后才具有受精能力，从生发泡破裂到第二极体排出前的整个减数分裂过程中，卵母细胞都可以受精，但是只有在第一极体排出前受精的卵母细胞才能发生卵裂。人工促熟的卵母细胞受精后，形成的胚胎似乎并不能正常发育，试验过程中最多只得到了8细胞期的胚胎，之后细胞便产生畸形并停止分裂，最终裂解消失。 利用DTT诱导刺参卵母细胞成熟，综合运用光镜、电子显微镜及激光共聚焦技术观察卵母细胞成熟过程，分析了卵母细胞表面动物极突起在卵母细胞脱滤泡中的作用，以及卵母细胞动物极突起和微管组织在生发泡移动过程中所起的作用。卵母细胞通过动物极突起连接到滤泡上，在脱滤泡作用开始时，卵母细胞动物极突起刺入并穿过滤泡膜，使得滤泡膜表面形成一个缺口，然后整个卵母细胞开始从缺口处挤出。脱滤泡的作用力来源有两种：胶膜层的水合作用以及滤泡的收缩。通过激光共聚焦显微镜观察，未成熟的卵母细胞中存在5种类型的微管，并且有两个微管组织中心锚定在卵母细胞突起下方。减数分裂重新启动时，生发泡沿微管向动物极移动，至细胞膜下时破裂。微管解聚对照实验证明驱动生发泡移动的细胞结构为微管束。生发泡破裂后，两个微管组织中心组织形成减数分裂纺锤体，然后第一极体以“收缩-排出”的独特方式排出。 本研究填补了刺参繁殖生物学研究中的缺失环节，为刺参人工繁育技术提供理论基础和指导。

Characterization of eastern oyster (Crassostrea virginica Gmelin) chromosomes by fluorescence in situ hybridization with bacteriophage P1 clones

Chromosome identification is an essential step in genomic research, which so far has not been possible in oysters. We tested bacteriophage P1 clones for chromosomal identification in the eastern oyster Crassostrea virginica, using fluorescence in situ hybridization (FISH). P1 clones were labeled with digoxigenin-11-dUTP using nick translation. Hybridization was detected with fluorescein-isothiocyanate-labeled anti-digoxigenin antibodies and amplified with 2 layers of antibodies. Nine of the 21 P1 clones tested produced clear and consistent FISH signals when Cot-1 DNA was used as a blocking agent against repetitive sequences. Karyotypic analysis and cohybridization positively assigned the 9 P1 clones to 7 chromosomes. The remaining 3 chromosomes can be separated by size and arm ratio. Five of the 9 P1 clones were sequenced at both ends, providing sequence-tagged sites that can be used to integrate linkage and cytogenetic maps. One sequence is part of the bone morphogenetic protein type 1b receptor, a member of the transforming growth factor superfamily, and mapped to the telomeric region of the long arm of chromosome 2. This study shows that large-insert clones such as P1 are useful as chromosome-specific FISH probes and for gene mapping in oysters.

Chromosomal rearrangement in Pectinidae revealed by rRNA loci and implications for bivalve evolution

Karyotype and chromosomal localization of major (18-5.8-28S) and minor (5S) ribosomal RNA genes were studied in two species of Pectinidae, zhikong (Chlamys farreri) and bay (Argopecten irradians irradians) scallops. using fluorescence in situ hybridization (FISH). C. farreri had a haploid number of 19 with a karyotype of 3m + 4sm + 7sm-st + 4st + 1st-t, and A. i. irradians had a haploid number of 16 with a karyotype of 5st + 11t. In C. farreri, the major and minor rRNA genes had one locus each and were mapped to the same chromosome-Chromosome 5. In A. i. irradians, the major rRNA genes had two loci, located on Chromosomes 4 and 8, and the 5S rRNA gene was found at a third chromosome-Chromosome 10. Results of this and other studies indicate that karyotype of A. i. irradians (n = 16, 21 arms) is secondary and derived from an ancestral karyotype similar to that of C. farreri (n = 19, 38 arms) through considerable chromosomal loss and rearrangements. The ability to tolerate significant chromosomal loss suggests that the modal karyotype of Pectinidae and possibly other bivalves with a haploid number of 19 is likely tetraploid; i.e., at least one genome duplication has occurred during the evolution of Bivalvia.

21世纪企业的主要模式──敏捷制造企业

２０世纪９０年代以后，由于科学技术的迅猛发展，知识─技术─产品的周期日益缩短，如何加速开发质优价廉的新产品就成为企业竞争的核心内容。２１世纪即将到来，世界无疑将沿着２０世纪的道路继续向前发展，它的趋势是：新产品开发速度日益加快、产品生命周期不断缩短、生产批量越来越小、市场竞争日趋激烈；加上环太平洋地区的兴起，有能力参与这场竞争的企业不断增多。这一切虽给企业带来了机遇，但也给企业造成了严酷的生存环境。为了适应这种环境，１９９１年美国在总结日本、德国和本国经验的基础上，提出把现有企业改造成敏捷制造企业（ＡｇｉｌｅＭａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇＥｎｔｅｒｐｒｉｓｅ）的模式，并认为这是奠定美国２１世纪经济霸主地位的战略举措。敏捷制造企业是从客观经济发展的实践中总结出来的。我国如何改造企业并和世界经济接轨，敏捷制造企业给我们提出了值得高度重视的发展方向，本文对此作了较为详尽的论述。

21世纪智能机器人发展预测

智能机器人是作为扩大计算机的功能和人工智能的实验床而形成和发展起来的.80年代中期基于感觉控制的智能机器人进入实用阶段.90年代将以装配机器人为先导产品,以电子、电气、精密机械制造为先导应用产业普及,特种机器人也将取得突破性的进展.本文对21世纪的下一代机器人的单元技术,应用领域及其前景作了预测.