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下载PDF阅读器目的:克隆人、黑猩猩和叶猴FKN全基因及体外表达,比较研究FKN在进化过程中基因组水平和蛋白表达水平的差异.方法:应用基因重叠延伸拼接PCR法(Gene splicing by overlapping extension PCR,SOE-PCR)将FKN的3个外显子编码序列依次进行前后拼接,然后插入pcDNA3.1/myc-His(-)A真核表达载体中,经酶切、测序鉴定后转染CHO细胞体外表达,RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot检测其表达产物.结果:酶切、测序鉴定证实插入的基因片段为完整的FKN,RT-PCR可从转染的CHO细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段,其表达蛋白能分泌至胞外,SDS-PAGE显示其分子量约为95 000,抗c-myc抗体可与载体上的c-myc蛋白特异性结合.测序显示人、黑猩猩和叶猴相比,FKN基因除了有散在的点突变外,还发现有一明显的30 bp的缺失,但此缺失对FKN蛋白的表达并不影响.结论:成功克隆人、黑猩猩和叶猴FKN全基因,基因组水平和蛋白表达水平的比较研究为后续探讨FKN在高级灵长类物种进化过程中免疫学功能的演变奠定基础.

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根据对不同产地梅花鹿、马鹿、水鹿、白唇鹿线粒体DNA进行PCR扩增和序列测定,并与亲缘关系较近的伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较,找到鹿的特征片段,经过实际检测,筛选出鹿的种属特异性片段。

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以抗抑郁症药物的作用机制反推抑郁症的发病机制存在局限性,而且两者至今并不完全清楚.最近的证据显示基因和早期生活应激事件与抑郁症的发生存在密切关系,最终与神经可塑性的细胞分子机制汇聚.展现了对抑郁症的发生机制和抗抑郁症药物的作用机制的最新理解.

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提出应创建一门源于进化生物学与细胞生物学两者的交叉学科—进化细胞生 物学(细胞的进化生物学)。其根本任务在于用进化的观点考察真核细胞的一切方面,从它们 的起源和演化来认识它们的现在。列举了其具体的研究内容,分析了研究方法上的特点,指出需要把进化生物学的综合性分析与细胞生物学的实验研究最 紧密地结合起来。还论述了真核细胞的细胞器的“不进化”现象,指出了根本原因在于进化焦点的转移。参27

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以小鼠骨髓细胞染色体畸变试验、小鼠睾丸减数分裂染色体畸变及小鼠致畸试验为指标,研究金不换鲜三七液的安全性。结果:小鼠骨髓细胞染色体畸变试验;低、中、高3个剂量组小鼠骨髓细胞染色体畸变率分别为0.7%、0.2%和0.9%,与对照组相比无显著差异。阳性对照组染色体畸变率大大增高。小鼠睾丸减数分裂细胞染色体畸变:在该实验条件下,小鼠睾丸细胞染色体畸变率[包括性染色体单价体(X-YU),常染色体单价体(AU)]在各实验组和对照组之间无显著差异。小鼠致畸试验:小鼠口服金不换鲜三七液的累积剂量达15g/kg体重的1/10、1/5和1/2,小鼠致畸试验也无显著差异。

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