胭脂鱼弹状病毒对鲤科鱼类感染性的测定

中国科学院生命科学与技术特别支持费 (STZ 0 0 1 3 ) ; 中国科学院创新项目 (2 2 0 3 1 3 ) ; 淡水生态与生物 技术国家重点实验室基金 (1 999FB1 2 )资助

免疫组化法检测美国青蛙组织中的蛙虹彩病毒

分不同时间 ,收集经人工感染了蛙病毒的样蛙 ,取其心、肺、肾、肠、脾、肝六种组织 ,并通过免疫组化方法进行检测。结果分别在感染了病毒 3d、9d、1 1d后的幼蛙这六种组织中 ,由表及里观察到了深色的阳性信号 ,从而测定了病毒在入侵组织中的存在部位。其中 ,肺和肠组织中阳性信号最强 ,呈灶性分布 ,其余四种组织中的阳性信号则呈散在分布。在未注射病毒的幼蛙阴性对照组六种组织中没有检测到阳性信号。

孔雀鱼胚胎心血管发育的显微观察

国家重点基础研究计划 ( 973)项目 (G1 9990 5 390 8); 中国科学院生物特别支持费 (STZ 0 0 1 3)资助

中华鳖心组织成纤维细胞系的建立及特性

以中华鳖心组织为材料 ,用含 10 %胎牛血清的 TC199培养基 ,于 2 5℃条件下 ,经 14个月传代培养 6 0余次 ,获得一个能稳定生长、以成纤维样细胞为主的细胞系 ,称之为 TSH(Trionyx sinesis heart)细胞系。分别对其原代和传代细胞的染色体数目、不同温度下细胞的生长曲线及原代和传代细胞的显微形态进行了测定和比较。结果表明 ,细胞在2 5℃条件下生长速度最快 ;原代细胞约有 6 4%的染色体为 2 n=6 6 ,而传代细胞为四倍体的有 6 2 %。初步估计的细胞周期为 2

水生低等脊椎动物病毒生态学研究

中国科学院生物科学与技术研究特别支持费 (STZ -0 0 -13 )资助

从我国分离的3株蛙虹彩病毒与蛙病毒3型主要衣壳蛋白基因同源性的比较

中国科学院王宽诚基金 ( 1999) ; 中国科学院生物特支费 (STZ -0 0 -13); 国家重点基础 ( 973)项目 (G19990 5 390 8)基金的部分资助

迎接入侵种的挑战

中国科学院创新基金资助项目 (生物局青年科学家小组 ) ; 中国科学院生物科学与技术研究特别支持研究项目(STZ-97-1-0 1); 青藏高

三种水生动物病毒感染鱼类细胞的扫描电镜观察

国家重点基础研究计划 (973 )资助项目 (G19990 5 3 90 8) ; 中国科学院生物特支费资助项目 (STZ -0 0 -13 )

一种不运动的淡水甲藻的形态学和生活史观察

作者在湖北省武汉市一腐殖质丰富的小水泥池中发现了一种能形成水华的甲藻，经鉴定为巴达维亚胞甲藻，属植甲藻目，此目是中国新记录。通过野外观察和室内培养，对其形态学和生活史进行了研究。其营养细胞近新月形，腹部轻微隆起；每个细胞产生两个裸甲藻型的动孢子，动孢子再直接发育成一个新个体；环境不适时可形成静孢子或胞囊（Cyst）；静孢子近球形，由营养细胞收缩形成；球形的胞囊由原生质发育而来，位于母细胞壁内，外壁具“环形山”状的附属物。此种的胞囊为首次发现。

雌核发育银鲫和两性融合彩鲫卵母细胞体外诱导成熟过程中周期蛋白合成和MPF活性变化的比较研究

采用体外诱导卵母细胞成熟技术 ,比较研究了雌核发育银鲫和两性融合发育彩鲫卵母细胞成熟过程中周期蛋白合成和MPF活性变化情况。结果表明 :1 7α ,2 0 β 二氢孕酮(简称DP)浓度为 0 5μg/ml,温度为 2 4℃ ,光照时间 2 0小时为最适诱导条件。在相同条件下 ,两性生殖彩鲫卵母细胞体外诱导成熟速度明显快于银鲫。相应的细胞学研究表明 ,在体外诱导时 ,银鲫和彩鲫卵母细胞的发育成熟是正常的。银鲫卵母细胞生发泡破裂 (GVBD)时已有周期蛋白的合成 ,但生发泡破裂开始后则呈现合成速度下降直至没有

东亚低等鲤科鱼类细胞色素b基因序列测定及系统发育

采用PCR技术获得了14种主要分布于东亚的低等鲤科鱼类细胞色素b基因的全序列. 所得1 140 bp细胞色素b基因序列与10种取自GenBank, 分布在北美和欧洲的相关鲤科鱼类的同一基因序列一起排序后, 得到了24种鲤科鱼类的DNA序列矩阵. 此矩阵经过最大似然(maximum likelihood)法计算后获得了低等鲤科及相关种类的系统发育分支图解. 分支系统图显示鲤科的雅罗鱼亚科和亚科鱼类并不形成单系类群. 亚科鱼类中的马口鱼、等是原始的鲤科鱼类, 处于分支图的基部. 而其余的亚科鱼类则分散

绿球藻目的几个中国新记录属种

6个生境比较特殊而有趣的绿球藻目物种首次在我国发现,它们分别是生于土壤的香喇网绿藻(Dictyochloris fragrans Vischer ex Start),寄生于眼子菜叶片的浮萍绿点藻(Chlorchytrium lemmae Cohn.),气生种类—生长在樟树皮上的分层胶囊藻(Gloeocystis polydermatica(Kutz.) Hindak),与真菌共生形成地衣的土著共球藻(Trebouxia aboricola de Puymaly)和团集共球藻(Trebouscia glom

富铬酵母对实验性糖尿病小鼠模型的治疗

目的：三价铬作为葡萄糖耐量因子的有效活性成分，具有改善糖尿病人的糖代谢和脂代谢的作用，因此补充三价铬是糖尿病治疗中的有效的营养措施，富铬酵母是目前向人体提供三价铬的有效途径，并且葡萄糖耐量因子可以提高靶组织对胰岛素的敏感性而不促进胰腺的胰岛素分泌，为治疗糖尿病提供了一种新方法。 方法：（1）取昆明种小鼠，分对照与实验组，适应性喂养后实验组小鼠按40mg/kg体重注射STZ，对照组注射相应体积柠檬酸缓冲液,连续注射5天，3天后测血糖值，取血糖值≥11.1mmol/L为成功模型。成模小鼠分为两组，一组灌胃富铬酵母悬液4周，另一组灌胃蒸馏水4周，测血糖值。（2）取昆明种小鼠，分对照与实验组，适应性喂养后实验组小鼠按200mg/kg体重注射STZ，对照组注射相应体积柠檬酸缓冲液，3d后测血糖，取血糖值≥11.1mmol/L为成功模型。成模小鼠分为两组，一组灌胃富铬酵母悬液4周，另一组灌胃蒸馏水4周，测血糖值。（3）取C57BL/6J断乳小鼠，随机分为正常饲料组和高脂饲料组，分别用相应饲料喂养3 周。高脂饲料组又分为高脂饲料对照组和高脂饲料实验组。第3 周末, 高脂饲料实验组腹腔内按100mg/kg体重一次性腹腔注射STZ；正常饲料组和高脂饲料对照组腹腔注射相应体积的无菌柠檬酸缓冲液。继续喂养4 周。小鼠以第7周末血糖为准，≥11.1mmol/L为成功模型。成模小鼠分为2组，1组每日灌胃富铬酵母悬液，另一组灌服相应体积的去离子水，4周后，测血糖值。 结果：对Ⅰ型糖尿病小鼠，富铬酵母治疗2周后，治疗组血糖明显低于对照组血糖（p<0.05），4周后显著低于(p<0.01)；对Ⅱ型糖尿病小鼠，富铬酵母治疗2周后，治疗组血糖明显低于对照组血糖（p<0.05），3周后显著低于(p<0.01)；对肥胖引起的Ⅱ型糖尿病小鼠，富铬酵母治疗2周后，治疗组血糖显 著低于对照组血糖(p<0.01)，且血清胰岛素浓度之间没有明显差异。 结论：富铬酵母具有明显的降血糖作用，且不刺激胰岛素分泌

海带根中α-glucosidase 和PTP-1B 靶向生物活性物质的分离纯化及其抗糖尿病作用研究

海带根是一种治疗糖尿病的民间中药，在沿海地区有很长的民间用药历史。食用海带根能够有效降低糖尿病患者的血糖，起到治疗作用。本文目的在于发现海带根中抗糖尿病的天然活性物质并分析它们在糖尿病治疗中的靶点；进一步开发一种低价且无毒副作用的化学类新药或中药新药。 α-glucosidase和 PTP-1B是II型糖尿病的两个重要靶点，海带根提取物能同时作用于这两个靶点。通过抑制这两种酶，降低血糖水平，85%乙醇粗提物对两种酶的IC50分别为1589ug/ml、IC50 1271ug/ml。乙酸乙酯相和石油醚相分别抑制α-glucosidase和 PTP-1B，IC50分别为380ug/ml和220ug/ml。因此以α-glucosidase和 PTP-1B的抑制活性为导向，用天然产物化学的方法对活性成分进行追踪分离，寻找单体活性物质进而鉴定其结构。由于乙酸乙酯相具有α-glucosidase抑制活性，用硅胶柱层析（石油醚：丙酮5：1、1：1），（二氯甲烷：甲醇60：1、20：1、5：1），凝胶柱层析Sephadex LH20（二氯甲烷：甲醇1：1），HPLC （80% 甲醇-水），对α-glucosidase抑制剂进行分离，得到组分IC50 为3.6ug/ml。用质谱仪和核磁共振确定结构。 生物活性测定结果表明α-glucosidase和 PTP-1B是两种不同的物质，分别位于乙酸乙酯相和石油醚相。光照实验和高温实验表明抑制α-glucosidase的活性成分对光照和温度敏感。光照48h或者50℃ 12h而且对α-glucosidase的抑制活性显著降低，TLC检测并用FeCl3显色初步表明抑制α-glucosidase的活性成分可能是多数酚类物质。动物实验显示在1450ug/kg剂量下，乙酸乙酯相能够显著降低糖尿病小鼠血糖，与阴性对照组差异极显著（P<0.01）。表明，海带根提取物在体内和体外均呈现出抗糖尿病活性，是一种潜在的抗糖尿病药物。

三种红藻活性物质的发现及松节藻醇提物抗糖尿病药理研究

海藻是海洋生物中的一大类群，由于其特殊的生活环境，能够代谢产生大量结构独特多变和活性特殊多样的代谢产物，是化学和生物活性多样性研究的重要对象之一。我国海域辽阔，海藻资源丰富，为寻找结构新颖、生理活性独特的先导化合物，加强对海藻资源的开发利用，本论文对中国沿海的三种海洋红藻进行了化学成分和生物活性研究，同时对山东青岛海域生物量丰富的一种海洋红藻松节藻进行了动物体内抗糖尿病活性研究。 利用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及反相HPLC和重结晶等现代分离手段，对山东青岛沿海的红藻扇形叉枝藻（Gymnogongrus flabelliformis）进行了系统的化学成分研究，从中得到单体化合物26个，通过波谱学方法（IR、MS、NMR等）鉴定了他们的结构，分别为(3R,6R,7E)-(+)-3-O-phenylacetyl- 4,7-megastigmadiene-9-one（1），(3R,7E)-(-)-3-O-phenylacetyl-5,7-megastigmadiene -9-one（2），(3S,6R,7E)-(+)-3-hydroxyl-4,7-megastigmadien-9-one（3），(3S,5R,6S,7E)- (-)-3-hydroxy-5,6-epoxy-7-megastigmene-9-one（4），(3S,5S,6R,7E)-(+)-3-hydroxy- 5,6-epoxy-7-megastigmene-9-one（5），Dehydrovomifoliol（6），(3R)-(-)-4-[(2R,4S)-4- acetoxy-2-hydroxy-2,6,6-trimethylcyclohexylidene]-3-buten-2-one（7），2,3,3′-三溴-4,4′,5,5′-四羟基-1′-乙氧甲基双苯基甲烷（8），2,2′,3,3′-四溴-4,4′,5,5′-四羟基双苯基甲烷（9），3-溴-4,5-二羟基苯甲醛（10），2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲基甲醚（11），2,3-二溴-4,5-二羟基苯甲醇（12），N, N-二甲基酪胺（13），4-羟基苯甲酸乙酯（14），4-羟基苯甲基乙醚（15），4-羟基苯乙基乙酯（16），4-羟基苯乙酸甲酯（17），4-羟基苯甲醛（18），豆甾-4-烯-3-酮（19），胆甾-4-烯-3-酮（20），胆甾醇（21），尿嘧啶（22），尿嘧啶核苷（23），腺嘌呤核苷（24），丁二酸（25），5-羟基-4-甲基-5-戊基-2,5-二氢呋喃-2-酮（26）。其中化合物1、2为新化合物，化合物3为新天然产物，所有化合物均为首次从该属海藻中分离得到。通过 MTT 法对部分单体化合物进行了肿瘤细胞毒活性筛选, 结果表明，化合物8、9、10、12对筛选的所有细胞株均有较强细胞毒活性，化合物11对人肺癌细胞株（A549）、人肝癌细胞株（Bel 7402）、人结肠癌细胞株（HCT-8）有一定细胞毒活性。通过研究单体化合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-分泌的影响，对其进行抗炎活性筛选，结果表明，化合物8、9、11、13、17、23、24、25对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-分泌表现出明显的抑制作用。 从采自山东荣成镆铘岛的红藻小珊瑚藻（Corallina pilulifera）的乙酸乙酯萃取物中分离得到16个单体化合物，通过波谱学方法鉴定化合物结构14个（另外2个正在鉴定中），分别为2α-乙氧酰基-2β-羟基-A-降胆甾-5-烯-4-酮（27），胆甾-4-烯-3-酮（28），胆甾醇（29），3β-羟基-胆甾-5,24(28)-二烯-7-酮（30），2α-羟基-胆甾-4-烯-3-酮（31），6α-羟基-胆甾-4-烯-3-酮（32），3β-羟基-胆甾-5-烯-7-酮（33），(E)-phytol epoxide（34），Phytenal（35），3,7,11,15- tetramethyl-hexadec-2-en-1-oll（Phytol）（36），Loloilide（37），(3S,5R,6S,7E)-(-)-3-hydroxy-5,6-epoxy-7- megastigmene-9-one（38），Dehydrovomifoliol（39），4-羟基苯甲醛（40）。其中，化合物 31为新天然产物，化合物27为首次从植物中分离得到，所有化合物均为首次从该种海藻中分离得到。通过 MTT 法对分离得到的单体化合物进行了肿瘤细胞毒活性筛选,化合物27和化合物32对筛选的所有肿瘤细胞株均有细胞毒活性，且化合物27对人胃癌细胞株（BGC-823）、人结肠癌细胞株（HCT-8）和人卵巢癌细胞株（A2780）具有中等强度抑制活性。化合物28、化合物31和化合物33对人肝癌细胞株（Bel 7402）、人结肠癌细胞株（HCT-8）和人卵巢癌细胞株（A2780）有一定细胞毒活性。 从采自广西北海涠洲岛的多管藻Polysiphonia sp.的乙酸乙酯萃取物中分离得到6个单体化合物，通过波谱学方法鉴定化合物结构5个（另外1个仍在鉴定），分别为胆甾醇（41），3,7,11,15-tetramethyl-hexadec-2-en-1-ol（Phytol）（42），3-吲哚甲醛（43），4-羟基苯甲醛（44），4-羟基苯甲酸（45）。 对山东青岛沿海的松节藻 (Rhodomela confervoides) 乙醇提取物进行了初步的体内抗糖尿病活性研究，采用链脲佐菌素诱导的2型糖尿病（STZ-DM）大鼠模型对其进行体内降糖实验，结果发现，松节藻乙醇提取物在糖尿病大鼠体内不仅具有显著的降血糖作用，且呈现良好的量–效关系，而且能够纠正糖尿病引发的物质代谢紊乱，增加体重，提高试验动物的成活率，因此具有良好的应用开发前景。