浙江地方猪种线粒体DNA多态及遗传多样性研究

用ApaⅠ、AvaⅠ、BamHⅠ、BclⅠ、BglⅠ、BglⅡ、ClaⅠ、DraⅠ、Eco RI、Eco RV、HaeⅡ、HincⅡ、HindⅢ、HpaⅠ、KpnⅠ、PstⅠ、PvuⅠ、PvuⅡ、SacⅠ、SalⅠ、ScaⅠ、SmaⅠ、StuⅠ、XbaⅠ和XhoⅠ等25种识别6个碱基对的限制性内切酶分析了浙江地方品种猪、浙江野猪等30个个体的线粒体DNA,共检出30种限制性态型(morph),可归结成3种单倍型,其中BamHⅠ-B、BclⅠ-B、DraⅠ-B和XbaⅠ-C为首次发现;各单倍型间平均遗传距离(p)为0.005,群体的平均多态度(#pi#)为0.0008,均处于遗传多样性贫乏范围。

绵羊、山羊和岩羊mtDNA的RFLP及其遗传分化研究

用15种识别6碱基的限制性内切酶ApaⅠ、BamHⅠ、BglⅠ、BglⅡ、ClaⅠ、DraⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、HaeⅡ、HindⅢ、KpnⅠ、PvuⅡ、PstⅠ、SacⅠ和SalⅠ对绵羊、山羊和岩羊mtDNA的限制性片断长度多态性进行了比较研究,以探讨其遗传分化关系。

青海湖裸鲤 mtDNA 遗传多样性的初步研究

该文用 BclⅠ、AvaⅠ、BamHⅠ、PstⅠ、KpnⅠ、PvuⅡ 共6种限制性内切核酸酶, 分析了15尾青海湖裸鲤 mtDNA 的限制性片段长度多态性, 共检测出20个酶切位点, 发现 BclⅠ、BamHⅠ和 PvuⅡ 三种酶切类型具有多态性. 根据不同个体 mtDNA 的酶切类型, 青海湖裸鲤存在4种 mtDNA 单倍型, 计算 mtDNA 多态度 π 值为 0.0043, 初步认为青海湖裸鲤在线粒体 DNA 上存在较丰富的群体内变异。

云南保种山羊线粒体DNA限制性酶切研究

　采用碱变性法,提取来自云南省不同地区4个保种山羊的13个个体的线粒体DNA(mtDNA),并用ApaⅠ,AvaⅠ,BamHⅠ,BclⅠ,BcIⅠ，BglⅡ,ClaⅠ,DraⅠ, EcoRⅠ,EcoRⅤ,HaeⅠ,HindⅢ,KpnⅠ,PstⅠ,PvuⅡ,SacⅠ,SalⅠ,SmaⅠ,StuⅠ和XhoⅠ等20种限制性内切酶进行酶切分析。结果发现它们的线粒体DNA的分子量大 小约为15.8Kb；不同限制性内切酶的酶切位点分别为：DraⅠ有7个酶切位点，AvaⅢ有6个酶切位点，EcoRⅤ和StuⅠ共有5个酶切位点，HindⅡ和HaeⅡ有4个酶 切位点，BamHⅠ,BglⅡ,PstⅠ和PvuⅡ有3个酶切位点，ApaⅠ，ClaⅠ有两个酶切位点，其余有1个酶切位点。各保种山羊间未发现变异，说明云南的4个保种山 羊极可能来自于共同的母性祖先。

贵州汉族、苗族、布依族和水族人群线粒体DNA多态性研究

用16种限制性内切酶对150个样本进行了mtDNA的限制性片段长度多态性(RFLP)分析。共检测到31种限制性格局, 其中Hae Ⅱ-13型、EcoRV-3型和PstⅠ-型3种限制性格局 为新报道。综合这些限制性格局, 共得出28种mtDNA类型。运用UPG法和简约法分析了各mtDNA类型之间、各人群之间的聚类关系。结果表明: 水族人群的mtDNA变异度较大; 汉族和苗族的亲缘关系最近, 布依族和水族有着较远的亲缘关系。图4表4参28

云南龙陵黄山羊线粒体DNA限制性酶切分析

采用碱性变性法提取来自于龙陵县不同地区的18只黄山羊个体的线粒体DNA(mtDNA),并用Apa I、Ava I、BamH I、Bcl I、Bgl I、Bgl II、Cla I、Dra I、EcoR I、EcoR V、Hae I、Hind III、Kpn I、Pst I、Pvu II、Sac I、Sal I、Sma I、Stu I和Xba I等20种限制性内切酶进行酶切分析。 结果发现龙陵黄山羊线粒体DNA的分子量大小约为15.8Kb;不同酶的酶切位点分别为:Dra I有7个酶切位点,Ava II有6个酶切位点,EcoR V和Stu I共有5个酶切位点,Hind III和Hea II有4个酶切位点,BamH I、Bgl II、Pst I和Pvu II有3个酶切位点,Apa I、Cla I有2个酶切位点,其余有1个酶切位点。

甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的分泌表达

在西非热带植物Dioscoreophyllum cumminsii中存在着一种由两条多肽构成的甜度极高的蛋白Monellin。本研究根据已知的Monellin晶体衍射分析结果和毕赤酵母(Pichia pastoris)基因偏爱密码子设计并合成了连接两条多肽的重组基因,插入到毕赤酵母分泌表达质粒pGAPZαA中。扩增后,电击穿孔转化毕赤酵母GS115,筛选高产菌株放大培养。以5升罐发酵培养,表达量为150mg/L。经纯化,可以获得大于130mg/L的具有高甜度的活性蛋白。

基于Petri网的Web服务流程建模方法研究

随着网络应用的蓬勃发展,Web服务越来越普及。在实际应用中,往往需要对已有Web服务进行集成。目前通常的企业Web服务集成过程,都是先根据企业的业务流程建立相应的Web服务流程模型,再由此建立应用系统。而目前已有的建模手段的共同问题是：无法确保模型的正确性和与具体业务的紧密吻合。该文提出一种基于Petri网的Web服务流程建模方法。该建模方法通过将Petri网引入建模过程弥补了原建模过程中无法直观感受模型的不足,通过建立一套完备的形式化定义保证了建立模型的正确性,通过将紧同步随机Petri网引入建模过程可以更好的描述实际业务。通过使用该方法, 可以很好地解决现在Web流程建模过程中存在的问题。此方法也为其他领域中的流程建模仿真提供了一种很好的解决问题的方法和思路。

Ground state energy of He isoelectronic sequence treated variationally via Hylleraas-like wavefunction

In this study, the energy for the ground state of helium and a few helium-like ions (Z=1-6) is computed variationally by using a Hylleraas-like wavefunction. A four-parameters wavefunction, satisfying boundary conditions for coalescence points, is combined with a Hylleraas-like basis set which explicitly incorporates r12 interelectronic distance. The main contribution of this work is the introduction of modified correlation terms leading to the definition of integral transforms which provide the calculation of expectation value of energy to be done analytically over single-particle coordinates instead of Hylleraas coordinates.

一种带有精准调谐结构的有源RC低通滤波器的设计

提出了一种带有精准调谐结构的有源RC低通滤波器的设计方案,其截止频率为5MHz,并在0.18μm标准CMOS工艺线上流片得到验证.调谐精度达到(-1.24%,+2.16%),测试中得到验证.调谐系统所占芯片面积仅为主滤波器面积的1/4.调谐系统完成调谐功能后会自动关闭,降低了功耗以及对主滤波器的串扰.以50Ω作为源阻抗,滤波器带内3阶交调量(IIP3)好于16.1dBm.滤波器输入参考噪声为36μVrms.滤波器群延迟时间波动测试结果为24ns.滤波器功耗为3.6mW.带有这种调谐结构的滤波器容易被实现,可以用于很多无线低中频应用中,例如全球定位系统、全球通和码分多址等芯片系统中.

柞蚕核型多角体病毒B-ORF6L、ptp、lef-12基因克隆及表达

本研究克隆了柞蚕核型多角体病毒（Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus，ApNPV）基因组pstⅠ-B、pstⅠ-C、pstⅠ-J三个片段，测序分析了pstⅠ-B、pstⅠ-C片段全序列及pstⅠ-J片段一端序列。ApNPV pstⅠ-C片段长6663 bp，包括9个完整ORF及2个不完整ORF；ApNPV pstⅠ-B片段长7406 bp，包括5个完整ORF及2个不完整ORF。ApNPV pstⅠ-J片段末端测定的954 bp序列包括lef-12完整序列及p47和gta部分序列。本研究共鉴定21个ApNPV ORF序列，其中20个属首次报道，占ApNPV已报道基因数的50％。编码ORF同源性分析及克隆片断ORF组成、基因排列顺序分析表明ApNPV与鳞翅目NPV第Ⅰ类群中的OpMNPV、CfMNPV、CfDefNPV、EppoNPV关系较近。 本研究克隆了ApNPV B-ORF6L、ptp-1、ptp-2及lef-12 四个基因，并对这四个基因在柞蚕蛹体内的表达进行了转录分析，结果表明：ApNPV ptp-1、lef-12是早期基因，B-ORF6L、ptp-2是晚期基因。本研究将ApNPV B-ORF6L、ptp-2亚克隆至原核表达载体，并在大肠杆菌中获得高效表达。SDS-PAGE及Western blot分析表明：PTP-2原核表达分子量与预测分子量相符，B-ORF6L融合表达分子量较预测的分子量偏大。以原核表达的B-ORF6L、PTP-2蛋白作为抗原，成功制作了B-ORF6L和PTP-2蛋白兔多克隆抗血清。ApNPV蛋白组分印迹分析表明：B-ORF6L参与包涵体膜及ODV结构组成，是ApNPV结构蛋白；PTP-2不参病毒结构组成。 分子系统发育分析表明，杆状病毒分为4个大的类群，ApNPV属于鳞翅目NPV第Ⅰ类群，与OpMNPV、CfMNPV、CfDefNPV、EppoNPV关系较近，与AcMNPV、RoMNPV、BmNPV关系稍远。

小麦抗白粉病新基因PmCD1和抗条锈病基因YrCD的鉴定及分子标记筛选

本研究对自育小麦白粉病抗源“07鉴126”和条锈病抗源CD1437、CD0534-5进行抗性遗传分析和微卫星引物的筛选，建立了与PmCD1和YrCD抗病基因连锁的SSR分子标记，主要研究结果如下： 1.小麦白粉抗源“07鉴126”抗白粉病基因的鉴定和分子标记的建立 品系“07鉴126”对我国目前白粉菌强优势生理小种E09、E11和其它多种小种表现免疫或高度抵抗。Pm-sus是07鉴126的自然突变感病株。利用“07鉴126”和Pm-sus的F2抗病性分离群体进行抗条锈病性遗传分析和分子标记定位，结果表明，“07鉴126”的白粉抗性为显性单基因控制的全生育期抗性，暂命名为PmCD1；并筛选到了与PmCD1共分离的显性SSR分子标记Xbarc183。系谱分析和分子标记分析表明PmCD1来源于荆州黑麦。抗谱分析表明PmCD1不同于已知的黑麦抗白粉基因，是一个新的抗白粉病基因。Xbarc183这一分子标记的建立为PmCD1的分子标记辅助选择和抗病基因累加提供了方便。 2.小麦条锈抗源CD1437抗条锈病基因的鉴定和分子标记的建立 利用对优势条锈菌小种条中32免疫的小麦品系CD1437及其自然突变感病株Yr-sus杂交构建F2、F3抗病性分离群体。抗条锈病性遗传分析结果显示，1437的抗条锈性为显性单基因控制的全生育期抗性，该基因暂命名为YrCD。SSR分析发现，位于1B染色体上的7个SSR标记Xcfd65、Xgwm11、Xgwm18、Xbarc187、Xwmc406、 Xwmc419、Xwmc216依次分布在YrCD的一侧，与YrCD的遗传距离在1.7 cM至9.2 cM。YrCD和YrCH42的等位性分析显示二者可能为等位基因。YrCD和Yr24、Yr26的抗谱相似。系谱分析和分子标记分析表明贵农20是YrCD的供体。本研究推测YrCD、Yr24、Yr26和YrCH42可能是等位基因，并推测Yr-sus是缺失突变体。 3. 小麦条锈抗源CD0534-5抗条锈病基因的鉴定 利用对条中32免疫的小麦抗条锈病品系CD0534-5及其感病重组自交系CD0534-4建立F2抗病性分离群体。抗条锈病性遗传分析表明，CD0534-5的条锈抗性由两对独立的显性主效基因控制。用BSK法分析，发现其中一对基因与SSR分子标记Xgwm11、Xgwm18、Xwmc128、Xwmc419连锁，该基因是来源于贵农20的YrCD。另一抗性基因来源贵农19，是极有利用价值的未知抗性基因。 This study focused on the investigation and identification of a novel powdery mildew resistant gene PmCD1 in wheat lines 07jian126 and stripe rust resistant gene YrCD in wheat lines CD1482 and CD0534-5, and screened SSR markers tightly linked to them. The main results were as follows: 1.Identification and SSR markers screening of a novel powdery mildew PmCD1 in wheat line 07jian126. Using a Pm resistant wheat line 07jian126 and its Pm susceptible mutant, a F2 population was constructed. Pedigree and genetic analyses indicated that the Pm resistance in 07jian126 was tranderred from rye (Secale cereale L.) cv. Jinzhou and was controlled by a single dominant gene. Differential test using 21 Bgt isolates revealed that the Pm resistant gene in 07jian126 is novel and was temporarily designated as PmCD1. A dominant SSR marker Xbarc183/130 bp was found co-segregated with PmCD1 in the F2 population. The diagnostic band of Xbarc183/130 bp co-segregating with PmCD1 could be used as an ideal marker in marker-assisted-selection during wheat breeding program. 2. Identification and SSR markers mapping of yellow rust resistant gene YrCD in wheat line CD1437. Wheat line CD1437 was highly resistant to predominant Chinese stripe rust race CYR32 at both seedling and adult stages. A F2 population was developed from the cross of CD1437 and its Yr susceptible mutant Yr-sus. Genetic analysis indicated line CD1437 contains a single dominant gene, temporarily designated YrCD. Seven SSR markers on the chromosome 1BS including Xcfd65, Xgwm11, Xgwm18, Xbarc187, wmc406, Xwmc419and Xwmc216 were close linked to YrCD with a genetic dsitance 1.7 cM to 9.2 cM. YrCD came from wheat cultivar Guinong 20. Allelic test of CD1437 and Chinese cultivar Chuanmai 42 indicated that YrCD and YrCH42 were allelic. Reaction patterns of YrCD and Yr24, Yr26 to 21 PST isolates were the same. These results suggested that YrCD and Yr24, Yr26, YrCH42 might be allelic. 3.Detection and identification of yellow rust resistance genes in wheat line CD0534-5 Wheat line CD0534-5 was highly resistant to predominant Chinese stripe rust race CYR32, while its recombinant inbred line CD0534-4 was susceptible. Genetic analysis with a F2 population developed from the cross of CD0534-5 and CD0534-4 indicated line CD0534-5 contains two independent dominant genes. Four SSR markers on the chromosome 1BS including Xgwm11, Xgwm18, Xwmc128, Xwmc419 were found to linked with one gene in CD0534-5. According the locations of makers and pedigree, this gene in CD0534-5 was YrCD, from cultivar Guinong 20. Another resistant gene was from cultivar Guinong 19, different with those genes on 1B such as Yr10, Yr15, Yr5 etc, was a valuable resistant gene in wheat breeding.

长期施肥对黑土糖苷酶和磷酸单酯酶活性的影响

研究长期(25年)施肥对表层黑土(0~20 cm)土壤糖苷酶(α-葡糖苷酶、β-葡糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶)和磷酸单酯酶(酸性磷酸单酯酶和碱性磷酸单酯酶)活性的影响.结果表明:与不施肥和施用化肥相比,有机肥、有机肥配施化肥能显著地提高土壤糖苷酶和磷酸单酯酶的活性,这种活性的增加主要是随有机肥带入到土壤中的酶活性所引起.土壤糖苷酶和磷酸单酯酶活性与土壤有机碳量均呈极显著的正相关关系,磷酸单酯酶活性与土壤全磷的相关关系达到极显著水平.与其他糖苷酶相比,土壤β-葡糖苷酶对肥料施用的反应最敏感.