膜模拟体系的结构与振动光谱研究

生物膜的结构与功能是生命科学的重要课题，我们以单链表面活性剂和双链磷脂等双亲性分子为膜模拟体系主要进行了以下研究：1.制备了长链烷基胺的氢卤酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐和磷酸二氢盐等四个系列的二十余种化合物，并在研究四卤合金属酸（II）双烷基铵体系的基础上首次制得了链长为n≥8的六卤合金属酸（IV）双烷基铵类系列化合物。用热重和差示扫描量热等热分析方法研究了其热稳定性和热致相变过程随烷基链链的变化规律，用X-射线四圆衍射分析方法确定了四个有代表性化合物的晶体结构。研究结果表明，这些化合物均具有类似于生物膜双分子层的二维片层结构和类似于生物膜脂质本体凝胶-液晶相变过程的固-固结构相变，可以作为生物膜的优良固态模拟体系。2.系统地研究了双亲性化合物分子体系的拉曼光谱，发现了一些新的对烷基链构象化灵敏的谱带。系统地研究了长链脂肪酸、烷基胺和烷基胺氢卤酸盐等化合物的拉曼低频纵向声子模式（LAM）振动随烷基链链长的变化关系，并首次将LAM用于长链化合物的相变研究。通过考察拉曼谱带频率和强度随温度的变化，详细地讨论了癸胺盐酸盐和月桂胺氢溴酸盐的固-固相变过程的分子机制。3.用红外光谱方法考察了一些长链化合物的固-固相变过程，首次用红外光谱因子群分裂谱带强度比变化的方法确定了长链合物的结构相变温度，从分子水平上解释了月桂胺盐酸盐的两种不同结构相变过程的机制，将相变过程中分子间和分子内相互作用的变化加以区别。系统考察了溴化十六烷基三甲铵和十二烷基磺酸钠等表面活性剂水溶液体系的红外光谱随温度的变化确定了体系的凝聚胶-腋晶相变温度，讨论了不同相态中水分子的结构和水的挥发对凝聚胶相状态的影响，并发现十二烷基磺酸钠水溶液存在着两种不同结构类型的凝聚胶相，将固态正烷烃的红外光谱研究结果推广应用到研究水溶液体系，提高了水溶液状态下表面活性剂分子烷基链构象确定的定量程度。4.用差示扫描量热、红外光谱和拉曼光谱等方法考察了固态磷脂的相变过程，讨论了磷脂固-固相变过程中酰链、甘油骨架以及头部基团等不同部位相应的构象变化，合理地解释了无水磷脂的不同热历程中热分析数据有差异的原因。十余种稀土离子与磷脂脂质体相互作用的研究结果表明，稀土离子的加入明显地升高了磷脂的凝胶-液晶相变温度，稀土离子与磷脂的极性头部产生了稳定的键合作用，从而影响了磷脂酰链的构象有序度，同时还发现稀土离子对不同曲率的磷脂泡囊的构象影响有所不同。我们还探讨了一些抗癌药物（如Ge-132,顺铂和氟脲嘧啶等）与磷脂的相互作用。5.通过L-B技术考察了不同挥发溶剂对磷脂单分子层成膜性的影响，讨论了磷脂与短杆菌肽和无活菌素等分子在单分子层中的相互作用。结果表明在表面压力较高时，短杆菌肽D与磷脂分子间的相互作用比无活菌素的更稳定，单分子层在固相区域，短杆菌肽D在摩尔分数较低时其螺旋链与磷脂酰链有接近一致的分子取向。棕榈胺LB膜热稳定性的变温红外光谱研究结果表明，棕榈胺LB膜在加热过程中发生了由有序到无序的渐变，但比固态棕榈胺熔点相应的熔程加大。利用L-B中化学反应的方法制备了常规提拉下难以得到的水溶性分子的L-B膜。

Anti-HER-2-SEC2融合免疫毒素的构建和活性研究

以PCR技术从金黄色葡萄球菌基因组DNA中首次克隆编码成熟SECZ蛋白的全基因sec2。该基因共717bp，编码239个氨基酸，Genbank Accession number：AY450554。构建了SEC2的表达载体pET-28a-sec2，并在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达可溶性rSEC2蛋白。经亲和层析纯化，其纯度在95％以上，平均回收量为每升培养物40mg。纯化的rSEcZ保持了与野生型相当的生物学活性。以限制性核酸内切酶连接技术分别将两个抗人表皮生长因子受体HER-2单链抗体基因通过DNA Linker与sec2融合，构建融合基因b-l-sec2和ml小sec2，并以两种方式表达纯化。以pET-32a表达载体在E，coliAD494（DE3）中以氨基端融合大肠杆菌硫氧还蛋白（TrxA）形式高效表达融合蛋白TRX-B-L-SEC2和TRX-ML-L-SEC2，经亲和层析纯化，并以肠激酶切割得到成熟融合免疫毒素B-L-SEC2和ML-L-SEC2，其纯度在95％以上，平均回收量为每升培养物smg；以构建的新型表达载体pASK-75-EX在E.coliBL21（ED3）中以不溶性包涵体形式表达融合免疫毒素蛋白，经变性、纯化和复性后得到具有生物学活性的融合免疫毒素，其纯度在95％以上，平均回收量为每升培养物30mg。以两种方式制备的融合免疫毒素都保持了SECZ蛋白的免疫原性，都能有效刺激人外周血单个核细胞的增殖，并且都显示出在体外与HER-2过表达的乳腺癌细胞SK-Br-3特异性结合能力，具有显著的靶向性抑瘤作用。用PcR方法扩增了编码TrxA蛋白的基因trxA并克隆至表达载体pET-28a启动子上游，构建了一种在单质粒中利用两个相同的启动子游离共表达硫氧还蛋白与目的蛋白的表达载体。利用该载体可使TrxA与外源蛋白在大肠杆菌BL21（DE3）中以非融合形式高效共表达。共表达的TrxA可明显促进外源蛋白单链抗体ML3.9（scFv-ML）、3一轻基苯甲酸-6-单加氧酶（3HBA）的可溶性表达；并明显减少肠毒素C2（SEC2）、结核杆菌螺旋酶A亚基（GYRA）的包涵体表达。

Measurement of Be-10 in air filters using BeF- ions from BaBeF4

IEECAS SKLLQG

Spectra for electric-dipole Delta n=0 transitions in highly ionized sulfur ions

Spectra for Delta n = 0 transitions of the type 2s(2)2p(k)-2s2p(k+1) or 2s2p(k)-2p(k+1) from highly ionized sulfur produced in beam-foil excitation are investigated and compared to similar spectra measured with other types of light sources. In the experiment, fifty lines have been identified, of which eleven lines are new and accurately measured. Analysis of spectra was based on comparisons with other experimental results and calculated values.

抗Her-2-scFv-SEC2融合免疫毒素的构建和功能研究(英文)

用基因工程方法,将金黄色葡萄球菌肠毒素 C2 与抗人表皮生长因子受体 HER-2 单链抗体 scFv-B1,以一连接短肽连接,构建融合免疫毒素 B-L-SEC2,并用改进的新型表达载体 pASK75-EX,在大肠杆菌 BL21(ED3)中表达. 以不溶性包涵体形式表达的目的蛋白经变性后以镍离子螯和层析纯化,并以透析法进行复性. 流式细胞术和 MTT 实验结果表明,纯化复性的融合免疫毒素 B-L-SEC2,在体外具有与 HER-2 过表达的靶细胞 SK-Br-3 特异性结合的活性,并对该细胞产生显著的特异性生长抑制作用.

A new zirconocene complex, [{eta(5)-C5H4-C(CH2)(5)(CH2)(2)CH(CH3)(2)}2ZrCl2]

The title compound, dichlorobis{eta(5)-[1-(3-methylbutyl)-cyclohex-1 -yl]cyclopentadienyl}zirconium(IV), [ZrCl2-(C16H25)(2)], has a pseudo-tetrahedral bent-metallocene structure in which the substituted cyclopentadienyl rings are asymmetrically bonded to the central Zr atom, due primarily to the interaction between the large substituents and the Cl atoms. The molecule has local C-2 symmetry with the substituents positioned in a trans arrangement and directed towards the lateral sectors of the bent-metallocene unit.

固体酸催化剂的分子设计初探

高效固体酸催化剂无论对现有工业生产还是从环保考虑都是十分需要的。鉴于均相和多相酸催化剂的活性部位有诸多共同特点（化学性质和对反应机理以及控制步骤速度的影响），根据现代均相酸催化理论，以Ｂｒｏｎｓｔｅｄ酸和Ｌｅｗｉｓ酸为例，广泛讨论了类似活性部位的异同，探讨了活性部位在均相和多相酸催化反应中结构和机理上的类似性以及固体晶格在形成固体酸催化剂活性部位时的特殊作用，并对阳碳机理作了评价，最后对固体酸催化剂的设计提出了建议。