胡杨体细胞再生植株及耐机制的研究

胡杨（Populus euphratica Oliv.）是干旱荒漠风沙前治地区唯一分布的乔木树种，具有极强的抗逆性，突出地表现出较强的耐盐碱能力。由于胡杨在繁殖上存在问题，种子采后极易丧失生活力和无性扦插繁殖难以生根，加之人们对胡杨耐盐抗逆机制缺乏了解，应而极大地制约了这一珍贵抗逆种质资源的开发和利用，现有资源的保存也受到严重危胁。试验首先利用植物细胞工程技术开展了胡杨体细胞再生植株的系统研究，并在分子水平上就愈伤组织的培养和器官发生过程中表达的特异蛋白开展了深入工作。其次，对胡杨耐盐机制进行了研究，分析了胡杨细胞盐胁迫响应蛋白，开展了盐胁迫条件下细胞对离子吸收和分配特性以及与耐盐有关的形态结构的研究。这一工作的开展对于有效地保存、开发和利用胡杨种质资源，对于荒漠化治理，以及深入认识胡杨耐盐性、丰富和发展木本植物耐盐理论，具有十分重要的意义。 研究取得的主要结果如下： 1.较好地解决了胡杨试管培养中黄萎和退化等难以克服的问题，通过全面和系统的比较研究和对培养条件的优化，首次获得了高频率的和成熟的胡杨体细胞再生植株体系。胡杨愈伤组织、离体叶片和离体茎段不定芽再生频率分别可达82.9％、100％和83％，试管苗生根为86.2％。 2.提出了以愈伤组织表达蛋白状况作为判定其器官发生能力的观点，确定了三类愈伤组织和器官发生中三个不同分化阶段的蛋白分子标记。利用SDS-PAGE和IEF－SDS－PAGE对胡杨不同类型愈伤组织和愈伤组织分化不定芽过程的蛋白进行了研究。结果表明：不同类型愈伤组织中表达的蛋白存在着一定差异。在光下和BA／NAA为1诱导产生的具有较强器官发生能力的茎基愈伤组织，其蛋白组分明显地少于其它类型的愈伤组织，表明其分化程度较低。经过黑暗和BA／NAA为0.5的继代培养，愈伤组织产生了特异的24。5KD和58.6KD的标记蛋白，并且也表达了其器官发生时表达的19KD和31KD蛋白。说明愈伤组织经过继代培养其器官发生能力下降是与细胞分化程度增加相关的。茎基愈伤组织在光下和BA／NAA为5的条件下进行器官发生诱导，随着愈伤组织形成分生细胞团块和不定芽原基明显地表达了20KD和55KD蛋白带，并且20KD蛋白中包含有特异的pI为5。5－6.5的蛋白。43KD和pI为6.5-7.5的蛋白为器官发生前期蛋白。本文不愈伤组织表达蛋白状况与器官发生能力间关系进行了讨论。 3.分离和鉴定了胡杨细胞盐胁迫响应蛋白，从蛋白表达上证实盐胁迫对胡杨细胞产生的影响明显地分为渗透胁迫和离子伤害胁迫两种效应。对悬浮培养的胡杨细胞进行NaCL和PEG(6000)胁迫处理，SDS－PAGE分析表明：NaCL和PEG胁迫处理的细胞均明显地表达了28KD和59KD蛋白带，表明28KD和59DK蛋白是与渗透胁迫有关的。66KD和60KD蛋白带仅在高水平盐胁迫细胞中显著表达，应而是与盐胁迫中离子伤害有关的蛋白。进一步证实胡杨细胞中28KD和66KD蛋白带表达受ABA诱导。通过IEF－SDS－PAGE证实，28KD蛋白包含有pI为8.0-9.0的蛋白，渗透胁迫和离子胁迫相关的分离和鉴定为通过蛋白途径克隆与渗透胁迫和离子胁迫相关基因，为深入认识胡杨耐盐机制奠定了基础。 4.通过X－射线细胞微区分析以及与毛白杨细胞比较发现，胡杨细胞对培养介质中高浓度的盐离子具有较强的拒吸作用和一定的忍耐性。胡杨细胞中液泡不具有积聚离子的功能，细胞分室性渗调节作用不明显。胡杨细胞膜对离子进入具有选择功能，表现在培养介质中Na和CL离子进入细胞和由细胞质进入液泡不以等摩尔数形式进行，进入的CL离子比Na离子约高50％，说明了二者通过质膜是由不同机制控制的，是分开进行的，也说明胡杨细胞拒Na离子强于拒CL离子。另外胡杨细胞受到盐胁迫时还表现出比较强的维持细胞内离子平衡的功能。正是由于上述特性，才赋予了胡杨细胞具有较强的耐盐性。 5.利用电子显微镜和光学显微镜中相差和微分干涉等技术，对胡杨细胞和组织结构进行了观察。与毛白杨细胞相比，胡杨细胞中具有较丰富的线粒体和质体，盐胁迫和渗透胁迫均明显地提高了细胞质中线粒体数和质体数，并使质体中内含体增多，细胞质中和液泡内缘出现明显的嗜饿物质。研究还发现，胡杨细胞膜与细胞壁之间呈齿状结合，说明了膜与壁之间结合的牢固性和稳定性，解释了胡杨细胞在胁迫中不易发生质壁分离的原因。胡杨细胞在受到盐或渗透胁迫时，细胞内出现明显的丝状结晚，细胞核变大，核仁明显。在器官和组织结构方面，胡杨根系具有发达的根冠和根内皮层，根毛较多，叶片输导组织不发达等。这些结构的存在与胡杨的抗逆性是密切相关的。文中从形态结构上阐述了胡杨的耐盐碱特性。

新疆有花背蟾蜍分布的再证实

2007年6～7月在新疆两栖类考察过程中，于乌鲁木齐北京五家渠市安宁渠镇附近(海拔1655 ft,N:44°01.705',E:87°30.763')采集到两种蟾蜍标本.

Phylogeographic analysis of mitochondrial DNA haplogroup F2 in China reveals T12338C in the initiation codon of the NDS gene not to be pathogenic

In this report, we studied on a homoplasmic T12338C change in mitochondrial DNA (mtDNA), which substituted methionine in the translational initiation codon of the NADH dehydrogenase subunit 5 gene (ND5) with threonine. This nucleotide change was originall

最原始的真核生物-源真核生物的核骨架

国家自然科学基金

不同世代改良型路南奶山羊血液免疫学参数的比较研究

本文测定了“改良型路南奶山羊”的亲本及改良不同世代 (F1,F2 ,F3,F4 )母羊的外周血T淋巴细胞转化率、ANAE阳性率、B淋巴细胞ZYC花环率、红细胞IC花环率、C3b花环率以及血清γ -球蛋白等免疫学参数 ,比较研究其随着世代增递的变异情况。结果表明 :从亲代到F4代随着改良世代的递增 ,T淋巴细胞转化率、ANAE阳性率、红细胞C3b花环率和IC花环率和血清γ -球蛋白含量均呈F1>F2 >P >F3>F4变化 ,ZYC花环率呈F1>P >F2 >F3>F4变化。回归分析的结果表明 :从亲代到改良四代 ,上述各项免疫学参数均呈显著负相关 ,趋势线为下降趋势。即随着世代的递增有逐代递减的趋势。结果提示 :用西农莎能羊改良路南圭山羊 ,其改良一代和二代的上述各项血液免疫学参数均略高于路南圭山羊 ,以后随着世代的递增有逐代递减的趋势。预示着随着世代的递增 ,改良型路南奶山羊的体质状况 ,免疫功能和抗病能力可能会出现下降趋势。

中国逍遥蛛科二新种记述(蛛形纲: 蜘蛛目)

记述了采自新疆及四川的逍遥蛛属(Philodromus)及长蟹蛛属(Tibellus)各1新种:(1)新疆逍遥蛛P. xinjiangensis sp. nov.,与P. mysticus最为近似,但外雌器中隔和触肢器细微结构不同。(2)朱氏长蟹株T. zhui sp. nov.,其外雌器形态特别,而易与T. tenellus等种区别。模式标本新种(1)存中国科学院动物研究所,新种(2)存白求恩医科大学生物教研室。图7参2

利用染色体涂染方法建立人和白眉长臂猿(Hylobates hoolock)的比较染色体图谱

自人与白眉长臂猿的祖先分歧以来,大量的染色体间重排(至少发生了39次易位)和染色体内的重排导致了二者核型的差异。根据杂交结果绘制了首份人和白眉长臂猿比较染色体图谱,并结合已有的人和白掌长臂猿(Hylobates lar)(2n=44)和合趾长臂猿(Hylobates syndactylus)(2n=50)的比较染色体图谱对长臂猿属的染色体进化作了初步探讨。

Phylogeny of east Asian bufonids inferred from mitochondrial DNA sequences (Anura : Amphibia)

We investigated the relationships of Asian bufonids using partial sequences of mitochondrial DNA genes. Twenty-six samples representing 14 species of Bufo from China and Vietnam and 2 species of Torrentophryne from China were examined. Three samples of Bufo viridis from Armenia and Georgia were also sequenced to make a comparison to its sibling tetraploid species B. danatensis. Bufo americanus, from Canada, was used as the outgroup. Sequences from the 12S ribosomal RNA, 16S ribosomal RNA, cytochrome b, and the control region were analyzed using parsimony. East Asian bufonids were grouped into two major clades. One clade included B. andrewsi, B. bankorensis, B. gargarizans, B. tibetanus, B. tuberculatus, its sister clade B. cryptotympanicus, and the 2 species of Torrentophryne. The second clade consisted of B. galeatus, B. himalayanus, B. melanostictus, and a new species from Vietnam. The placement of three taxa (B. raddei B. viridis, and its sister species, B. danatensis) was problematic. The genus Torrentophryne should be synonymized with Bufo to remove paraphyly. Because B. raddei does not belong to the clade that includes B. viridis and B. danatensis, it was removed from the viridis species group. The species status of B bankorensis from Taiwan is evaluated. (C) 2000 Academic Press.