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本发明涉及大蹼铃蟾缓激肽及其制备方法和其基因,属于生物医学领域。其缓激肽为从中国两栖类动物大蹼铃蟾(Bombina maxima)皮肤分泌物中分离得到的由19个氨基酸组成的一种单链多肽,分子量2180,等电点11.7,多肽氨基酸全序列一级结构为:DLPKINRKGPRPPGFSPFR。制备方法是收集大蹼铃蟾皮肤分泌物,离心去除沉淀、冷冻干燥后,经凝胶过滤、高压液相反相柱层析分离纯化后即得到。编码大蹼铃蟾缓激肽基因核苷酸序列由cDNA由829个核苷酸组成,编码成熟大蹼铃蟾缓激肽为第140-196,224-280,308-364,392-448,476-532,560-616位6个核苷酸重复单元片断,从两栖类动物皮肤中得到的缓激肽基因作为基因工程制备缓激肽的应用。

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利用地高辛标记技术,对从双峰驼肝脏和肾脏提纯的线粒体DNA进行了标记,制成探针,并用它检测了包含于白细胞总DNA中的微量线粒体DNA。结果表明这一技术完全可以成功地用于微量线粒体DNARFLP的分析。

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云南甘蔗细茎野生种不同生态类型的遗传变异较大,具有丰富的遗传多样性;低纬度类型的遗传多样性明显高于高纬度类型,在相同的纬度范围内,随着海拔的升高,其多态性逐渐减少;基于分子聚类分析,86份材料被划分为8个不同群体,表现出明显的地理分布的特点。