奶水牛卵胞质内单精子注射(ICSI)胚胎体外发育潜能的研究

本试验以奶水牛为研究对象,探讨卵胞质内单精子注射(ICSI)操作液中添加不同浓度聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、细胞松弛素(CB)、透明质酸(HA)对早期胚胎发育的影响.旨在探寻一套适合奶水牛ICSI的操作程序,为高效生产奶水牛体外胚胎提供科学依据.结果表明:4%PVP组卵裂率高于6%PVP组和8%PVP组(65.8%vs59.5%、44.4%,P<0.05):4%PVP组囊胚率高于6%PVP组(21.0%vs16.2%,P<0.05)和8%PVP组(21.0%vs8.3%,P<0.01);添加CB组的卵裂率高于未加CB组(73.3%vs68.9%,P>0.05),添加CB组囊胚率高于未加CB组(22.2%vs20.0%,P<0.05);操作液中添加1.5mg/mL HA更有利于胚胎的发育.1.5mg/mL HA组和4%PVP组相比较,操作过程中润滑作用相似,HA组卵裂率略高于PVP组(71.0%vs65.8%,P<0.05);HA组囊胚数略高于PVP组(22.6%vs21.0%,P>0.05).

利用夏季自然发情的云南黄牛进行奶牛胚胎移植效果研究

利用夏季自然发情的云南黄牛为受体,开展了奶牛体内冷冻胚胎移植.留用的114头受体牛中,本地黄牛59头,年龄在3～10岁,均为经产牛,最终移植27头,西杂牛56头(其中2岁以下的青年牛26头),移植29头(青年牛11头),两个品种受体利用率分别为45.8%和51.8%;移植后妊娠率分别为59.3%和55.2%;解冻的63枚胚胎移植给了56头受体牛,A级胚胎单独移植和B、C级胚胎搭配移植最终妊娠结果分别是58.5%(24/41)和53.3%(8/15);发情后第6 d和第7 d移植妊娠率分别为56%和58.1%.结果表明,1～10岁的西杂牛和3～10岁体型较大的本地黄牛均可作为受体移植奶牛胚胎;利用自然发情的云南黄牛做受体移植效果较为理想,是一种经济、方便、适合云南广大农村推广的技术途径;A级胚胎单独移植和B、C级搭配移植可获得较为理想的妊娠结果;处于发情后第6 d和第7 d的云南黄牛都可以作为桑囊期奶牛胚胎的移植受体.

杜泊羊冷冻胚胎移植的影响因素

下载PDF阅读器为进一步提高杜泊羊的冻胚移植成功率,于春秋两季同期处理湖羊和小尾寒羊受体共997只(次),同期发情782只(次),发情率达78.4%,其中湖羊春秋两季平均发情率为84.6%,显著高于小尾寒羊(73.9%)(P＜0.01),秋季两品种平均发情率83.3%,显著高于春季75.8%(P＜0.01);对431只发情受体羊进行移植,总妊娠率为58.5%(252/431),产羔率为58.0%(250/431).其中湖羊为受体的春秋两季平均妊娠率62.5%,高于小尾寒羊(54.7%);秋季两品种的平均妊娠率为64.8%,显著高于春季(52.5%).囊胚移植后的平均妊娠率为61.5%,显著高于桑椹胚(41.5%),其中A级囊胚为67.4%,显著高于B级囊胚(P＜0.05)和所有桑椹胚(P＜0.01);B级囊胚显著高于B级桑椹胚(P＜0.05),B级囊胚与A级桑椹胚间及A、B级桑椹胚间均无显著差异;C级囊胚和桑椹胚均未见妊娠.此外,受体羊卵巢黄体发育状况及移植技术熟练程度对妊娠率也有显著影响.

西藏当雄牦牛超数排卵及胚胎移植试验

2005年8月初,对西藏当雄10头5～10岁供体母牦牛实施了超数排卵试验,超排选用PGF2α+FSH刺激法和埋置阴道栓Cu-Mate+促卵泡素FSH刺激法,FSH的剂量为8.8～9.0 mg/头.根据超排后供体发情表现、黄体数量及获得胚胎数量及质量评定超排效果,将胚胎鲜胚移植给经同期处理的受体母牦牛.结果为:10头供体牛共获得7枚胚胎,PGF2α+FSH连续递减法得到5枚可用胚胎,Cu-Mate+FSH法没有冲到胚胎,5枚胚胎移植给5头受体后妊娠并出生4头牦犊牛.结论为:PGF2α+FSH连续递减法超排效果较好,胚胎移植取得初步成功.

外源激素刺激西藏藏北牦牛同期发情试验

下载PDF阅读器2005年8月初,对西藏藏北54头3～12岁受体母牦牛实施了同期发情试验,外源激素分别采用促排卵素LHRH-A3结合孕马血清PMSG处理法和氯前列腺素(PGF2α)两次注射处理法.结果表明:LHRH-A3+PMSG法处理6～9岁和10～12岁牦牛时发情率(可移植率)分别为93.3%(40%)和60%(20%),二次PGF2α法处理3～5岁、6～9岁、10～12岁牦牛时发情率(可移植率)分别为61.1%(5.5%)、70%(40%)和50%(16.7%).结论:LHRH-A3+PMSG法和二次PGF2α法都是成功的同期处理方法,受体在6～9岁时同期效果最好.

全放牧婆罗门牛和BMY牛的超数排卵效果及激素水平比较

为了比较婆罗门牛和BMY牛的雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平及胚胎生产潜力,并探讨MOET技术在BMY牛扩繁中的应用前景,采用进口激素(日本产FSH 24~36 mg+美国产PG 35 mg)和国产激素(国产FSH 10~12 mg+国产PG 0.8 mg)对全放牧婆罗门牛和BMY牛进行超排,并于超排前(同期发情第7天)、超排开始、超排第3天、超排发情当天和胚胎回收当天采集血液,采用RIA法分析血浆中的E2和P4水平。结果表明,BMY牛的黄体数和获胚(卵)数、可用胚数分别较婆罗门牛高2.09个和0.95、0.36枚,但差异不显著(P>0.05);BMY牛的排卵率较婆罗门牛高18.46%(P<0.01),而可用胚率则较婆罗门牛低2.55%(P<0.01)。BMY牛在5个处理时段的E2和P4平均值分别较婆罗门牛高0.58 pg/mL(P<0.01)和1.44 ng/mL(P>0.05),在各处理时段的P4水平变化规律几乎与婆罗门牛一致,E2/P4值为婆罗门牛的5.16倍。结果提示,BMY母牛的E2和P4水平高于婆罗门牛,在激素水平和繁殖性能方面表现出一定的杂种优势;E2水平低是婆罗门牛发情微弱和排卵率低的主要原因...

牛血清白蛋白对小鼠原核期胚胎玻璃化冷冻的影响

以小鼠原核期胚胎为对象, 以胚胎的存活率、卵裂率、囊胚率以及囊胚细胞数作为检测指标, 在M2 液的基础上添加8 种浓度(0 , 2 , 4 , 8 , 16 , 32 , 64 , 96 mg/ mL) 牛血清白蛋白(BSA) 配置防冻液, 探讨防 冻液和玻璃化冷冻后对胚胎发育的影响。BSA 防冻液对胚胎发育影响的实验结果表明, 8 个浓度组间以及与对 照组间胚胎的卵裂率、囊胚率以及囊胚细胞数无显著差异( P > 0105) , 说明在防冻液中加入一定浓度的BSA 对小鼠胚胎无毒性作用。防冻液经玻璃化冷冻后对胚胎发育影响的实验表明, 8 个浓度组间冷冻胚胎复苏后的 存活率、卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数无显著差异( P > 0105) 。表明BSA 在这种防冻液中没有明显的保护作 用。从经济、实用、生物安全角度考虑, 不支持在玻璃化防冻液中添加BSA。

小鼠四倍体半克隆胚胎发育研究

半克隆U-9/G;7Q":9V2胚胎是通过注射体细胞核到未去核的卵母细胞中产生的# 在半克隆胚胎中!体细胞被用来作为精子的替代物# 然而!由于异常的染色体分离!构建的半克隆胚胎在激活后形成了非整倍体而导致胚胎发育受到严重影响!不能发育到期# 本研究通过抑制小 鼠半克隆胚胎在激活过程中染色体数目减半!避免非整倍体胚胎形成!研究四倍体半克隆$W9XKMY#"GV -9/G;Z#":9V!W-7%胚胎的发育和体细 胞核的掺入对胚胎发育的影响& 结果显示!W-7 胚胎的体外发育率显著高于二倍体半克隆胚胎!与正常受精卵及孤雌激活对照无显著性差异! 但W-7 胚胎的细胞数在桑椹胚和囊胚期比正常二倍体受精胚胎和孤雌激活胚胎少& 通过AZX;> 染色发现!W-7 胚胎囊胚期内细胞团$5::9K 79## [M\\]57[%细胞很少或者没有& 移植1& 个四倍体半克隆胚胎到& 只假孕母鼠体内!得到%* 个胎盘!但没有得到胎儿& 组蛋白乙酰化和 4’@ 甲基化检测显示!部分W-7 胚胎在囊胚期没有形成正常受精胚胎在57[ 和滋养外胚层$WK"Y89ZX"V9K/!WE%之间的差异分布& W-7 胚 胎的基因表达不依赖于细胞分裂次数而依赖于发育时间& 虽然W-7 胚胎避免了二倍体半克隆胚胎形成非整倍体现象!但由于W-7 胚胎没有 57[ 细胞或57[ 细胞很少!所以只能形成胎盘而不能形成胎儿& 本实验第一次较为全面地研究了W-7 胚胎的发育!同时也为研究体细胞核再 程序化’基因打靶技术提供了一种新的途径#

牛卵泡卵母细胞体外成熟的研究

研究了卵泡大小、卵泡液和卵丘细胞对牛卵泡卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:直径2～6 mm 卵泡中的卵母细胞成熟 率(7211 %) 最高,与直径小于2 mm(5814 %) 、6～8 mm(5614 %) 及大于8 mm(3510 %) 卵泡中的卵母细胞组差异显著;成熟培养基 中添加10 %的新鲜牛卵泡液(bFF) 对牛卵母细胞的体外成熟有促进作用,但高浓度的bFF(20 %、30 %) 则抑制牛卵母细胞的体外成 熟;卵丘- 卵母细胞复合体的质量影响卵母细胞的体外成熟,A、B、C 三级卵母细胞成熟率分别为8611 %、6613 %、3516 % ,卵裂率分 别为4218 %、3119 %、1015 % ,差异均显著( P < 0105) 。

雌性猕猴尿中生殖激素的变化

　用人血清激素放射免疫测定试剂盒,测定了4 只未孕雌性猕猴8 个月经周期尿中促黄体生成素 (LH) 、孕酮(P) 和雌二醇( E2) 的含量,结合对猕猴繁殖行为学的观察,研究了各激素分泌之间的关系及其与繁殖行 为的内在联系。结果表明:4 只雌性猕猴8 个月经周期的平均长度为(26. 25 ±2. 10) d ,行经时间(2. 25 ±0. 66) d , LH 峰值出现在(12. 75 ±0. 91) d ,平均峰值为(86. 30 ±20. 11) miu/ mL ;P 峰值出现在(19. 75 ±1. 87) d ,平均峰值为 (7. 47 ±1. 78) ng/ mL ;E2 峰值出现在(11. 75 ±1. 81) d ,平均峰值为(679. 11 ±90. 66) pg/ mL 。研究表明,人血清激 素放射免疫测定试剂盒可以测定出猕猴尿中生殖激素的变化趋势;LH、P、E2 的变化情况基本上能反映出猕猴月 经周期中卵泡形成、排卵及黄体形成的时间。

大肠阻塞模型绵羊血浆及组织中血管紧张素-Ⅱ(AⅡ)含量的变化

为研究大肠阻塞动物血浆及组织中A Ⅱ含量的变化,研究以绵羊为实验动物,进行结肠结扎作为大肠阻塞 模型动物,用放射免疫法对其血浆和组织中的A Ⅱ含量进行了测定。结果发现:模型组绵羊动物血浆A Ⅱ含量在术 后呈上升趋势,从第2 天开始显著高于手术前及对照组( P < 01001) ,在术后第2 天的密集采样中低于手术前和对照 组( P < 0105) ,第4 天显著低于手术前和对照组( P < 0101) ;模型组动物右心室和结肠结扎点后段A Ⅱ含量降低( P < 0105) 。结果提示:大肠阻塞动物血浆A Ⅱ含量随病情的发展而迅速升高,与病情的严重程度呈明显正相关。

印度、泰国和越南生物多样性概况

首先涉及到印度、泰国和越南３国陆生生物多样性主要栖息地──森林及自然保护区的概况，然后对３国的物种多样性以及生物多样性的就地保护，迁地保护及持续利用的情况作了介绍，并与我国的情况作些比较。

云南省奶牛胚胎移植试验

用12头黑白花奶牛, PGF_(2α)作同步发情处理后, 进行超数排卵处理。 12头供体牛共得胚135枚, 可用胚数118枚, 为总胚数的87.47%。平均每头得胚11.25 枚, 可用胚9.8枚。胚胎分别移植给20头同步发情处理的黑白花奶牛和20头黄牛 受体, 每头移植1枚胚胎。结果, 奶 牛受孕率为35%, 黄牛受孕率为40%。奶牛和 黄牛总受孕率为37.5%。图1表4参4

懒猴能量需求的研究

三组成年懒猴(Nycticebus coucang bengalensis)日均摄入量能值分别为210.19kJ/kG, 177.222kJ/kG和161.608kJ/kG; 日均消化能分别为191.89kJ/kG, 155.131kJ/kG 和146.783kJ/kG。据统计学方差及t测验分析表明:I—Ⅱ组之间和I—Ⅲ之间的日 均摄食量能值及日均消化能均有显著性差异。实验结果表 明: I组所饲喂的配 合饲料的组成优于Ⅱ、Ⅲ组并可做为懒猴 的长期用配方。表4参8

兔受精卵显微注射外源基因后体外培养的卵裂发育

从超数排卵的14只母兔获得438枚受精卵, 卵龄16-22h。显微操作在带微分干涉和相差的Nikon倒置显微镜下进行。注射针的尖端外径0.5#mu#m, 离尖端40和80#mu#m处的外径分别为4.2和6.5#mu#m。注射用外源基因是绵羊生长激素基因与MT-1启动基因藕连的线状DNA溶液(1ng/#mu#l)。140枚注射的受精卵和未注射的145枚受精卵(对照), 在Ham^sF-10培养液(补充生长因子)中培养(38℃, 5％的CO_(2))。结果培养48h后, 注射组卵裂发育率分别是: 未卵裂7.9％(11/140)、卵裂至2-4细胞期11.0％(16/140)、卵裂至8-16细胞期80.7％(113/140)。对照组相应的卵裂率分别是4.1％(6/145)、12.4％(18/145)和83.4％(121/145)。两组卵裂发育率相近。