软体动物线粒体基因组学及分子系统发生研究

本研究以双壳纲、翼形亚纲、珍珠贝目、扇贝超科的栉孔扇贝(Chlamys farreri )、海湾扇贝(Argopecten irradians)和牡蛎超科巨蛎属(Crassostrea)的长牡蛎(C. gigas)、葡萄牙牡蛎(C. angulata)、熊本牡蛎(C. sikamea)、香港巨牡蛎(C. hongkongensis)和近江牡蛎(C. ariakensis)5种牡蛎及异齿亚纲、帘蛤目、帘蛤科的紫斑文蛤(Meretrix pethechialis)为研究对象，系统的研究了以上物种的线粒体基因组全序列的特点。并以线粒体12个蛋白质编码基因的序列，在氨基酸和核苷酸水平上构建了软体动物的分子系统发生树。本研究旨在为利用线粒体基因组全序列全面构建软体动物分子系统发生树，为软体动物的系统发生和进化研究提供一种新的思路和前期基础工作，本研究主要内容分为以下三个部分： 一、栉孔扇贝和海湾扇贝线粒体基因组序列分析及分子系统发生研究 采用Long-PCR技术扩增了栉孔扇贝和海湾扇贝线粒体全基因组，利用步移法结合文库构建的测序策略获得了线粒体基因组的序列。海湾扇贝线粒体全基因组长度为16,211 bp，栉孔扇贝接近全序列长度为20,789 bp。两个基因组都编码35个基因，包括12个蛋白质编码基因，2个rRNA和21个tRNA。与典型的动物线粒体基因组相比，两个基因组都缺少一个蛋白质编码基因atp8和2个trnS, 在海湾扇贝基因组中有1个trnF的重复，而在栉孔扇贝基因组中有1个trnM的重复。基因排列比较显示，尽管海湾扇贝、栉孔扇贝和巨扇贝分类学上属于同一扇贝科，但是它们的线粒体基因排列非常不同。在四种扇贝中，虾夷扇贝与栉孔扇贝的基因排列顺序非常相似；即使排除tRNA的比较，栉孔扇贝和海湾扇贝基因组仅仅共享三个小的基因块；而海湾扇贝与巨扇贝仅有一个相同的基因块。在所有的系统发生分析中，四种扇贝稳定的系统发生关系得到强有力的支持，海湾扇贝较其他三种扇贝较早的分化出来；栉孔扇贝比其他两种扇贝与虾夷扇贝亲缘关系更近。贝叶斯法和最大似然法分析都支持扇贝超科的单系发生。 二、巨蛎属牡蛎线粒体基因组全序列分析及分子系统发生研究 采用Long-PCR扩增技术和步移法结合文库构建的技术策略获得了巨蛎属C. gigas、C. angulata、C. sikamea、C. hongkongensis和C. ariakensis 5种牡蛎线粒体全基因组序列，并于GenBank已公布的美洲牡蛎C.virginica序列进行比较研究。C. gigas、C. angulata、C. sikamea、C. hongkongensis和C. ariakensis线粒体全基因组长度分别为18,225 bp、18,225 bp、18,243 bp、18,622 bp和18,414 bp，都长于C. virginica基因组17,244 bp的长度。本研究的5种牡蛎线粒体基因组都编码39个基因，包括12个蛋白质编码基因，2个rRNA和25个tRNA。与典型的线粒体基因组相比，都缺少一个蛋白质编码基因atp8，有trnM、trnK和trnQ 3个tRNA基因的重复，更特别的是基因组中的rrnL分为两段，这在其它线粒体基因组中未见报道，有一个重复的rrnS；而C. virginica基因组编码37个基因，与其他牡蛎相比，没有trnK和trnQ重复，只有一个rrnS。基因排列比较显示，巨蛎属的5种牡蛎C. gigas、C. angulata、C. sikamea、C. hongkongensis和C. ariakensis基因排列完全一致，而与C. virginica的基因排列相比仍然有较大的差别，有多个tRNA发生易位。系统发生分析显示，C. gigas和C. angulata首先聚在一起，然后与C. sikamea聚为一支。C. hongkongensis和C. ariakensis聚成一支。C. virginica为单独的一支。系统树清楚的显示出C. gigas和C. angulata以及C. hongkongensis和C. ariakensis非常近的亲缘关系，这也是长期以来，牡蛎分类学上的经典问题，有学者认为C. gigas和C. angulata为同一物种，线粒体基因组的数据显示C. gigas和C. angulata可能达到不同物种的差异。传统分类上的“近江牡蛎”的“白蚝”和“赤蚝”，线粒体序列差别明显，完全支持两种牡蛎新种名的制定。 三、紫斑文蛤线粒体基因组全序列分析及分子系统发生研究 采用Long-PCR扩增技术和步移法结合文库构建的技术策略获得了紫斑文蛤线粒体基因组全序列。该基因组全长19,567 bp，编码36个基因，包括12个蛋白质编码基因，2个rRNA和22个tRNA。与典型的线粒体基因组相比，缺少一个蛋白质编码基因atp8和1个trnS, 有1个trnQ基因的重复。基因排列比较显示，双壳类的基因排列在低的分类阶元时相对保守。在帘蛤科中，紫斑文蛤M. petechialis和菲律宾蛤仔V. philippinarum共享四个完全一致的基因块，两个大的基因块是cox1-L1-nad1-nad2-nad4L-I 和 cox2-P-cob-rrnL-nad4-H-E-S2-atp6-nad3-nad5，另两个小基因块只包括tRNA基因。在以氨基酸序列构建的分子系统树中，帘蛤科紫斑文蛤与菲律宾蛤仔首先聚在一起，然后，它们与A. tuberculata形成一个进化枝。这一枝与H. arctica结合起来，支持异齿亚纲单系发生。

Fluorescence Characterization of Dissolved Organic Matter in East China Sea

Sea water samples were collected in the East China Sea in March and April, 2005, and three-dimensional fluorescence of dissolved organic matter was measured by fluorescence excitation-emission matrix spectroscopy. The position, number and intensity of fluorescence peak in the spectra and the relations of the peaks were analyzed to determine the type, distribution and origin of the fluorescence dissolved organic matter. Seven types of fluorescence peaks were detected from the samples. There are protein-like fluorescence peaks B with Ex(max)/Em(max) = 275/300 nm, D with Ex(max)/Em(max) = 225/295-305 nm, T with Ex(max)/Em(max) = 280/345 nm, and S with Ex(max)/Em(max) = 225-240/320-350 nm, two humic-like peaks A with Ex(max)/Em(max) = 250-255/410-455 nm and C 335-345/410-440 ran, and marine humic peak M with Ex(max)/Em(max) = 305 nm/400-420 nm. Peaks B, S and A appeared in all surveyed area. Peaks T and D appeared in the north of the surveyed area. Peaks M and C only appeared in a few stations. In the surface layer, the source of the fluorescence dissolved organic matter might be the fresh water outflow of the Yangtze River, while the fluorescence dissolved organic matter in the middle layer had double sources from the Yangtze River and the phytoplankton. The good correlationships of different fluorescence peaks showed the same source or some relationship between the protein-like and the humic-like fluorescence dissolved organic matter.

The Bopyridae (Crustacea: Isopoda) parasitic on thalassinideans (Crustacea: Decapoda) from China

Eight species among six genera of bopyrid isopods (representing the subfamilies Pseudionmae and loninae) infesting thalassinideans from China are reported. Of these, four species are new to science: Gyge.fujianensis n. sp., Progebiophilits elongatus n. sp., Upogebione bidigitatus n. sp., and Procepon liuruiyui n. sp., infesting Upogebia major (de Haan), Nihonotrypaea japonica Ortmann, Upogebia carinicauda (Stimpson), and Austinogebia wuhsienweni (Yu). One species, lone cornuta Bate, 1864, is recorded for the first time from Chinese waters and from a new host. Pseudione longicauda Shiino, 1937, Gyge ovalis (Shiino, 1939), and Progebiophilus sinicus Markham, 1982, previously known from Hong Kong or Taiwan, are recorded for the first time from mainland China, extending their range north.

Sorption and desorption of lead (II) from wastewater by green algae Cladophora fascicularis

Biosorption is an effective method to remove heavy metals from wastewater. In this work, adsorption features of Cladophora fascicularis were investigated as a function of time, initial pH, initial Pb(II) concentrations, temperature and co-existing ions. Kinetics and equilibria were obtained from batch experiments. The biosorption kinetics followed the pseudo-second order model. Adsorption equilibria were well described by the Langmuir and Freundlich isotherm models. The maximum adsorption capacity was 198.5 mg/g at 298 K and pH 5.0. The adsorption processes were endothermic and the biosorption heat was 29.6 kJ/mol. Desorption experiments indicated that 0.01 mol/L Na(2)EDTA was an efficient desorbent for the recovery of Pb(II) from biomass. IR spectrum analysis suggested amido or hydroxy, C=O and C-O could combine intensively with Pb(II). (C) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.

三江源区高寒草甸不同退化演替阶段土壤有机碳和微生物量碳的变化

以野外样地调查和室内分析法研究了三江源区高寒小嵩草草甸不同退化演替阶段群落中土壤有机碳和微生物量碳的变化.结果表明,放牧活动明显地影响了土壤有机碳和微生物量碳的含量.不同退化演替阶段期间,高寒小嵩草草甸土壤有机碳、微生物量碳含量在0～10 cm土层明显较高,且随着退化程度的加剧,分布在0～40 cm土层的土壤有机碳、微生物量碳含量明显降低;不同退化演替阶段,高寒小嵩草草甸由于家畜过度的啃食与践踏,不仅使得植物群落发生了逆向演替,而且土壤的肥力水平显著地下降,土壤向退化方向发展;高寒草甸的退化将使土壤有机质大量流失,氮素损失严重.随着退化演替过程的进行,高寒草甸土壤质量和土壤营养的持续供给能力逐渐退化,土壤有机碳和土壤微生物量碳含量也随放牧强度增加而迅速降低;相关分析表明,土壤有机碳和土壤微生物量碳与土壤含水量、土壤有机质、土壤速效氮呈显著正相关关系(P<0.05),说明土壤微生物量碳可作为衡量土壤有机碳变化的敏感指标,而土壤有机碳和微生物量碳含量可作为衡量土壤肥力和土壤质量变化的重要指标.

青海省泽库县草地现状与畜牧业可持续发展对策

在综述泽库县草地退化现状的基础上，综合分析了草地退化的原因，提出了畜牧业可持续发展的策略。泽库县的草地退化是自然因素和人为因素综合作用的结果。人类活动和气候变化是导致泽库县草地退化、区域生态环境恶化的两大因素，鼠虫害对它们产生的影响起了促进作用。只有合理利用和保护天然草地，优化产业结构，使草地生态系统步入良性循环，才能使泽库县的草地畜牧业协调发展。

土地利用变化对高寒草甸土壤有机质更新的影响

对青藏高原海北站区的自然土壤和扰动土壤进行高分辨率采样,测定土壤根系、有机碳及其~(14)C含量;用~(14)C示踪技术探讨土地利用变化对高寒草甸土壤有机质更新的影响.研究表明,土地利用变化对高寒草甸土壤碳循环影响显著. 耕作活动导致扰动土壤有机碳储量比自然土壤增加29.35%;扰动土壤剖面10～50 cm深土壤有机质的14C含量相对富集;自然土壤大多数有机碳储存在土壤表层,更新时间＜50 a,同一深度扰动土壤有机碳储量显著少,更新时间长(171～294 a);自然土壤10 cm以下有机碳主要为更新时间＞1 000 a的稳定碳所控制,扰动土壤的相应值出现在40 cm以下;自然土壤有机质更新产生的CO2通量为114 gC•m~(-2)•a~(-1),扰动土壤为48.7 gC•m~(-2)•a~(-1).

HPLC测定刺芒龙胆不同部位中3种有效成分的含量

目的：建立反相高效液相色谱法同时测定刺芒龙胆植物不同部位落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的含量。方法：采用ZORBAX SB-C18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇-水（含0．04％磷酸）的比例25：75，流速1mL·min^-1，检测波长238nm，柱温30℃。结果：3种成分均达到基线分离，落干酸、獐牙莱苦苷、龙胆苦苷的线性范围分别为0．039～1．56μg（r=0．9998），0．0725～1．45μg（r=0．9999），0．061～1．225μg（r=0．9997）；回收率为101．3％（RSD=2．6％），98．7％（RSD=3．1％，99．6％（RSD=1．2％）。结论：测定方法快速，结果准确、可靠。

古北和东洋界在我国东部的精确划界--据两栖动物

我国动物地理区划向以横跨古北界和东洋界而著称,但两界在我国东部即秦岭以东地区的精确划界始终没有明确的认识.依据我国东部河南、安徽和江苏省14个动物地理省2目10科17属42种两栖动物的分布资料,通过对物种相似性进行分析后表明,东部的分界呈现为一条过渡带:其北界为自秦岭-伏牛山-淮河-苏北灌溉总渠;其南界为伏牛山-桐柏大别山-淮南丘陵-通扬运河一线.讨论认为更准确的划界要依赖更多的动物类群,并从更大的尺度,进行深刻分析才能获得.

青海省阿尼玛卿山地区植物区系研究

阿尼玛卿山地区位于青海省东南部,约占北纬33°25′～ 36°20′,东经98°50′～102°25′.本地区共有种子植物56科、251属、752种.区系特征如下:(1)种类相对较少,特有属相对较多;(2)以北温带为主的温带性质明显;(3)在种一级水平上,以中亚成分和东亚成分,特别是其中各自联系着喜马拉雅的变型成分为主的分布,形成了区内以欧亚大陆温、寒地带典型成分为优势的、明显的温带性质及其高原、高山分布的特点;(4)植物的生活型以多年生草本为主,木本种较少,乔木更少;(5)在中国特有种的分析中,本区系与横断山和甘肃南部区系的联系最为密切;(6)生态环境对本区系特征的塑造表现为高寒生态因子的选择和高山特化的作用强烈,而在一定程度上湿冷生性质和寒旱生性质的高山特化作用更为明显;(7)表现出青藏高原植物区系的衍生性和年轻性;(8)植被以由嵩草属植物为建群种的高寒草甸和由金露梅、山生柳等分别为建群种的高寒灌丛为主;(9)以绿绒蒿等所体现的地区特色明显.综上所述,本区同唐古特地区在区系性质和特点等方面基本一致,所以,本地区不仅是唐古特地区植物区系中的一个具有代表性的区系之一,而且是其核心区系之一.

植物化学防卫与植食性哺乳动物的适应对策

植物化学防卫与植食性哺乳动物的适应是动物—植物系统协同进化研究的重要内容。植物次生化合物可降低动物的食物摄入量及消化率、蛋白质可利用率。某些次生化合物还影响植食性哺乳动物的正常繁殖活动。单宁是动物的重要觅食阻遏剂之一。动物在学习食物选择的过程中, 通过认知过程和感知过程处理食物信息, 选择食物项目。幼体在胚胎期和哺乳期能从母体获得食物信息, 或向有觅食经验的同胞伙伴学习处理食物的经验。动物亦可通过形成络和物, 改变体内环境, 通过微生物降解、氧化还原、基础代谢率等降低生理对策, 以降低植物次生化和物的影响。

催化极谱法测定产妇、新生儿全血和胎盘中的微量钼

在0.225 mol/L H2SO4 – 0.25 %苯羟乙酸- 3 % KC1O3 底液体系中, 钼有一个灵敏的极谱催化波, 用于测定临床样品中的Mo , 其峰电位- 0.30 V (对S.C.E ) 。23 种共存离子的含量低于允许存在量, 不干扰测定。方法的检出限1.4 ×10 - 10 g/ mL , 线性范围0.001～0.500 mg/L , 11 次测定的相对标准偏差为1.89 %～3.42 % , 标准回收率97.2 %～102.8 %。方法简便、快速。测定了西宁市35例分娩孕妇全血、新生儿脐血和胎盘中的钼, 获得了理想的结果。

矮嵩草草甸植物群落的光合特性研究

矮嵩草草甸植物群落的光合、暗呼吸和土壤呼吸的研究表明：光合作用的日变化在６月份接近平坦型，７、８月份呈午间降低型。矮嵩草草甸植物群落的光合作用受较低的光合面积指数及冠层叶片的受光势态的影响，存在着明显的光饱和现象，光补偿点及光饱和点相对于全日照光合有效辐射均较低，接近于单叶的光响应特性。裸露地面的土壤呼吸和植物与土壤体系的暗呼吸不仅与温度有关，而且与土壤水分状况和降雨量也有密切联系。影响草甸群落光合特性的主要因素有：高原地区强烈的太阳辐射，较低的光合面积指数和植物根系与土壤紧密结合所形成的草结皮层结构。

高寒小嵩草草原化草甸植物群落结构特征及其生物量

小嵩草（Ｋｏｂｒｅｓｉａｐｙｇｍａｅａ）草原化草甸的主要植物有３５种，隶属１１科，３０属。小嵩草为优势种，次优势种有异针茅（Ｓｔｉｐａａｌｌｉｅｎａ）、美丽风毛菊（Ｓａｕｓｓｕｒｅａｓｕｐｅｒｂａ）、紫羊茅（Ｆｅｓｆｕｃａｒｕｂｒａ）等；生活型以地面芽植物为主（６５．７１％），其次为地下芽植物（３４．２９％）；地上、地下部分生物量垂直分布呈典型的金字塔模式。地上、地下生物量主要分布在０－１０ｃｍ冠层和土层中，分别占地上、地下总生物量的９１．７９％和９０．４３％。每个植物类群生物量季节变化可由Ｌｏｇｏｓｔｉｃ模型表示：ＷＩ＝ｋｉ／［１＋ｅｘｐ（ＡＩ－Ｂｉｔ）］枯枝落叶生物量变化呈“Ｖ”型曲线。在生长季各类群生物量绝对增长速率具明显的差异，平均每天每平方米可生产干物质２．７９ｇ．年地上净生产量为３６８．４ｇ／ｍ￣２。所固定太阳能值为６６５５．１６ｋＪ／ｍ￣２．其中莎草类占３５．１０％，禾草类占２３．３３％，杂类草占３４．１５％，枯枝落叶占７．４２％。光能利用率为０．１０９７％。

Analysis of saturated free fatty acids from pollen by HPLC with fluorescence detection

A sensitive method for the determination of free fatty acids using 2-(2-(anthracen-10-yl)-1H-naphtho[2,3-dimidazol-1-yl) ethyl-p-toluenesuIfonate (ANITS) as tagging reagent with fluorescence detection has been developed. ANITS could easily and quickly label fatty acids in the presence of the K2CO3 catalyst at 90 degrees C for 40 min in N,N-dimethylformamide solvent. From the extracts of rape bee pollen samples, 20 free fatty acids were sensitively determined. Fatty acid derivatives were separated on a reversed-phase Eclipse XDB-C8 column by HPLC in conjunction with gradient elution. The corresponding derivatives were identified by post-column APCI/MS in positive-ion detection mode. ANITS-fatty acid derivatives gave an intense molecular ion peak at mlz [M+H](+); with MS/MS analysis, the collision-induced dissociation spectra of m/z [M+H](+) produced the specific fragment ions at mlz [M-345](+) and mlz 345.0 (here, m/z 345 is the core structural moiety of the ANITS molecule). The fluorescence excitation and emission wavelengths of the derivatives were lambda(ex) = 250 nm and lambda(em) = 512 nm, respectively. Linear correlation coefficients for all fatty acid derivatives are > 0.9999. Detection limits, at a signal-to-noise ratio of 3 : 1, are 24.76-98.79 fmol for the labeled fatty acids.