一种合成丙二醇醚有机固体碱催化剂及制法和应用

一种合成丙二醇醚有机固体碱催化剂是以季铵碱为活性组份，以ＭＣＭ－４１为载体，季铵碱嫁接量为０．５－１．５ｍｍｏｌ／ｇ。以氯丙基三甲氧基硅烷为偶联剂，环己烷为溶剂，ＭＣＭ－４１为载体，应用超声波技术简单温和地将季铵碱嫁接到载体ＭＣＭ－４１上。该催化剂制备方法简单，易操作，不易被空气中二氧化碳、水所污染，同时具有环氧丙烷转化率高，异构比例高，丙二醇醚选择性高及催化剂重复使用性能良好等特点。

一种2-吡啶甲酸铬的合成方法

一种２－吡啶甲酸铬的合成方法是２－甲基吡啶氧化为２－吡啶甲酸，分离出副产物三氧化二铬和芒硝，与三价铬盐发生络合反应，生成２－吡啶甲酸铬。本发明具有工艺过程操作简单，该方法原料价格便宜，反应副产物附加经济价值高，降低了原料成本，工艺操作简单，反应条件温和，节省了反应时间，同时大大降低了能耗及成本，也能提高收率，易于生产应用。

Population genetic structure of crimson snapper Lutjanus erythropterus in East Asia, revealed by analysis of the mitochondrial control region

The population genetic structure of the crimson snapper Lutjanus erythropterus in East Asia was examined with a 427-bp hypervariable portion of the mtDNA control region. A total of 262 samples were collected and 75 haplotypes were obtained. Neutrality tests (Tajima's and Fu's) suggested that Lutjanus erythropterus in East Asia had experienced a bottleneck followed by population expansion since the late Pleistocene. Despite the low phylogeographic structures in mtDNA haplotypes, a hierarchical examination of populations in 11 localities from four geographical regions using analysis of molecular variance (AMOVA) indicated significant genetic differentiation among regions (Phi(CT) = 0.08564, p < 0.01). Limited gene flow between the eastern region (including a locality in the western Pacific Ocean and two localities in the East Sea) and three geographic regions of the South China Sea largely contributed to the genetic subdivision. However, comparisons among three geographic regions of the South China Sea showed little to no genetic difference. Populations of Lutjanus erythropterus in East Asia are inferred to be divided into two major groups: an eastern group, including populations of the western Pacific Ocean and the East Sea, and a South China Sea group, consisting of populations from northern Malaysia to South China. The results suggest that fishery management should reflect the genetic differentiation and diversity in East Asia. (c) 2006 International Council for the Exploration of the Sea. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

Sequence analysis and functional study of thymidylate synthase from zebrafish, Danio rerio

The thymidylate synthase (TS), an important target for many anticancer drugs, has been cloned from different species. But the cDNA property and function of TS in zebrafish are not well documented. In order to use zebrafish as an animal model for screening novel anticancer agents, we isolated TS cDNA from zebrafish and compared its sequence with those from other species. The open reading frame (ORF) of zebrafish TS cDNA sequence was 954 nucleotides, encoding a 318-amino acid protein with a calculated molecular mass of 36.15 kDa. The deduced amino acid sequence of zebrafish TS was similar to those from other organisms, including rat, mouse and humans. The zebrafish TS protein was expressed in Escherichia coli and purified to homogeneity. The purified zebrafish TS showed maximal activity at 28 degrees C with similar K-m value to human TS. Western immunoblot assay confirmed that TS was expressed in all the developmental stages of zebrafish with a high level of expression at the 1-4 cell stages. To study the function of TS in zebrafish embryo development, a short hairpin RNA (shRNA) expression vector, pSilencer 4.1-CMV/TS, was constructed which targeted the protein-coding region of zebrafish TS mRNA. Significant change in the development of tail and epiboly was found in zebrafish embryos microinjected pSilencer4.1-CMV/TS siRNA expression vector.

Heterologous expression and purification of recombinant allophycocyanin in marine Streptomyces sp isolate M097

Allophycocyanin is one of the most important marine active peptides. Previous studies suggested that recombinant allophycocyanin (rAPC) could remarkably inhibit the S-180 carcinoma in mice, indicating its potential pharmaceutical uses. Based on intergeneric conjugal transfer, heterologous expression of rAPC was first achieved in marine Streptomyces sp. isolate M097 through inserting the apc gene into the thiostrepton-induced vector pIJ8600. The transformation frequency for this system was approximately 10(-4) exconjugants/recipient. In the transformed Streptomyces sp. isolate M097, the yield of purified rAPC could amount to about 38 mg/l using a simple purification protocol, and HPLC analysis showed that the purity of the protein reached about 91.5%. In vitro activity tests also revealed that the purified rAPC had effective scavenging abilities on superoxide and hydroxyl radicals. This would widen the usefulness of the marine Streptomyces as a host to express the rAPC and to offer industrial strain for the production of rAPC.

Effects of infection of EGH-expressing Escherichia coli on haemocytes in Ciona intestinalis

The effects of infection of EGFP-expressing Escherichia coli on the haemocytes of the ascidian Ciona intestinalis were investigated. The results showed that THC of the infected individuals changed significantly. Hyaline amoebocytes phagocytosed E. coli in 5 min and excreted lysosome particles that attached to the surface of the bacteria. Granular amoebocytes released lots of particles for Immoral immunity while stem-cell-like haemocytes remained intact. With the increase in THC, the stem-cell-like haemocytes showed division and proliferation. A small portion of hyaline amoebocytes was at early apoptosis stage I h after infection and typical apoptosis bodies emerged in granular amoebocytes. A few of the infected haemocytes showed DNA damage using SCGE assay. Flow cytometry analysis revealed an obvious apoptosis peak in infected haemocytes. In conclusion, apoptosis was found to be an important immune response of ascidian haemocytes response to bacterial infection. To our best knowledge, this is the first report of the occurrence of apoptosis of haemocytes in ascidians. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

近海面气象参数的反演及应用研究

全球气候与人类活动密切相关，气候研究一直是现代科学家关注的重点问题之一。过去海面气象参数的研究主要借助于浮标和站点的观测，但是它们稀少的观测资料极大地限制了海面气象参数的研究。现在借助卫星观测大大地提高我们的认识能力，卫星可以对全球海洋进行连续观测，获取长期大范围的海洋气象资料，为全面深入地了解大洋甚至全球大气活动提供可能。 本文的工作就是利用卫星资料进行月平均和实时的近海面气象参数的反演及应用研究。利用近十八年SSM/I和AVHRR卫星资料与实测资料进行结合，建立神经网络（ANN）模型反演近海面月平均气温和湿度，与实测资料相比气温的均方根差为0.87 ℃，相关系数为 0.99，相对湿度的均方根差为3.73%，相关性为0.65。利用同步物理方法从TOVS资料反演中国海区上空1000mb到10mb之间的温湿廓线，再利用神经网络方法和基于Bowen比的方法从温湿廓线的结果反演出近海面处的实时气温和露温参数，取得了比较合理的结果，气温和露温结果的均方根差分别是1.85K和2.59K（与实测数据相比）。利用2005年1月的AMSR-E亮温资料对实时气象参数反演进行探讨，分析AMSR-E的各个探测通道与海表温度、近海面气温、湿度和风速等参数的相关性，把12个通道分为四种情况并在每种情况下分别进行试验，选择最合适的组合通道并进行气象参数的反演，结果与TAO资料进行比较，海表温度的均方根差是0.55℃，近海面气温的均方根差是0.74℃，海面湿度的均方根差是3.24%，海面风速的均方根差是1.11m/s。目前，与其它结果相比该结果的精度是最好的。 把以上反演得到的近海面气象参数结果应用于海气界面热通量的计算，以更好地研究海气相互作用。分别采用神经网络和Bulk公式两种方法计算月平均潜热和感热通量，结果与GSSTF2资料进行比较，Bulk方法反演的感热和潜热的均方根差分别为9.05±4.6 W/m2和23.7±4.0 W/m2，ANN模型得到的分别是7.54±3.0 W/m2和20.1±3.2 W/m2，，结果表明ANN模型得到的结果明显的好于Bulk公式。ANN模型反演的全球潜热和感热结果在空间分布上与GSSTF2的吻合很好，但在极大值区，ANN模型得到的结果偏小。把AMSR-E亮温资料反演得到的实时的海表温度、近海面气温、湿度和风速四个参数结合ANN模型，计算太平洋赤道地区的实时感热和潜热通量。 对反演得到的约18年近海面月平均气温进行年变化分析,得知近18年里气温呈现上升趋势。近海面气温在反映气候异常信息上有与海表温度相似的表达性，1989冷事件年，全球平均海面气温明显偏低（14.25℃），1998暖事件年，平均海面气温值最大（14.57℃ ）。用经验正交函数（EOF）和经验模态分解（EMD）分析近海面气温的距平变化，得到的前三个主要模态解释了84%的总体变化，EOF1解释了76.1%的变化，主要表达了太阳辐射引起的年周期气温变化；EOF2解释了4.6%的变化，主要解释ENSO对气温异常的作用；EOF3（3.3%）的空间模态呈现了很多有趣的现象，比如气温正异常主要表现在北半球的高纬度区，南极附近高低起伏的气温异常可以作为南极绕极流的一个证据等。

东海赤潮高发区水色遥感算法及赤潮遥感监测研究

本文针对东海赤潮高发区，主要进行水色遥感算法研究，以及赤潮遥感监测方法研究的探讨，希望对生物光学-遥感原理与新方法研究及赤潮的预测预报研究有所贡献。 在多年出海实测资料基础上，分析了水体组分固有光学量及浓度之间的关系，了解海区水体光谱特性，并发展了以水体组分浓度作为输入的水体离水遥感反射率光谱模型及参数优化形式。与实测光谱的比较结果，在光谱形状上较为接近，但在绝对量值上比实测值来得偏小，绝对值平均相对偏差较大，最大的551nm波段达到66.7%；对模型参数进行优化，优化后整体性能得到很大提升，均方根误差及绝对值平均相对偏差都得到大幅度降低，相关系数也得到较大提高，模拟的光谱形状与实测光谱进一步接近，在量值上也更为接近。 在光谱模拟的基础上提出了基于神经网络技术的二类水体大气修正算法，基于模拟数据的性能评估试验表明，网络模型反演的总体效果不错，对添加随机噪声不太敏感。将建立的神经网络大气修正算法应用于MODIS数据的处理，利用与卫星图像对应的现场实测光谱进行检验分析，结果表明，算法反演结果在光谱形状上与实测光谱相当接近，绝对量值上有所差别，总体偏大。 建立了叶绿素a浓度半分析反演算法，与实测数据比较，绝对值平均相对误差为38.34%。 建立了水体组分浓度神经网络反演算法，与半分析叶绿素a浓度反演算法相比，神经网络能得到更好的反演效果，绝对值平均相对误差为28.9%。 探讨了从MODIS卫星资料直接反演水体组分浓度的人工神经网络算法，基于模拟数据的性能评估试验表明，网络模型反演的总体效果不错，对添加随机噪声不太敏感。 发展了一种多波段MODIS资料赤潮监测方法，并在东海赤潮高发区进行了初步应用研究，结果表明采用此方法可有效地排除悬浮泥沙等水体干扰影响，确定可能发生赤潮的海区位置及提取海区大范围赤潮的信息。

坛紫菜丝状体细胞在光生物反应器中的营养增殖

紫菜作为一种经济海藻, 具有重要的经济价值和生物学价值，可作为海洋生物学研究中的模式生物。我们将生物反应器等生化工程技术用于紫菜无性丝状体细胞的培养和增殖，以实现迅速大量的为育种提供优质苗源，并为紫菜基础和应用研究提供材料、建立细胞培养技术。 适合大型藻类细胞增殖的光生物反应器需要五个基本因素：光照、温度控制、气体传输、营养物质传输、混合。针对大型藻类细胞生长特点，本文以坛紫菜(Porphyra haitanensis)丝状体为研究对象，采用本实验室自行设计的光生物反应器进行培养，得到的主要结果为： 1)摇瓶悬浮培养丝状体细胞，发现丝状体细胞营养增殖的生长特性是细胞分裂而不分开，由丝状藻丝生长为细胞团，容易聚团、贴壁。 2)本实验室开发了300 mL 鼓泡式光生物反应器。它具有结构简单、操作方便、适合藻细胞生长、制作成本廉价等特点。通过运行本系统验证了光生物反应器培养紫菜丝状体的可行性，并优化了过程参数，得到的结果为：初始密度为700 mg DCW/L，通气量为 1.2 L air min-1 L-1(vvm)，氮和磷浓度为：15 mM和0.6 mM, 培养时间为20天。在此培养条件下坛紫菜丝状体最大生物产量达到4000 mg DCW/L。 3)将鼓泡式光生物反应器的实验体系扩大到2500 mL，研究了不同光强及光周期对丝状体细胞生长的影响，结果发现光暗周期为14h light/10h dark、光强为80 μmol m-2s-1是最佳光照条件，最大生物量4350mg DCW/L。 4)对光生物反应器体系进行改进，设计了2500 mL气升式光生物反应器，进行了鼓泡式光生物反应器和气升式光生物反应器对坛紫菜丝状体细胞培养的比较研究，发现气升式光生物反应器更适合丝状体的生长，最大生物产量达到4850 mg DCW/L。

六种重组别藻蓝蛋白的抗氧化活性研究

藻胆蛋白（ phycobiliprotein ）是某些藻类中一类重要的捕光色素蛋白，由脱辅基蛋白（ apoprotein ）和四吡咯结构的藻胆素（ phycocyanobilin ）共价结合组成，具有抗氧化和抗肿瘤等多种生物活性。本实验室利用两种载体pMAL-p2X和pET28a对APC及其亚基分别进行重组表达，产生了MBP-APC、MBP-αAPC（Mα）、MBP-βAPC（Mβ）、6×His-αAPC（Hα）、6×His-βAPC（Hβ）和6×His-APC（HAPC）六种重组别藻蓝蛋白。本研究将表达产物和天然APC一起进行抗氧化活性研究，以期筛选出分子量更小、活性更强的组分。 本研究通过以下模型比较了六种重组别藻蓝蛋白和天然别藻蓝蛋白在体外不同抗氧化模型中的活性氧清除作用： 1. 通过比较对体外纯化学体系产生的羟自由基的清除作用，发现MBP系列的重组别藻蓝蛋白组分对体外化学体系产生的羟自由基均有一定的清除能力，清除活性大小依次为：MαAPC、rAPC、MβAPC、HβAPC、HαAPC、HAPC、Native APC。 2. 通过比较对体外纯化学体系产生的氢过氧自由基的清除作用，发现带有MBP标签的重组别藻蓝蛋白组分除MβAPC 有很低的抗氧化活性外，MαAPC和rAPC均无明显的抗氧化活性；而带有His标签的HβAPC和HAPC均高于天然APC，且随着浓度的提高，清除能力随之提高，呈现良好的量效关系。 3. 通过比较对体外纯化学体系产生的超氧阴离子自由基的清除作用，发现除MβAPC和MαAPC外，不同浓度的天然及重组别藻蓝蛋白组分对超氧阴离子自由基均有一定程度的清除作用，且随着浓度的增加清除率随之增加。其中，rAPC和HβAPC对超氧阴离子自由基的清除效果最强，IC50值分别达到36.98和42.27μg/mL。 4. 通过比较对O2-损伤红细胞膜的保护作用发现，天然及6种重组别藻蓝蛋白及其亚基对O2-损伤红细胞膜的作用均无显著的抑制作用。 5. 通过比较对•OH诱导的脂质过氧化的保护作用发现，，在100~500μg/mL的剂量范围内， rAPC和HβAPC有显著的抑制脂质过氧化的作用，IC50值分别为230.50和217.35μg/mL；HAPC 和Native APC有弱抑制作用；而MαAPC、MβAPC和HαAPC则无明显抑制脂质过氧化的作用。 我们又对其中各组分在不同体系中的抗氧化效果进行比较后发现：不同的抗氧化体系中，各种重组别藻蓝蛋白组分的抗氧化活性虽然各不相同，但带有His标签的重组别藻蓝蛋白组分明显高于带有MBP标签的重组别藻蓝蛋白组分；其中，HβAPC对体外羟自由基、氢过氧自由基、超氧阴离子自由基以及生物互作产生的•OH均有较强的清除作用，有望开发成为新一代抗氧化剂。 本研究筛选出了具有高效抗氧化活性的新型重组别藻蓝蛋白HβAPC（海普克），分子量小，且抗氧化活性比雷普克显著，这为进一步探讨雷普克和海普克的抗肿瘤作用机理提供了资料。

两种真核微藻类胡萝卜素代谢工程的初步研究

类胡萝卜素在生物体内具有重要的生理功能，其中虾青素的抗氧化活性、提高动物的免疫能力，预防癌症等生理功能更为显著。类胡萝卜素的代谢工程在大肠杆菌、酵母和高等植物中已取得了较大的进展。本文对真核微藻类胡萝卜素代谢工程进行了初步的探索。 1．克隆雨生红球藻β-胡萝卜素羟化酶基因crtR-B，基因枪法转入衣藻叶绿体，经强光处理转化子，HPLC分析表明细胞的叶黄素库（V＋A＋Z）量较野生型增加，表明是外源的β-胡萝卜素羟化酶将β-胡萝卜素生成玉米黄素。 2．克隆雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因bkt，基因枪法转入衣藻叶绿体，RT-PCR及RT-PCR Southern blot分析表明外源基因具有转录活性，但未检测到转化子中积累虾青素。 3．根据盐生杜氏藻大量积累β-胡萝卜素的特点，对其遗传转化体系进行了研究。发现20 µg/ml草丁膦Basta，能够完全抑制1.0×106个/ml细胞生长；通过GUS报告基因在细胞内的瞬时表达，确立了轰击压力450 psi、距离6 cm为基因枪法转化盐生杜氏藻的最佳条件；将bar基因转入细胞，得到稳定的转化子，初步建立了盐生杜氏藻稳定遗传转化体系。克隆了盐生杜氏藻八氢番茄红素合成酶基因psy的cDNA序列、基因组序列及psy基因上游459 bp片段。 本文首次开展了衣藻类胡萝卜素代谢工程研究，发现在强光处理下，衣藻crtR-B转化子外源的羟化酶作用使叶黄素库量增加，实现了对衣藻类胡萝卜素代谢途径的修饰。确立了bar基因为选择标记、Basta为筛选试剂的基因枪转化盐生杜氏藻的遗传转化体系，并克隆了其内源的psy基因5’上游序列，为通过基因工程手段在盐生杜氏藻细胞内积累虾青素奠定了基础。

热浸镀钢材在海水中的氢渗透行为及其对材料力学性能的影响

氢渗透和拉应力的联合作用对海洋环境中的热浸镀钢材的安全构成潜在威胁，本文以当前应用最广泛的三种商业化热浸镀钢材（Galvanized、Galfan和Galvalume）为研究对象，采用边界元方法计算了三种镀层缺陷周围的电场分布；设计了专用子母配套双电解池并测试了氢渗透电流密度曲线，比较了镀层氢渗透抑制性能及存在缺陷时的自渗氢倾向，并结合镀层成分及结构进行了分析；推导了氢渗透过程相关公式，建立了适合于评价镀层材料氢渗透行为的TANG-LI模型并计算了控制氢渗透相关过程的动力学参数；通过SSRT比较、分析了镀层材料充氢与无充氢条件下的应力－应变行为，并配合断口的显微分析，探讨了海水中带缺陷镀层的氢渗透行为对钢材基体力学性能的影响，结果表明： ⑴海水中三种镀层钢材缺陷处的阴极电位负于析氢电位，能够发生析氢反应而析出氢原子； ⑵ Galvanized镀层对氢渗透的抑制能力较弱，Galfan镀层完好时能明显抑制外部氢的进入，两者存在缺陷时都能产生额外的氢；Galvalume镀层具有很强的氢渗透抑制能力，而且当其存在缺陷时无自渗氢行为；镀层铝含量越高，完整镀层的氢渗透抑制能力越强，缺陷镀层自渗氢能力越弱。 ⑶Galvanized镀层在海水中的氢渗透能降低基体材料的强度并使得其断裂方式由韧性变为准解理，从而加大了材料发生氢脆的倾向；Galfan镀层的氢渗透行为能降低材料的强度但不会改变其韧性断裂方式；Galvalume缺陷镀层则对材料的强度和韧性断裂方式都不能造成影响。

大菱鲆（Scophthatmus maximus）两种转基因方法的研究

本实验对外源基因导入大菱鲆的两种方法进行了研究。采用经过改进的电脉冲方法以及哺乳动物细胞中常用的转染法将该外源DNA片段导入到大菱鲆（Scophthalmus maximus）受精卵内，并对两种方法进行比较。 本实验综合考虑仔鱼的孵化率和外源DNA的导入率，确定了电脉冲最佳导入条件：脉冲电压为300 V/cm，脉冲次数为5，外源DNA浓度为20 mg/L。首先分别对脉冲电压、脉冲次数和外源DNA的浓度进行单因子实验，得到各因素的适宜水平范围。然后利用最适导入条件，实现基因元件大规模转移。转染试剂使用参数的确定根据Qbiogene公司用户手册上的使用说明进行，转染法的最佳操作时间为受精后50 min。应用上述两种方法进行批量转基因鱼实验，采用PCR技术对一月龄的原代转基因大菱鲆仔鱼的染色体DNA进行分析，得到外源基因的导入率分别为20~28％和60~70％。本实验表明利用转染试剂jetPEI处理单细胞期的大菱鲆受精卵能得到较高的孵化率及较高的转基因效率。 本实验初步建立了利用电脉冲精子载体法和转染法实现基因转移的作方法，为经济鱼类转基因育种及其生产应用提供了理论及方法依据。

雨生红球藻中虾青素合成相关酶基因的转录调控序列分析

虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素，具有广泛的应用价值。雨生红球藻是一种单细胞绿藻，在逆境胁迫条件下能够大量合成并迅速积累虾青素，其积累量最高可达细胞干重的4%，从而成为目前首选的天然虾青素合成工具。但是，虾青素的大量积累总是发生在不适于生物量积累的环境胁迫条件下，虾青素积累与生物量积累之间成为一对矛盾，制约着虾青素大量生产。 异戊烯焦磷酸异构酶（IPI）、β-胡萝卜素酮化酶（BKT）和β-胡萝卜素氧化酶（CRTO）是虾青素合成过程中的相关酶。已有研究结果表明，这些酶基因的表达调控至少是部分发生在转录水平上的，这就为我们从转录水平上研究虾青素生物合成关键酶基因的调控机制提供了重要线索。 本文研究结果如下： 1. 利用基因组步移的方法克隆了两条异戊烯焦磷酸异构酶基因（ipi）的5’上游侧翼序列（1.8kb和2.5kb），预示着ipi的转录由不止一个启动子调控。 2. 利用上述方法克隆了两条β-胡萝卜素氧化酶基因（crtO）5'上游侧翼序列（1kb和2kb）。以lacZ为报告基因的瞬间表达实验结果表明，长度为320bp(-682/-363)的crtO 5'上游侧翼序列具有很强的启动转录活性，提示这段序列包含了启动子的结构。 3. 利用凝胶阻滞的方法研究了雨生红球藻中bkt强启动转录活性区域，即 309bp(-617/-309)启动子区域的转录因子结合位点，并发现在-396/-338的59bp区域内存在特异的核蛋白结合位点。通过序列分析，发现此59bp区域并不包含TATA或者CAAT-box，而是存在对光、缺氧、p-香豆酸及激素反应的G-box。 4. 根据国外已经获得的ipi和crtO全长cDNA序列，利用长距离PCR法从红球藻基因组中扩增到基因组序列。发现ipi和crtO均包含6个外显子和5个内含子，内含子的剪切位点基本符合GU-AG规律。并通过似然比检验（Likelihood ratio test）的方法发现两基因在进化过程中存在着正选择现象。 这些工作为下一步继续寻找与上述特定DNA调控区域特异结合的反式作用因子（蛋白质因子）奠定了基础。

两种海藻提取物的化学成分和生物活性的研究及其应用

本论文的研究工作由两部分组成，第一部分研究了海带（Laminaria japonica）水提取物中的活性物质，并研究了提取物对蔬菜促生长的影响及其作用机制。第二部分对三列凹顶藻(Laurencia tristicha)乙醇提取物的乙酸乙酯相进行了活性筛选和化学成分研究，并对其中分离得到的单体化合物进行了生物活性筛选。 第一部分主要以中国人工养殖的海带为原料，使用与海藻多糖生产相结合的提取技术并浓缩其中的有效成分。对浓缩提取物进行了蔬菜的农田效果实验，并对作物抗旱性能的增加、作物硝酸盐积累的减少、作物品质的改善、以及作物抵抗病毒病的能力等影响进行了作用机制方面的研究。海藻浓缩提取物进行的农田效果实验表明：作物抗旱型相对含水量RWC值在92%~94%之间；病毒病的防治效果最高可达到91%；作物的品质有明显的改善，最重要的是首次发现海藻提取物有降低蔬菜中硝酸盐的含量（硝酸盐的含量是与有机蔬菜区别的重要指标之一）的作用。该部分研究工作的创新性主要体现在：（1）首次在国内外提出和采用与海藻多糖生产相结合的提取技术。该技术的应用不但减少了提取成本，使工业化生产成为可能,更重要的是使我国的海藻工业生产可能实现高值化和开辟综合利用的新途径。（2）首次发现海藻中的小分子海藻多糖具有和细胞激动素、甜菜碱、植物生长素等活性物质同样的生物活性。 第二部分的研究是在查阅了大量的近20年来国内外有关红藻凹顶藻中化学成分研究的相关文献的基础上，对凹顶藻中的次生代谢产物进行了综述。该论文主要是通过对红藻三列凹顶藻的95%乙醇提取物的乙酸乙酯相进行化学成分分析和生物活性筛选以期能够发现具有药用前景的活性先导化合物。 为了寻找具有生物活性的化合物，我们对采自我国南海硇洲岛海域的红藻三列凹顶藻的95%乙醇提取物的乙酸乙酯相进行了活性筛选。采用MTT法对其在KB细胞株、Bel-7402细胞株、PC-3M细胞株、MCF-7细胞株、Ketr-3细胞株模型上进行了细胞毒活性测试；采用酶模型对其进行了Na+,K+-ATPase的抑制活性测试；采用MTT法对其在犬主动脉血管模型上进行了血管平滑肌细胞增殖抑制活性测试；结果表明，三列凹顶藻的95%乙醇提取物的乙酸乙酯相对Na+,K+-ATPase和犬血管平滑肌细胞增殖具有一定的抑制活性。 利用正相和反相色谱、Sephadex LH-20色谱以及反相HPLC等手段进行分离纯化，从我国南海海域的红藻三列凹顶藻中分离得到33种化学成分，通过波谱学方法（IR、MS、NMR）以及X-ray单晶衍射试验对其化学结构进行了确证，其中化合物L1~L8为新结构化合物，化合物L5为具有新骨架的全新结构化合物，化合物L9~L13为新天然产物，化合物L18和L22系首次从海洋生物中获得，所有化合物均为首次从该属海藻中得到。新化合物L1~L8均为倍半萜类化合物，命名分别为：(1R,3R)-(-)-3-(3-hydroxy-4-methylphenyl)- 1,3-dimethyl–2-methylidene cyclopentanol (L1), (1R,3R)-(-)-3-(4-methylphenyl)-1,3-dimethyl-2-methylidenecyclopentanol (L2)， (1R, 3R)-(-)-3-(2-hydroxy-4-methylphenyl)-1,3-dimethyl–2–methylidenecyclopentanol (L3)，(+)-(1S,2R)–2-(3–hydroxy–4–methylphenyl)-1,2-[3.1.0]bicy-clohexane (L4)，()-(1S,2R) -5-hydroxy–6–methyl-spiro-dihydrobenzofuran-2(3H),2-{1-methyl-[3.1.0]bicyclohexane} (L5), (+)-6-methyl-2-(p-tolyl)hept-4-en-2,6-diol (L6)，(3R,3aS,8bS)-(-)-2,3,3a,8b–tetrahydro–7-bromo – 3 a– hydroxymethyl - 3, 6, 8b - trimethyl-1H- cyclopenta[b] benzofuran (L7 )，(3R, 3aS, 8bS) - (-) - 2,3,3a,8b–tetrahydro–3 a–hydroxymethyl-3,6,8b -trimethyl -1H – cyclopenta [b] benzofuran (L8)。25个已知结构化合物确定为：(+)-(1R,2R)-4-bromo-1,5, 9–trimethyl–12– methylidene–8–oxa-tricyclo[7.2.1.02]dodeca-2,4,6-triene (L9)，(3S,3aR,8bS)-(-)-2,3,3a, 8b– tetra -hydro–7-bromo–3–hydroxy-3,3a,6,8b-tetramethyl-1H-cyclopenta[b]benzofu- ran (L10 )，(3R, 3aR, 8bS) - (-) - 2, 3, 3a, 8b – tetrahydro – 7 - bromo – 3 – hydroxy - 3,3a,6,8b - tetramethyl - 1H - cyclopenta [b] benzofuran (L11 )，(3S,3aR,8bS) - (-) - 2, 3, 3a, 8b – tetrahydro –3–hydroxy -3, 3a, 6, 8b - tetramethyl-1H-cyclopenta[b]benzofuran (L12 )， ( 3aR, 8bS) - (-) - 3a,8b –dihydro–7 - bromo – 3, 3a, 6, 8b - tetramethyl - 1H - cyclopenta[b]benzofuran (L13 )，aplysinol (L14 ) ，aplysin (L15)，laurebiphenyl (L16)，johnstonol (L17)，gossonorol (L18)，7,10-epoxy-ar- bisabol-11-ol (L19)，10-epi-7,10-epoxyarbisabol-11-ol (L20) 3β-hydroxy- 5α, 6α-epoxy- β- ionone (L21 )，3β-hydroxy-5β,6β-epoxy-β-ionone (L22 )，胆甾醇 (L23 )，胆甾-5-烯-3β,7α二醇胆甾-5-烯-3β,7α二醇 (L24)，β-谷甾醇 (L25)，叶绿醇 (L26 )，玉米黄素 (L27 )，对羟基苯甲醛 (L28 )，3-吲哚甲醛 (L29 )，1-O-十六烷酰基-3-O-β-D-吡喃半乳糖基-丙三醇(L30 )，1-O-十八烷酰基-3-O-β-D-吡喃半乳糖基-丙三醇 (L31 )，丙三醇-1-软脂酸单酯 (L32 )，正十六碳酸 (L33 )。 采用MTT法对其中23个单体化合物在Bel-7402细胞株、BGC-823细胞株、A549细胞株、A2780细胞株、HCT-8细胞株和HELL细胞株模型上进行了细胞毒活性测试；采用MTT法对其中13个单体化合物在犬主动脉血管模型上进行了血管平滑肌细胞增殖抑制活性测试；结果表明，部分单体化合物显示出一定的生物活性。