Strain H-2-419-4 of Haematococcus pluvialis induced by ethyl methanesulphonate and ultraviolet radiation

Two strains H-2-410 and H-2-419 were obtained from the chemically mutated survivors of wild Haematococcus pluvialis 2 by using ethyl methanesulphonate (EMS). Strains H2-410 and H2-419 showed a fast cell growth with 13% and 20% increase in biomass compared to wild type, respectively. Then H-2-419-4, a fast cell growth and high astaxanthin accumulation strain, was obtained by exposing the strain H2-419 to ultraviolet radiation (UV) further. The total biomass, the astaxanthin content per cell, astaxanthin production of H-2-4194 showed 68%, 28%, and 120% increase compared to wild H. pluvialis 2, respectively. HPLC (High Performance Liquid Chromatography) data showed also an obvious proportional variation of different carotenoid compositions in the extracts of H2-4194 and the wild type, although no peak of carotenoids appeared or disappeared. Therefore, the main compositions in strain H-2-419-4, like its wild one, were free of astaxanthin, monoester, and diester of astaxanthin. The asexual reproduction in survivors after exposed to UV was not synchronous, and different from the normal synchronous asexual reproduction as the mother cells were motile instead of non-motile. Interestingly, some survivors from UV irradiation produced many mini-spores (or gamete?), the spores moved away from the mother cell gradually 4 or 5 days later. This is quite similar to sexual reproduction described by Elliot in 1934. However, whether this was sexual reproduction remains questionable, as no mating process has been observed.

藏药达乌里秦艽中环烯醚萜苷的HPLC测定

采用HPLC法同时测定了藏药达乌里秦艽中龙胆苦苷(gentiopicroside)、獐牙菜苦苷(swertiamarin)、獐牙菜苷(sweroside)和落干酸(loganic acid)4种主要环烯醚萜苷类成分,利用在线质谱(MS)进行了定性分析,并与同属藏药麻花艽进行了比较。色谱柱为Eclipse XDB-C_8(4.6 mm×150 mmi.d.,5μm),流动相A:体积分数5%乙腈(含10 mmol甲酸)水溶液,流动相B:体积分数95%乙腈水溶液,以流动相A在0～15 min内由100%线性减至90%,15～20 min内保持90%不变线性梯度洗脱。流速1.0 mL/min,检测波长240 nm,柱温30℃。结果表明,4种成分均达到了基线分离,具有较好的线性关系和回收率。本法可作为达乌里秦艽药材有效成分的测定方法,为其有效成分的进一步开发利用提供依据。

RP-HPLC测定几种花类药材黄酮含量

目的：为充分利用花类药材，建立马蔺花、桃花、月季等15种花类药材中黄酮含量测定的RP—HPLC方法，并比较它们的含量。方法：花类药材用甲醇提取，反相高效液相色谱法分析药材中槲皮素、山柰酚、异鼠李素3种黄酮苷元。结果：采用KromasilC_18柱（4．6mm×250／mm，5μm），以甲醇-0．1％磷酸（50：50）为流动相，可使3种黄酮苷元达到基线分离，其中马蔺花含槲皮素1．536％，桃花含山柰酚0．572％，茶花含异鼠李素0．029％，皆为听测样品中最高。结论：本实验首次采用RP—HPLC法测定这15种花类药材的总黄酮含量，本方法操作简便，快速，准确，可作为黄酮的定量分析方法。

青海栽培和野生唐古特大黄蒽醌类成分的HPLC对比分析

采用HPLC法测定青海栽培唐古特大黄中的5种蒽醌含量,并和野生唐古特大黄药材进行了比较.结果表明,二、三、四年龄栽培唐古特大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种蒽醌总量分别为1.21%,2.01%,1.62%,其中三、四年龄栽培唐古特大黄已达到<药典>规定的药用标准;野生大黄的总蒽醌含量远高于栽培大黄为3.64%.

藏药提宗龙胆和线叶龙胆花中四种苦苷类成分的HPLC测定

应用HPLC分析方法同时测定藏药提宗龙胆和线叶龙胆两种植物花中落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷4种苦苷类成分的含量.采用Econosphere C_(18)色谱柱(250×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.5%乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测波长为245 nm.结果表明,除提宗龙胆中未检出獐牙菜苦苷外,其它成分均在两种植物中存在,但含量存在一定的差异.

高寒草甸植物抗氧化系统对长期增强UV-B辐射的响应

通过研究自然条件下模拟平流层臭氧破坏5%时近地表面增加的太阳UV-B辐射对高寒草甸4种典型植物（矮嵩草Kobresia humilis、垂穗披碱草Elymus nutans、麻花艽Gentiana straminea和鹅绒委陵菜Po-tentilla anserina）的抗氧化系统的影响表明,尽管各植物的抗氧化系统组分变化不同,但4种植物的膜脂过氧化程度没有加剧,长期增强UV-B辐射没有对膜系统造成损伤。在自然长期增强UV-B条件下,4种植物的膜脂过氧化产物——丙二醛（MDA）含量与对照相比无显著差异。垂穗披碱草、鹅绒委陵菜的谷胱甘肽（GSH）含量增加,麻花艽的超氧化物歧化酶（SOD）活性与鹅绒委陵菜的过氧化氢酶（CAT）活性上升,同时麻花艽的类胡萝卜素（Car）含量亦显著增加。可见这些植物已能很好地适应UV-B强辐射,其抗氧化能力除了与抗氧化系统各组分的协同作用有关外,也可能与种的适应性有关。

藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷的RP-HPLC分析

建立了藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷含量的高效液相色谱分析法.采用Waters XTerra RP18色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-1%冰醋酸溶液(28:72,V:V)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长330 nm,柱温30℃,在20 min内分离检测了该两种化合物.松果菊苷和麦角甾苷进样量分别在0.077～4.950μg(r=0.999 9)和0.085～5.450μg(r=0.999 9)内呈良好线性,平均加样回收率分别为98.35%和92.50%,RSD分别为2.35%和2.86%.所建立的方法简便、快捷、结果准确可靠,重现性好,可用于藏药短管兔耳草的质量控制,并为兔耳草属植物中苯丙素苷类化合物的分离分析提供一定的参考.

抱茎獐牙菜中当药黄素的HPLC测定研究

[目的]采用反相高效液相色谱法对抱茎獐牙菜中当药黄素的含量进行测定。[方法]色谱柱为Kromasil C18（250min×4．60mm，5μm），流动相为甲醇-浓度0．02％磷酸水溶液，梯度洗脱，流速为1ml／min，检测渡长为260nm。[结果]当药黄素在0．92-4．60μg范围内线性关系良好，r=0．99950平均加样回收率为98．73％，RSD为0.31％。[结论]抱茎獐牙菜中当药黄素在花的部位含量最高。该测定方法适应性广，可用于测定抱茎獐牙菜中的当药黄素。

HPLC测定藏药帕朱胶囊中胡椒碱

帕朱胶囊是藏医最常用的治疗胃寒性疾病药物之一。收载于《中华人民共和国卫生部药用标准•藏药》（第一册），主要由寒水石、河子、石榴子、胡椒和荜茇等药物组成；功能主治健胃散寒，除痰、破痞瘤，养荣强壮。现代临床试验表明，帕朱胶囊对中晚期肿瘤患者有改善细胞免疫及体液免疫功能的作用，同时还可以减轻患者疼痛症状。尽管帕朱胶囊长期以来被广泛使用，但是却没有很好的质量控制标准。我们采用超临界CO2萃取方法提取帕朱胶囊的可溶性成分，并用GC—MS法对提取部位进行化学成分分析，发现其主要成分为胡椒碱，含量占提取物的44，2％。因此，本实验用HPLC法对帕朱胶囊中所含胡椒碱进行测定，以期建立胡椒碱的科学检测方法，提高产品质量控制标准。

藏药独一味RP-HPLC色谱指纹图谱的建立及其质量评价

[目的]建立独一味药材HPLC指纹图谱，研究不同地区独一味药材的质量，为其质量控制提供有效的方法。[方法]采用RP-HPLC方法梯度洗脱，测定10批不同地区的独一味样品。[色谱备件]Kromasil C18柱（250mm×4．60mm，5μm），流动相为甲醇-0．4％的磷酸水溶液（55：45），梯度洗脱程序为0～70min，甲醇的体积分数由1％线性增加至15％；70～100min内，甲醇由15％线性增加至17％；100～130min内，甲醇由17％线性增加至20％；130～150min，甲醇由20％线性增加至100％；流速为1ml/min，检测波长为254n／n，柱温为30℃。[结果]确定了独一味药材中的7个共有峰。根据聚类分析结果，将独一味药材分为3类。[结论]该研究建立的方法重复性好，可用于不同地区独一味药材的质量评价，结合含量测定可用于独一味药材的质量的全面控制。

HPLC-APCI-MS法分析测定白刺籽油中游离脂肪酸

利用荧光衍生试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基对甲苯磺酸酯(BDETS)作为脂肪酸柱前衍生化试剂,采用梯度洗脱在Eclipse XDB-C_8色谱柱上对游离脂肪酸(FFA)(油酸、亚油酸、软脂酸和硬脂酸)衍生物进行分离.利用柱后在线的串联质谱以大气压化学电离源(APCI)正离子模式实现了各组分的质谱定性.荧光检测的激发和发射波长分别为λ_(ex)=333 nm,λ_(em)=390 nm.脂肪酸的线性回归系数大于0.9990,检出限为3.38～6.59 nmol/L.建立的方法具有良好的重现性.利用此方法对超临界CO_2提取的唐古特白刺籽油中几种游离脂肪酸进行了分析.结果表明白刺籽油中含有大量的游离不饱和脂肪酸.

抱茎獐牙菜提取物的HPLC指纹图谱研究

目的：用高效液相色谱法建立抱茎獐牙菜乙醇提取物的指纹图谱分析方法。方法：采用Phenomenex Kromasil C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；甲醇-0．1％磷酸为流动相，线性梯度洗脱，检测波长为260nm。结果：共有20个共有峰。结论：此方法准确、重复性好，为有效地控制抱茎獐牙菜药材提取物的质量提供了科学的依据。

HPLC法测定柴胡地上部分的黄酮苷元

运用HPLC法测定青海不同产地4种柴胡地上部分的黄酮，为柴胡药材的综合有效利用提供依据。采用C18色谱柱以V（甲醇）：V（0．1％H1P04）：1：1为流动相，流速1mL／min，检测波长360nm。青海产柴胡地上部分均含丰富的黄酮，其中以秦岭柴胡黄酮质量分数最高，槲皮素质量分数达到2．27％，总黄酮质量分数大于6．50％。本方法简便，对黄酮的定量准确，改变以往柴胡只使用地下部分而弃去地上部分的局面，提高柴胡药材的有效利用率。

RP-HPLC测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯含量

目的 建立了反相高效液相色谱法同时测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的方法.方法 采用Phenomenex Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);流动相为乙腈-0.04%磷酸溶液(50:50);检测波长:194 nm;流速:1.0 mL•min~(-1).结果 异构体土木香内酯和异土木香内酯达到基线分离,含量测定的线性良好,线性范围和相关系数分别为0.07～4.80μg•L~(-1) (r=0.999 8),0.07～4.85μg•L~(-1) (r=0.999 8);回收率分别为97.5%和102.1%;方法精密度良好,RSD分别为1.56%和1.87%(n=5);方法重现性良好,RSD分别为1.67%和0.92%(n=5).结论 所建立的方法简便、快捷、准确,重现性好,可用于藏木香药材及其制剂的质量控制.

HPLC法同时测定2种獐牙菜中4种苷类成分

建立并检测印度獐牙菜和川西獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、异荭草苷4种苷类成分含量的反相高效液相色谱分析方法.结果表明,该方法简单,准确,快速,可作为獐牙菜类药材的质量控制依据.