Purificação e caracterização de uma ß-N-acetillhexosaminadase extraída do mamífero marinho Sotalia fluviatilis


Autoria(s): Gomes Júnior, José Edilson
Contribuinte(s)

Abreu, Luiz Roberto Diz de

CPF:01206274425

http://lattes.cnpq.br/1390071993215167

CPF:27785858500

http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723470U6

Scortecci, Kátia Castanho

CPF:13451112825

http://lattes.cnpq.br/4808910380593455

Matta, Luciana Duarte Martins da

CPF:91032350415

http://lattes.cnpq.br/2752887804614967

Data(s)

17/12/2014

13/02/2007

17/12/2014

06/12/2006

Resumo

This report shows 2232 times purification of a βNAcetylhexosaminidase from hepatic extracts from the sea mammal Sotalia fluviatilis homogenate with final recovery of 8,4%. Sequenced steps were utilized for enzyme purification: ammonium sulfate fractionation, Biogel A 1.5 m, chitin, DEAESepharose and hydroxyapatite chromatographies. The protein molecular mass was estimated in 10 kDa using SDSPAGE and confirmed by MALDITOF. It was found to have an optimal pH of 5.0 and a temperature of 60°C. Using pnitrophenylNAcetylβDglycosaminide apparent Km and Vmax values were of 2.72 mM and 0.572 nmol/mg/min, respectively. The enzyme was inhibited by mercury chloride (HgCl2) and sodium dodecil sulfate (SDS)

Este trabalho mostra a purificação de 2232 vezes de uma βNAcetilhexosaminidase obtida a partir dos extratos hepáticos do mamífero marinho Sotalia fluviatilis com recuperação final de 8,4%. Passos seqüenciais foram utilizados para a purificação enzimática: fracionamento com sulfato de amônio e as cromatografias de Biogel A 1.5 m, Quitina, DEAESepharose e Hidroxiapatita. A massa molecular protéica foi estimada em 10 kDa usando SDSPAGE e confirmada por MALDITOF. Foi encontrado como pH e temperatura ótimos, 5,0 e 60°C, respectivamente. Os valores de Km e Vmáx aparentes foram 2,72 mM e 0,572 nmol/mg/min, sendo utilizado o pnitrofenilNAcetilβDglicosaminídeo como substrato. A enzima foi inibida pelo cloreto de mercúrio (HgCl2) e dodecil sulfato de sódio (SDS)

Formato

application/pdf

Identificador

GOMES JÚNIOR, José Edilson. Purificação e caracterização de uma ß-N-acetillhexosaminadase extraída do mamífero marinho Sotalia fluviatilis. 2006. 80 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica; Biologia Molecular) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2006.

http://repositorio.ufrn.br:8080/jspui/handle/123456789/12612

Idioma(s)

por

Publicador

Universidade Federal do Rio Grande do Norte

BR

UFRN

Programa de Pós-Graduação em Bioquímica

Bioquímica; Biologia Molecular

Direitos

Acesso Aberto

Palavras-Chave #&#946 #NAcetilhexosaminidase #&#946 #NAcetilglucosaminidase #&#946 #NAcetilgalactosaminidase #Sotalia fluviatilis #Glicosaminoglicanos #Extratos hepáticos #Mamíferos marinhos #&#946 #NAcetylhexosaminidase #&#946 #NAcetylgalactosaminidase #&#946 #NAcetylglycosaminidase #Sotalia fluviatilis #Glycosaminoglycans #Hepatics extracts #Sea mammal #CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA
Tipo

masterThesis