A importância do uso de métodos complementares para a avaliação da toxicidade de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos

Hidrocarbonetos Aromáticos Policíclicos (HAPs) e seus derivados Halogenados (HHAPs) são conhecidos como um conjunto de contaminantes ambientais, classificados como potencialmente tóxicos, mutagénicos e carcinogénicos, sendo um assunto de extrema importância e preocupação para a saúde pública. Diversos estudos têm reportado o potencial efeito tóxico destes compostos após longos períodos de exposição, pelo uso de métodos colorimétricos como o ensaio de brometo de 3-[4,5- dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio (MTT) e vermelho neutro. Contudo, apesar de estes métodos clássicos de avaliação da citotoxicidade in vitro permitirem, de forma rápida, identificar as propriedades nocivas dos compostos, não permitem compreender os mecanismos moleculares subjacentes responsáveis pela sua toxicidade. Deste modo, no presente estudo, para avaliar os efeitos à exposição aos compostos Pireno (Pir) e seu derivado resultante da desinfeção de águas por bromação, 1-BromoPireno (1-BrPir), foram utilizados outros métodos complementares como avaliação do stress oxidativo e vários fenómenos associados à morte celular programada. Os resultados obtidos comprovam não só a existência de efeitos citotóxicos dos poluentes quando acumulados, como também possíveis efeitos genotóxicos. Assim, pelos métodos complementares, foi possível a identificação de alvos moleculares passiveis de ação farmacológica, o que pode constituir o primeiro passo para o desenho de estratégias terapêuticas que visem prevenir ou tratar os danos provocados por estes poluentes no Homem.

Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs) and their halogenated derivatives (HPAHs) are known as a set of environmental contaminants classified as potentially toxic, mutagenic and carcinogenic, being a matter of utmost importance and concern to public health. Several studies have reported the potential toxic effects of these compounds after long periods of exposure by the use of colorimetric methods such as 3-(4,5-dimethylthiazol- 2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and neutral red. Nonetheless, despite these classic in vitro cytotoxicity assays allow, in a faster way, the identification of the harmful properties of the compounds, they fail in elucidating the underlying molecular mechanisms responsible for their toxicity. Taking into account these mentioned aspects, in the present work, other complementary methods were used in order to evaluate the effects of the exposure to Pyrene (Pyr) and to a brominated-pyrene derivative (resulted from water disinfection), 1-BromoPyrene (1-BrPyr). Effectively, by the evaluation of the oxidative stress and programmed cell death induced by PAHs it was not only possible to verify the cytotoxic effects of PAHs when accumulated but also their potential genotoxic effects. In conclusion, through the use of other tests than the classic cytotoxicity assays, it was possible to identify potential druggable molecular targets which can be the first step towards the development of new therapeutic strategies either to prevent or treat the damage caused by these compounds in Humans.

Este trabalho foi desenvolvido no âmbito do projeto RECI/QEQMED/ 0330/2012, financiado pela Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT).