Charakterisierung synapsenassoziierter Proteine des Haushuhns (Gallus gallus domesticus)

Charakterisierung synapsenassoziierter Proteine des Haushuhns(Gallus gallus domesticus) Die Familie der synapsenassoziierten Proteine (SAP) umfaßt bei Säugern vier Proteine: SAP90 (=PSD-95), SAP97, SAP102 (=PSD-93) und Chapsyn110. Die Proteine enthalten charakteristischerweise drei PDZ-Domänen, eine SH3-Domäne und eine GK-Domäne über die sie mit anderen Proteinen interagieren können. SAP können so Verbindungen zwischen Neurotransmitterrezeptoren und Signaltransduktionsmolekülen sowie dem Zytoskelett herstellen.In dieser Arbeit wurden die synapsenassoziierten Proteine des Huhns charakterisiert. Die cDNAs von SAP90, SAP97 und Chapsyn110 wurden sequenziert. Die cDNA von SAP102 wurde teilweise sequenziert. Die Analyse genomischer DNA durch PCR ergab, daß die SAP90- und SAP97-mRNA von einem Gen transkribiert werden. Die mRNA-Verteilung von SAP90, SAP97 und Chapsyn110 im Gehirn einen Tag alter Küken wurde mit in situ Hybridisierung untersucht. Die Verteilung der SAP90-mRNA und von NMDA-Rezeptoren im Gehirn des Huhns ist sehr ähnlich. Weiterhin wurde bei Küken untersucht, inwieweit SAP bei der Prägung eine Rolle spielen. Der relative mRNA-Gehalt von SAP90, SAP97 und Chapsyn110 wurde 30 Minuten, 5 Stunden und 10 Stunden nach einer akustische Prägung der Küken gemessen. Fünf Stunden nach akustischer Prägung war der Gehalt der SAP90-mRNA, im anterioren lateralen Hyperstriatum ventrale um 13% erhöht. Der mRNA-Gehalt in anderen Regionen und der anderen SAP-Gene war unverändert.

Characterization of synapse-associated proteins in the chick (Gallus gallus domesticus) The family of synapse-associated proteins (SAP) in mammals comprises four proteins: SAP90 (=PSD-95), SAP97, SAP102 (=PSD-93) and Chapsyn110. These proteins are characterized by three PDZ-domains, one SH3-domain and one GK-domain which mediate interactions with other proteins. These molecular interactions allow SAP to link neurotransmitterreceptors to various proteins like signaltransduction molecules as well as to the cytoskeleton. In this thesis the synpapse associated proteins of the chick were characterized. The cDNA-sequences of SAP90, SAP97 and Chapsyn110 was determined. The cDNA of SAP102 was partially sequenced. The analysis of genomic DNA by PCR showed that SAP90- and SAP97-mRNA are transcribed from a single gene. The distribution of SAP90-, SAP97- and Chapsyn110-mRNA in one-day-old fledglings was studied by means of in situ hybridization. The localization of SAP90-mRNA in the chick brain is congruent to the distribution described for NMDA-receptors. Additionally, the possible role of SAP in imprinting was studied. The relative levels of SAP90-, SAP97-, and Chapsyn110-mRNA were assessed 30 min, 5 hours and 10 hours after acoustic imprinting of fledglings. Five hours after acoustic imprinting the level of SAP90-mRNA in the antero-lateral hyperstriatum ventrale rose by 13%, whereas the mRNA-levels in other regions of the brain and of other SAP-genes remained unchanged.