Separação imunomagnética associada a bacteriófago para diagnóstico de Salmonella enterica em carne de frango

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Processo FAPESP: 2013/04365-3

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

We used the Immunomagnectic Separarion Assay associated with Bacteriophage to detect the following serovars: Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg and Salmonella Typhimurium, in poultry drumstick samples artificially contaminated. We compared the efficiency of this technique to the usual diagnostic tests for Salmonella in food samples: the standard bacteriological analysis, which includes the step of pre-enrichment and selective enrichment, biochemical and serological screening tests, and polymerase chain reaction (PCR). To evaluate the tests capability of Salmonella detection poultry meat samples were submitted to artificial contamination with 5, 10 and 100 CFU/25mL of bacteria, for each of the serovars listed above, totaling 270 analyzes divided into 90 tests for each of the three serovars, and so compare the results obtained with the bacteriological analysis, PCR and Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay. We found that the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was comparable to bacteriological method recommended by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) and the PCR technique, because 99.6% of the samples were positive to accomplish Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay and only a sample of Salmonella Enteritidis was negative in this test, in the concentration of 5 CFU/25mL. The bacteriological method check 95.5% positivity, with nine samples negative for S. Heidelberg, two negative for S. Enteritidis and two in the test with S. Typhimurium. In PCR 98.5% positives samples were obtained, with one S. Enteritidis negative sample in the concentration of 5 CFU/25ml and three negative samples for S. Typhimurium. The time for performing each test was measured and the Immunomagnetic Separation Bacteriophage assay was the most rapid test for Salmonella diagnosis, since 20 hours, the conventional bacteriological took 88h and PCR 44h approximately. In this study we confirm the effectiveness of the ...

Utilizou-se o método de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago para detectar os seguintes sorovares: Salmonella Heidelberg, Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium, em amostras de sobrecoxas de frango contaminadas artificialmente. Para certificarmo-nos da eficiência do método, comparamos esta técnica com os testes de diagnóstico usuais para este patógeno: a análise bacteriológica padrão, que inclui a etapa de pré-enriquecimento, enriquecimento seletivo, realização de testes bioquímicos de triagem e sorologia, e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Na avaliação da capacidade dos testes na detecção de Salmonella em carne de frango, submetemos amostras de sobrecoxas de frango à contaminação artificial com 5, 10 e 100 UFC/25mL de bactéria, para cada um dos sorovares listados anteriormente, totalizando 270 análises, divididas em 90 testes para cada um dos três sorovares, e assim comparamos os resultados obtidos com a análise bacteriológica, PCR e o teste de Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago. Ao aferirmos os resultados constatamos que a Separação Imunomagnética associada a Bacteriófago é equiparável ao método bacteriológico recomendado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e com a técnica de PCR, pois 99,6% das amostras foram positivas ao realizarmos o teste de Separação Imunomagnética associado a Bacteriófago e apenas uma amostra de Salmonella Enteritidis foi negativa neste ensaio, na concentração de 5 UFC/25mL. Já no método bacteriológico verificamos 95,5% de positividade, com nove amostras negativas para S. Heidelberg, duas negativas para S. Enteritidis e duas no ensaio com S. Typhimurium. Na técnica de PCR obtivemos 98,5% de positivos, com uma amostra negativa para S. Enteritidis na concentração de 5 UFC/25mL e três negativas para S. Typhimurium. O tempo despendido para a realização de cada teste foi aferido e constatamos...