Fecal specimens preparation methods for PCR diagnosis of human taeniosis


Autoria(s): Nunes, Caris Maroni; Lima, Luiz Gustavo Ferraz; Manoel, Camila Santos; Pereira, Rodrigo Norberto; Nakano, Mauro Massaharu; Garcia, José Fernando
Contribuinte(s)

Universidade Estadual Paulista (UNESP)

Data(s)

30/09/2013

20/05/2014

30/09/2013

20/05/2014

01/02/2006

Resumo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Com o intuito de utilizar a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) como método de diagnóstico diferencial da teníase humana, avaliaram-se alguns protocolos de preparação e extração de DNA de ovos de Taenia saginata presentes em amostras de fezes de paciente naturalmente infectado. O DNA obtido após extração com fenol/clorofórmio/álcool isoamílico ou DNAzol® teve que ser purificado antes da PCR para que fosse possível a amplificação dos fragmentos de 170 pb e 600 pb desejados. Com o kit QIAmp DNA stool mini kit® tal purificação não foi necessária. Os melhores resultados foram observados após o tratamento prévio das amostras com pérolas de vidro, tanto quando da utilização de fenol/clorofórmio/álcool isoamílico, quando de DNAzol® ou QIAmp DNA stool mini kit®.

Sample preparation and DNA extraction protocols for DNA amplification by PCR, which can be applied in human fecal samples for taeniasis diagnosis, are described. DNA extracted from fecal specimens with phenol/chloroform/isoamilic alcohol and DNAzol® reagent had to be first purified to generate fragments of 170 pb and 600 pb by HDP2-PCR. This purification step was not necessary with the use of QIAmp DNA stool mini kit®. Best DNA extraction results were achieved after eggs disruption with glass beads, either with phenol/chloroform/isoamilic alcohol, DNAzol® reagent or QIAmp DNA stool mini kit®.

Formato

45-47

Identificador

http://dx.doi.org/10.1590/S0036-46652006000100010

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical, v. 48, n. 1, p. 45-47, 2006.

0036-4665

http://hdl.handle.net/11449/14754

10.1590/S0036-46652006000100010

S0036-46652006000100010

S0036-46652006000100010.pdf

Idioma(s)

eng

Publicador

Instituto de Medicina Tropical

Relação

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

Direitos

openAccess

Palavras-Chave #Taenia saginata #DNA extraction #Polymerase chain reaction (PCR) #Fecal specimens
Tipo

info:eu-repo/semantics/article