Purificação e caracterização estrutural de homogalactanas sulfatadas anticoagulantes da alga verde Codium isthmocladum

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico

Os polissacarídeos sulfatados compõem um grupo complexo de macromoléculas com uma gama de importantes atividades biológicas, incluindo atividade antiviral, anticoagulante, antiproliferativa, antitumoral e antioxidante. Esses polímeros aniônicos são amplamente distribuídos em tecidos de vertebrados e algas. As algas marinhas são as fontes, não-mamíferas, mais abundantes de polissacarídeos sulfatados na natureza. Os mais conhecidos extraídos de algas vermelhas são homogalactanas, chamadas de carragenanas, e de algas marrons são homo ou heteropolissacarídeos, chamadas de fucanas e fucoidanas, respectivamente, e os polissacarídeos sulfatados de algas verdes são compostas por polissacarídeos contendo galactose, glicose, arabinose e/ou ácido glucurônico. Há poucos estudos descrevendo a presença de polissacarídeos sulfatados em algas verdes. No presente estudo, o extrato total de polissacarídeos da alga verde Codium isthmocladum foi obtido através de digestão proteolítica, e fracionado por precipitação sequencial com acetona resultando em cinco frações (F0,3V; F0,5V; F0,7V; F0,9V e F1,2V). O teste de atividade anticoagulante de aPTT mostrou que F0,5V desempenhou alta atividade anticoagulante. Esta foi, posteriormente, fracionada por cromatografia de troca-iônica em sete polissacarídeos: F0,3M; F0,5M; F0,7M; F1,0M; F1,5M; F2,0M e F3,0M. Os polissacarídeos eluídos com F2,0M e F3,0M migraram como um único componente eletroforético. Não foi detectada contaminação protéica. Análises químicas mostraram que F2,0M e F3,0M são compostas por galactose. Esses polissacarídeos foram submetidos ao teste de aPTT, e mostraram alta atividade anticoagulante com atividade maior que Clexane®. Ambas apresentaram um efeito dose-dependente. Análises estruturais de F2,0M e F3,0M mostraram que elas são homopolímeros ramificados constituídos de - D-Galactopiranoses unidas por ligações b-1,6 (predominante) e b-1,3. Alguns resíduos de galactose apresentam sulfatação em C4 ou em C6, e algumas galactoses em posição não redutora apresentam piruvatação na forma de 3,4- O-(1’-carboxi)etilideno, cetal cíclico com cinco membro