Mini-STRs em genética forense

A análise do ADN baseada nos STRs (Short Tandem Repeats) tem provado ser uma ferramenta extremamente útil em estudos forenses. A aplicação dos multiplex de STRs resulta em perfis genéticos completos, para a maior parte das amostras, desde que contenham uma quantidade apreciável de ADN. Contudo, em amostras com ADN degradado, a análise tornase mais complicada, uma vez que os STRs com maior peso molecular (acima dos 250 pb), podem não ser amplificados nestas condições. Como a metodologia de Mini-STRs não estava, ainda, implementada nos Laboratórios Forenses portugueses, o objectivo principal deste estudo consistiu na aplicação de um multiplex, designado por Mini-SGM, que contém os marcadores TH01, FGA, D18S51, D16S359, D2S1338 e a Amelogenina, para implementação na prática forense, tendo os resultados sido comparados com a metodologia de rotina. O trabalho experimental teve início com um estudo populacional, que compreendeu uma amostra de 110 indivíduos de origem portuguesa, não relacionados e uma amostra de 52 indivíduos, não relacionados, oriundos de Cabo Verde, encontrando-se, ambas as populações, em Equilíbrio de Hardy-Weinberg, excepto para o locus D18S51, na população portuguesa e o locus D2S1338 na população de origem africana. Em relação aos parâmetros estatísticos forenses, este estudo demonstrou que o poder de discriminação varia entre 0,903 e 0,959, para a população portuguesa, e entre 0,908 e 0,958, para a população de Cabo Verde. Após o estudo populacional, foram analisados 39 casos forenses, devidamente anonimizados, da casuística do Serviço de Genética e Biologia Forense da Delegação de Lisboa do INML, com diferentes tipos de vestígios biológicos, como sangue, ossos, pulmão, coração, tecidos embrionários, tecidos inclusos em parafina, fígado, rim e dentes, de modo a ilustrar a utilidade desta nova metodologia nos casos forenses. No estudo de amostras degradadas, o uso da metodologia de rotina pode,

Multiplex PCR systems based on short tandem repeats (STRs) have proved to be a highly useful tool in forensic casework. The application of STR multiplexes results in full profiles in the vast majority of highly-quality DNA samples. However, problematic samples containing only degraded DNA cannot be fully analysed, as the higher molecular weight markers (above 250 bp) fail to bring unambiguous results or drop out completely. The main objective of the study in this thesis is to perform, in forensic routine, a five Mini-SGM multiplex, which encompasses TH01, FGA, D18S51, D16S539, D2S1338 and Amelogenin, a new methodology in Portuguese Forensic Laboratories, which results werecompared to the common methodology applied. This study started with the investigation of two population samples: one with 110 unrelated subjects from Portugal and the other one with 52 unrelated subjects from Cabo Verde. Both populations showed no significant deviations from Hardy-Weinberg equilibrium, except for locus D18S51, in the Portuguese population and locus D2S1338 in Cabo Verde population. In relation to these five Mini-STRs forensic parameters, the power of discrimination stands between 0,903 and 0,959, in the Portuguese Population and between 0,908 and 0,958, in the Cabo Verde population. Thirty nine forensic cases performed, which anonymity was maintained in accordance to standard judicial practices, with different biological tissues, such as blood, bones, lung, heart, foetus tissues, liver, kidney, teeth and tissues included in paraffin, were selected to illustrate the usefulness of this new technique in forensic casework. The use of routine methodology can sometimes give only a partial genetic profile or no profile at all. However, using the Mini-STRs technique, a full profile was obtained for 77%, a partial profile was obtained in 13% in degraded samples, and 10% of the forensic caseworks gave no genetic profile at all. This fact probably is related to the presence of PCR inhibito