Visualització de la interaccio entre la proteïnaG12 i la catenina p120

Els processos de senyalització a través de receptors acoplats a proteïnes G (GPCRs) estan implicats en una gran varietat de processos fisiològics i patològics. Els objectius de la meva recerca es centren en l’estudi de la funció de les proteïnes heterotrimèriques de la família G12, en particular, en el paper que aquestes proteïnes poden tenir en la inducció de la migració cel•lular. Des del seu descobriment, s’han descrit diversos efectors que s’uneixen i es regulen per aquestes proteïnes. Les proteïnes de la família de RhoGEF semblen ser els efectors més directes i que juguen un paper més important en els processos de senyalització de les proteïnes G12. Tanmateix, resultats recents semblen indicar que altres vies independent de l’activació de Rho són també necessàries perquè els efectes fisiològics de les vies de les proteïnes G12 tinguin lloc. En aquest camp, els resultats que he obtingut, juntament amb resultats previs del grup, han descrit una nova via d’activació independent de Rho. Hem trobat que la proteïna G12 s’uneix a una catenina: la catenina p120. La seva unió sembla tenir lloc a través l’extrem N-terminal de la catenina i condueix a la reducció de la fosforilació en algun dels seus residus de tirosina, ja sigui per la quinasa Src o per l’activació a través d’EGF. Per tant, aquests resultats suggereixen que una altra via d’acció de la proteïna G12 seria mitjançant la regulació de la catenina p120 i, com a conseqüència, alguns processos d’adhesió cel•lular es podrien veure afectats. A fi d’entendre millor la regulació i la interacció de la catenina p120 hem iniciat l’estudi de la seva distribució cel•lular en l’espai i temps mitjançant tècniques de microscopia. Així, vam intentar construir una sonda de G12 fluorescent amb GFP. Després de diversos intents i experiments amb proteïnes no funcionals hem aconseguit, amb la col•laboració de T. Meigs, una construcció funcional que activa Rho. Això ens permetrà acabar els experiments de seguiment in vivo.

Signaling via G protein-coupled receptors has been implicated in a myriad of physiological and pathological processes. The objectives of our research are directed towards the understanding of the mechanisms involved in the processes regulating cell migration and invasion via G proteins and GPCRs. One subfamily of G proteins, the G12 subfamily, has recently emerged as pivotal in many aspects of cell migration and cancer metastasis. Various downstream-effectors for G12 proteins have been identified. Among them RhoGTPases, in, particular, appears to be one of the main downstream effectors important for those processes. However other downstream effectors are likely to be important. Our group has described a new downstream effector for G 12 proteins, the catenin p120, which may be important for some of the effects downstream of G 12. The interaction with G 12 regulates the phosphorylation status of the catenin in a Rho-independent mechanisms. As a model of cell migration, we are also dissecting the signaling pathway downstream the chemokine receptor CCR2, that also signals to G12, and induces the migration of monocytes. The goal of our project is to achieve a complete understanding of the signaling by G12 and chemokines, which will require the elucidation of specific effector pathways.