Utilització de plantes d'Arabidopsis thaliana mutants de CK2 per a l'establiment de línies cel·lulars i per a l'estudi de la implicació de la CK2 en l'estructuració de la cromatina

La proteïna CK2 és una Ser/Thr fosfotransferasa evolutivament conservada. Està formada per dues subunitats diferents, α (catalítica) i β (reguladora), que s’associen en un complex heterotetramèric (α2β2). L’activitat d’aquest enzim està regulada per varis mecanismes que la modulen diferencialment en funció del substrat, entre ells, la localització subcel·lular de les diferents subunitats. A partir de plantes transgèniques que contenen les subunitats de CK2 fusionades a una proteïna fluorescent (GFP o YFP) hem establert línies cel·lulars que permetran analitzar, en treballs futurs, els canvis de localització subcel·lular de les subunitats de CK2 provocats per diferents estímuls. La CK2 intervé en un gran nombre de processos cel·lulars, entre d’altres, metabolisme, transport a nucli, control del cicle cel·lular i reparació del DNA. Amb la finalitat d’estudiar el paper de la CK2 en el desenvolupament de les plantes, membres del grup van generar un mutant dominant negatiu per transformació estable de plantes d’Arabidopsis thaliana. Estudis previs mostraven que la pèrdua d’activitat CK2 en aquestes plantes provocava una alteració de l’activitat mitòtica i un bloqueig del cicle cel·lular. Els resultats obtinguts en aquest treball indiquen que aquests fenotips podrien ser conseqüència de la implicació de la CK2 en processos d’estructuració de la cromatina.

Protein kinase CK2 is an evolutionay conserved Ser/Thr phosphotransferase composed of two distinct subunits, α(catalytic) and β (regulatory), that combine to form a tetrameric complex (α2β2). CK2 activity is modulated by several mechanisms that diferentially regulate it depending on the substrate. One of this mechanisms is the subcellular localization of the subunits. Using transgenic Arabidopsis plants that contain the CK2 subunits fused to a fluorescent protein (GFP or YFP) we have stablished cell cultures that will be used in futur research to analise the changes in the subcellular position of the diferent subunits after exposure to different treatments. CK2 is involved in a wide range of cellular processes like, for example, metabolism, nuclear transport, cell cycle control and DNA repair. In order to study the function of CK2 on plant development, members of the group previosly generated a dominant-negative mutant by stable transformation of Arabidopsis thaliana plants. Loss of CK2 activity provokes an alteration of mitotic activity and cell cycle progression. Our results show that this phenotype can be consequence of the implication of CK2 in chromatin structure.