Identificação de genoespécies do complexo Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l.) circulantes na fauna ixodideológica em portugal

Dissertação para obtenção do grau de Mestre em Microbiologia Médica

Os ixodídeos (carraças) são responsáveis pela transmissão de agentes patogénicos causadores de diversas doenças emergentes de grande importância em Saúde Pública, afetando humanos e/ou animais, como a Borreliose de Lyme (BL). Em Portugal, existem condições favoráveis para a manutenção e distribuição quer das carraças, quer dos agentes patogénicos. São exemplo disso, as espiroquetas do complexo Borrelia burgdorferi sensu lato (B.b.s.l.), agentes da BL, cujo principal vetor na Europa são as carraças da espécie Ixodes ricinus. Apesar da doença ser subdiagnosticada e subnotificada, vários estudos têm confirmado a circulação destas espiroquetas nas populações de carraças em diversas regiões. O principal objetivo deste estudo consistiu na recolha e identificação de ixodídeos, de animais e da vegetação, em nove distritos de Portugal continental e determinação das respetivas taxas de infeção por B.b.s.l., contribuindo para o conhecimento da fauna ixodideológica e da epidemiologia da BL. As carraças capturadas foram identificadas taxonomicamente e o DNA borreliano foi detetado por duas abordagens de nested-PCR, tendo como alvos o espaço intergénico 5S-23S rRNA e o gene flaB. Para a identificação das espécies de B.b.s.l. recorreu-se às técnicas de RFLP e sequenciação. Neste estudo capturaram-se 4487 carraças pertencentes aos géneros Ixodes, Rhipicephalus, Haemaphysalis, Hyalomma e Dermacentor. Em 704 ixodídeos analisados, a taxa de infeção foi de 4,8%, maioritariamente em ninfas da espécie I. ricinus, sendo B. garinii a genoespécie mais prevalente. Este estudo também permitiu, iniciar o desenvolvimento/otimização de uma técnica de PCR em tempo real (qPCR) TaqMan®, tendo com alvo o gene flaB, para a deteção e quantificação das genoespécies europeias de B.b.s.l. mais prevalentes. Embora se encontre ainda em desenvolvimento, esta técnica de qPCR parece ser uma ferramenta muito promissora na identificação e quantificação de espécies de B.b.s.l., contribuindo para um diagnóstico mais rápido e eficiente da doença de Lyme.