Importância do complexo mediador na actividade transcricional do Yap8

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina

Os processos adaptativos às mudanças ambientais ocorrem principalmente através da reprogramação da expressão genética. A activação de genes de stress é controlada por factores de transcrição específicos que facilitam o recrutamento do complexo de pré-iniciação da transcrição para as regiões promotoras. O complexo Mediador é um co-activador necessário para a activação de vários genes, tanto em leveduras como em mamíferos. O domínio da cauda deste complexo interage com alguns factores de transcrição específicos, transmitindo o sinal de activação para a maquinaria basal de transcrição, enquanto o domínio CDK8 é responsável pela regulação do complexo, podendo exercer uma função activadora ou repressora. Em Saccharomyces cerevisiae, o factor de transcrição Yap8 desempenha um papel primordial na resposta ao stress induzido pelo arsénio. Na presença de arsénio, o Yap8 é acumulado no núcleo regulando a activação transcricional dos genes ACR2 e ACR3, que codificam para uma redutase de arsenato e uma proteína da membrana, respectivamente. Neste trabalho investigaram-se os mecanismos através dos quais o Yap8 induz a activação transcricional do gene ACR2 e avaliou-se a importância do complexo Mediador neste processo. Os resultados obtidos indicam que as subunidades Med2, Med3, Med14, Med15 e Med16 da cauda do complexo Mediador são importantes para a sobrevivência da levedura ao stress imposto pelo arsénio. Na ausência destas subunidades, a capacidade do Yap8 em activar a transcrição dos genes lacZ e ACR2 é drasticamente reduzida. Foi também demonstrado que o Yap8 estabelece interacções físicas com a subunidade Med2 e desta forma transmite o sinal de activação para maquinaria basal de transcrição. Além disso, os resultados mostram que o módulo CDK8 exerce a função de regulador negativo da actividade de trans-activação do Yap8, destabilizando quer oYap8 quer o Med2.