Study of the association of Gla Rich Protein (GRP) to human blood cells

Dissertação de mestrado, Ciências Biomédicas, Departamento de Ciências Biomédicas e Biomedicina, Universidade do Algarve, 2013

As proteínas dependentes da vitamina K (VKDP) são uma superfamília de proteínas dependentes da vitamina K para desempenharem diversas funções como a formação óssea, proliferação/apoptose, coagulação e regulação da calcificação vascular. Estas funções são dependentes da γ-carboxilação, uma modificação pós-tradução que converte resíduos de ácido glutâmico (Glu) a ácido carboxiglutâmico (Gla). Estes resíduos são responsáveis pela elevada afinidade de ligação às várias formas de cálcio destas proteínas. A proteína rica em Glas (GRP) é uma proteína secretada, altamente conservada e que possui o maior número de resíduos Gla por tamanho total de proteína conhecida até à data. Em humano, foi identificada em tecidos moles associada com situações de calcificação ectópica, como artérias calcificadas e calcinoses da pele, sendo proposta como um possível biomarcador de calcificação patológica. O processo inflamatório associa-se localmente à calcificação patológica, rapidamente evoluindo para o estado crónico e ligando-se intimamente com o crescente estado de mineralização patológica. O objetivo deste trabalho foi desvendar o papel da GRP em leucócitos humanos e, com esse propósito, foi procurada a expressão de GRP em leucócitos isolados do sangue e estudado o padrão de expressão diferencial desta proteína nos principais subtipos destas células, assim como em duas linhas celulares leucocíticas. Para além disso, o padrão de expressão da proteína Gla da matriz (MGP) - conhecida reguladora da calcificação vascular – bem como o de enzimas relacionadas com o processo de γ-carboxilação – como a reductase do epóxido de vitamina K (VKOR) – foi também caracterizado. Os resultados mostram que a GRP, MGP e VKOR são expressas por todos os subtipos de leucócitos e linhas celulares analisados, com diferentes níveis de expressão. Este estudo abre novas portas para a compreensão do possível papel da GRP e da MGP no processo inflamatório que ocorre em doenças intimamente ligadas à calcificação patológica.

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