鼠类粪便中类固醇的荧光标记及质谱鉴定

利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基肼基甲酸酯(BCEC)作柱前衍生化试剂, 在Hypersil BDS C_(18) (4.6 mm * 200 mm, 5 μm) 色谱柱上，采用梯度洗脱对皮质醇、皮质酮、睾酮、孕酮4种类固醇荧光衍生物进行了优化分离。65℃下在乙腈溶剂中以三氯乙酸作催化剂,衍生反应2 h后获得稳定的荧光产物。激发和发射波长分别为333 nm和390 nm。采用大气压化学电离源(APCI)正离子模式, 实现了黑线姬鼠粪便中４种类固醇化合物的定性及定量测定。线性回归系数均在0.9999以上,检出限为47.3～71.2 fmol。