大鼠血浆中痕量氨基酸的柱前衍生-高效液相色谱串联质谱测定

以1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基氯甲酸酯(BCEOC)作为柱前荧光衍生试剂,在Hypersil BDS C18 (4.6 ×200 mm, 5 μm)反相色谱柱上,荧光检测波长为390 nm(激发波长为333 nm),采用梯度洗脱实现了20种氨基酸标准品衍生物的分离检测.20种组分的线性范围为51.6 fmol～105.6 pmol,线性回归系数均大于0.9995;检出限为6.3～177.6 fmol (S/N=3:1).经柱后串联质谱电喷雾电离源(ESI Source)实现了各组分的质谱鉴定,并以酪氨酸(Tyr)衍生物为例进行了质谱裂解机理解析.对A、B、C三组(A:安静对照组;B:运动力竭即刻组;C:力竭恢复12 h 组) 24只大鼠血浆中氨基酸的定量测定结果表明,运动力竭即刻较安静状态大鼠血浆氨基酸含量明显增加;力竭恢复12 h 后血浆氨基酸水平基本恢复到运动前状态.方法的灵敏度高、重现性好,为大鼠血浆中氨基酸的测定提供了一种新方法