海带根中alpha-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及其酶抑制作用动力学研究

alpha-葡萄糖苷酶是一类能够催化碳水化合物alpha-1,4-糖苷键水解的酶，是动物体内许多代谢途径中的关键酶，具有多方面的靶向药理活性。研究表明，alpha-葡萄糖苷酶与糖尿病，艾滋病，恶性肿瘤、溶酶体贮积症等疾病的发生机制有重要关系，已经成为治疗这些疾病的重要靶点。 海带（Laminaria japonica） 属褐藻门、海带属植物。自二十世纪四十年代从日本引入中国以来，已成为中国沿海重要的海洋经济作物。海带藻体叶片部分大都用来提炼碘、甘露醇和藻酸盐，但其假根部分一直被当作化工工业和食品工业的废料，而未得到有效的利用。在中国的沿海一带，海带根作为一种抗糖尿病的民间药物，有很长的历史。因此从海带根中提取分离降血糖成分并研究其作用机制将具有重要的意义。 本论文第一部分进行了海带根中具有alpha-葡萄糖苷酶抑制作用的活性组分的筛选。首先我们按照海带根中所含成分的极性不同进行了提取分离，即将海带根乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。结果乙醇粗体物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位与水部位的酶抑制IC50分别为1589µg/L、970µg/L、 380µg/L、1616µg/L、1106µg/L。乙酸乙酯部位的酶抑制活性最强。 本论文第二部分对海带根乙酸乙酯部位的提取物的体内降糖活性进行了研究，结果表明乙酸乙酯部位可以降低糖尿病大鼠餐后血糖，与阴性对照差异极显著（P<0.01）。小鼠服药后表现出的生命体征与伺服拜糖平后表现出的生命体征类似。 在以上工作基础上我们以alpha-葡萄糖苷酶的抑制活性为导向，用天然产物化学的方法对活性成分进行追踪，通过光谱、波谱与理化性质鉴定出了具有显著alpha-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物：丁基-异丁基-邻苯酸二甲酯，并对其进行了酶抑制动力学研究。研究表明丁基-异丁基-邻苯酸二甲酯对alpha-葡萄糖苷酶表现为非竞争性抑制类型，IC50达到13.6μg/mL，且Km=2.39 g/L 本研究工作为进一步研究海带根降血糖成分的作用机理提供了研究基础。