青岛文昌鱼肌肉生化分析及其功能基因的研究

本论文主要对青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense)肌肉组织进行了酶组织化学实验和电镜观察，分离了青岛文昌鱼肌球蛋白重链基因异构体并将其重组表达；克隆了青岛文昌鱼新生肽链相关复合体α亚基基因，并检测了其时空表达情况。 根据NADH酶组化实验可以将文昌鱼的肌细胞分成两类，即蓝紫色、有氧代谢型的浅层肌和基本不着色、无氧代谢型的深层肌。电镜观察进一步验证了酶组化的结果，并首次发现浅层肌和中间肌细胞肌丝密度明显大于深层肌。而mATPase组化实验没能对肌纤维进行分类，这也许是由于实验的pH条件不是文昌鱼的肌纤维ATP酶活的pH；或者其很容易失活；或者该酶的活化需要不同于其它动物的金属离子的缘故。 克隆到三条对应于肌球蛋白重链尾部保守区的异构体，其中两条是首次报道。这三条异构体都属于II类肌球蛋白并和脊椎、无脊椎动物的多种类型的肌球蛋白分子有较高的同源性；利用原核表达系统对异构体进行重组表达，获得了可溶性的表达蛋白，为制备文昌鱼肌球蛋白特异性抗体打下了基础。 从青岛文昌鱼成体中分离到了新生肽链相关复合体α亚基的全长cDNA，并检测了其时空表达情况。对其cDNA 5’端的基因组序列进行预测和比较分析，没有发现肌肉特异性外显子的存在。