海藻中α-葡萄糖苷酶抑制剂的分离鉴定及其活性机理的研究

以α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型为基础，以大型海藻为研究对象，旨在发现海藻中能够预防与治疗糖尿病以及抗艾滋病的活性物质。在对青岛沿海海藻脂溶性提取物进行了普筛的基础上，以石莼为原料追踪并分离鉴定了酶活性抑制剂SQG；建立了快速准确测定海藻中SQG的方法，并测定了一些大型藻中SQG的含量及季节变化，为选择提取SQG的原料提供了依据；建立了大量制备SQG的方法，为深入研究SQG的活性机理和 SQG进入动物试验阶段进行基础研究工作；研究并提出了SQG的酶抑制活性机理，为进行药理研究提供理论依据。本文的工作由六部分组成，研究内容介绍如下：1、采用α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型对青岛沿海二十种海藻的脂溶性提取物进行了初步的活性筛选；初筛结果表明，海藻中普遍含有能够抑制α-葡萄糖苷酶活性的活性物质；2、对石莼中的活性组份进行了追踪并鉴定出了酶抑制活性物质1,2-二酰基-3-(6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基)-sn-甘油脂（SQG）。3、建立了快速准确直接测定SQG含量的方法。通过研究表明azure A比色法灵敏度高，检测限低（0.00442μmol），线性范围宽（0.00442-0.11488μmol），重现性好。4、测定了二十二种海藻中SQG的含量以及部分海藻SQG含量的季节变化，发现石莼中SQG含量较高并且受季节影响少。5、以石莼为原料建立了规模制备SQG的方法，为进一步研究SQG的生物活性奠定了基础。6、通过对SQG的酶抑制活性研究，首次测得SQG的IC_(50)为20μM。不同SQG浓度下酶动力学研究结果表明SQG对α-葡萄糖苷酶的抑制属于非竞争性抑制，抑制常数K_i为72.31μM；研究了SQG的构效关系并提出了SQG的酶抑制活性机理。