WSSV囊膜蛋白VP28基因在蓝藻中克隆和表达
| Data(s) |
2002
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| Resumo |
该研究通过蔗糖密度梯度离心分离纯化WSSV-中国株,在电镜观察下观察到不同病毒组分的大小、形态及负染后显示的精细结构;通过SDS-PAGE鉴定在囊膜组分、完整病毒粒子组分中的VP28蛋白.设计一对特异性PCR扩增引物.PCR法从WSSV-中国株基因组DNA中扩增得到vp28基因片段640bp,并在起始密码子ATG前,填加了适合于蓝藻表达系统高效表达的SD序列.进一步将vp28基因正向连接到海藻穿梭表达载体pRL-489上的启动子PpsbA下游,酶切鉴定连接正确.通过PCR扩增在DNA水平上验证vp28基因在两种鱼腥藻Anabaenasp.PCC7120中均以质粒形式存在,在聚球藻Synechococcussp.PCC7002中以整合形式存在于染色体DNA上.用制备的抗WSSV的抗血清,通过WesternBlotting在蛋白水平上证明vp28基因在两种鱼腥藻Anabaenasp.PCC7120中均得到了表达,分子量为28kD.该论文的研究目的是通过基因工程获得WSSV囊膜蛋白VP28的转基因蓝藻,期望有助于揭示WSSV感染对虾的分子机一,确定VP28的功能. |
| Identificador | |
| Idioma(s) |
中文 |
| Fonte |
WSSV囊膜蛋白VP28基因在蓝藻中克隆和表达.张春莉[d].中国科学院海洋研究所,2002.20-25 |
| Palavras-Chave | #白斑综合症病毒 #VP28蛋白 #基因克隆 #穿梭表达载体 #转基因蓝藻 |
| Tipo |
学位论文 |
