具有cGPX活力的含硒抗体酶的酶学及动力学性质研究

通过单克隆抗体制备技术得到三株特异结合半抗原 4 ( GSH-S-DNP二苄酯 )的单克隆抗体 HB4 ,HB5和 HB7.抗体经两步化学诱变得到具有细胞谷胱甘肽过氧化物酶 ( c GPX)活性的含硒抗体酶 m HB4 ,m HB5和 m HB7,活力分别为 1 70 ,1 867,32 U/μmol.其中 m HB5的活力是天然兔肝 c GPX的 0 .32倍 ,m 4 A4的1 .51倍 .等离子体 -质谱 ( ICP/MS)测得每分子含硒抗体酶分子中大约存在 2个硒原子 .m HB5的最适 p H为8.6～ 8.8.在 p H值范围为 7.0和 37℃条件下 ,m HB5催化 GSH和 H2 O2 或 t-ROOH反应的二级速率常数为 :k+ 1 ( H2 O2 ) 9.71× 1 0 6 L /( mol· min) ,k+ 1 ( t-ROOH) 5.99× 1 0 5 L/( mol· min) . m HB5使非酶催化反应速率提高了 9.8× 1 0 6和 3.7× 1 0 5倍.