人卵巢癌耐药细胞株的比较蛋白质组分析

卵巢癌是妇科疾病中仅次于宫颈癌和子宫内膜癌的常见肿瘤,死亡率较高[1].该肿瘤治疗失败的主要原因之一是复发后的肿瘤细胞凋亡抵抗机制导致化疗的耐药性.在卵巢癌的化疗中顺铂是主要使用的药物之一,但由于细胞多药耐药性的产生严重限制了其疗效的发挥[2].蛋白质组学是在蛋白水平上对整个器官、细胞或组织的基因组所表达的全部蛋白质进行总体分析,双向凝胶电泳和质谱技术则是研究蛋白质组学的核心技术.为探索与耐药相关的蛋白质,本文采用高分辨二维凝胶电泳分离技术对人卵巢癌细胞株COC1及其耐药细胞株COC1/DDP中的蛋白质进行分离和差异表达分析,应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱对酶解多肽进行测定[即测定蛋白质的肽质量指纹图(Peptide massfingerprinting,PMF)],并通过相应的数据库搜索来鉴定蛋白质.为获得更准确的检索结果,采用串联质谱技术对各肽段进行氨基酸测序,并应用IPI-HUMAN数据库对上述检索结果进一步加以确认.1实验部分1.1试剂IPG预制胶条(pH 3~10,17 cm)、载体两性电解质和矿物油(M ineral O il)均购自美国B io-Rad公司.Urea、蔗糖、G lycer...