利用真空渗入法在烟草植物叶片中表达异胡豆苷合酶(英文)

异胡豆苷合酶为萜烯类吲哚生物碱合成代谢途径初始反应步骤的关键酶 ,它催化色胺 (tryptamine)和裂环马钱子(secologanin)缩合生成异胡豆苷的反应。应用真空渗入法将异胡豆苷合酶的编码基因标定在烟草植物不同亚细胞区室内进行表达 ,它的体外酶活性分析采用间接荧光法检测色胺在反应体系中的消耗。Western印迹和酶活性测定表明 ,通过真空渗入法异胡豆苷合酶可在烟草植物叶绿体、液泡和内质网中功能性表达。