质粒RP4CFIts突变体的筛选和KiV表型的分析

用羟胺体外诱变质粒RP4，我们选择到一株温度敏感的菌落形成抑制突变体(temperature-sensitive colony-formation inhibition mutant,简称CFIts突变体)。其表型为在非允许温度时，在固体平板上不能由单个菌体繁殖为集落，类似于在非允许温度时，在固体平板上不能由单个菌体繁殖为集落，类似于文献报道的RP4的KiV基因表型。这种突变体初步认为是kor(KiV控制基因)的温度敏感性突变体，即由于kor蛋白产物的热变性导致KiV产物的过量或异常表达。生化分析研究表明：在非允许条件下，突变体的生长逐步受到抑制（其表现时倍增时间延长），大约繁殖两代后即全面抑制（菌数不再增加）；此时宿主菌的DNA、RNA、蛋白质等大分子合成几乎全部下降，噬菌体产率也明显降低。此时状态是完全可逆的，即在全面抑制后的20小时内，仍可因放回允许温度培养而形成集落。据此抑制现象(KiV表型)的逐步发生性，大分子合成的全面抑制性和完全可逆性判断，很象是宿主菌株在紧急状态下的整体调节机制——严紧型反应。