生物转化合成磷霉素菌株的筛选与转化特性研究

本研究从磷霉素（FOM）生产车间和储存仓库附近土壤中筛选手性环氧化顺式丙基磷酸（cPA）合成FOM的高效生物转化细菌。采用两种筛选模型，从土壤样品中分离到了183株待选细菌，其中147株为FOM抗性细菌，36株为cPA利用细菌。采用改进的琼脂块培养法，初筛获得了22株生物转化合成FOM菌株；再经振荡培养法，复筛获得3株生物转化活力较高的菌株，分别为FB3212、FB4211和FB7912。通过培养特征、生理生化特征性试验和16SrRNA序列分析鉴定，确定FB3212为赤红球菌（Rhodococcusruber），FB4211属于De沂ia菌属，FB7912为梭形芽抱杆菌（Bacillusfusformis），皆为新发现的生物转化合成FOM菌种。通过转化特性试验，FB3211、FB42n和FB7912的FOM转化合成均属于VO3-依赖型。甘油与Co2+对转化有明显的促进作用。在分批培养实验中FoM浓度在72h内随时间延一长而增高。底物cPA浓度对转化的影响最大，在三株菌中，FB7912的底物的抑制效应最小，转化活性最高，当cPA浓度为10mg／mL时，转化效果最佳，磷霉素转化产量为1.15mg/mL，转化率为10.17％。