中国柳叶藓科植物某些属的分子系统学研究

柳叶鲜科植物是侧茹蓟类中的一个大科，其系统位置介于羽醉科和青醉科之间，在全世界分布很广。柳叶蓟科植物全世界先后报道有39属，约300余种，中国己记载26属。该科的种类众多，配子体和抱子体形态、生活习性呈多样化，根据不同形状研究其系统发育往往差异较大。目前柳汗卜蓟科科内属间和属内种间的系统位置存有许多争议。本研究对中国柳叶鲜科植物的RJ气PD分析，从DNA水平上对它们的亲缘关系和分类问题加以研究，为它们的分类学研究和亲缘关系提供分子证据。研究的主要结果有：1．苔醉植物中酚类化合物含量高，DNA提取和纯化非常困难，本研究采用改良CTAB法提取基因组DNA。从试验结果看出：改良CTAB法提取的基因组DNA的纯度较大，浓度较高，且稳定性、完整性都比较好。2．采取正交设计方法，建立了柳叶鲜科植物RAPD扩增的优化体系，反应体系主要成分为：模板DNA100ng、dNTPo．lmmol／L·Taq酶0．75U、引物0.20μmol／L、Mg2＋浓度2.00mmol／1：反应体系总体积为25林L。反应程序为：94℃预变性5min，94℃lmin，36.5℃min，72℃90see，进行35个循环，最后一次延伸72℃10min，冷却至4℃保存。3．利用RAPD技术分析柳叶鲜科植物12个属26个种，用14个随机引物进行扩增，共得到171条清晰稳定的多态片段，Nei遗传相似系数分析结果表明：柳仆卜鲜属和薄网蓟属明显聚合在一起，可以合并为柳叶蓟属。传统上定义很广的细湿醉属（包括狭义的细湿蓟属、嗜湿龄属和偏叶鲜属）和水灰鲜属在聚类图中不聚合在一起，说明广义细湿鲜属和水灰鲜属不是一个很自然的分类类群，而应分为更细的属。且三洋蓟属、范氏辞属和湿原蓟属的关系较近。4－采用RAPD技术构建了9份牛角蓟标本的指纹图谱，结果表明：9份牛角鲜标本的形态特征差异虽然非常大，但通过RAPD分析表明其为同一种。通过RAPD分析不同意Ochyra（1989）将牛角鲜属单独成牛角鲜科，仍将牛角鲜属归于柳叶鲜科，包括1种1变种。