维生素C二步混菌发酵中L-山梨糖脱氢酶的研究

以氧化葡萄糖酸杆菌和巨大芽孢杆菌混合培养物的无细胞抽提液建立了Vc二步发酵离体实验系统.反应体系中加入山梨糖在pH7.0,35℃下保温24h，2-酮基-L-古龙酸（2KGA）生成.巨大芽孢杆菌胞外活性物质对离体系统的产酸没有影响，一定量的L-山梨糖脱氢酶可促进产酸.从氧化葡萄糖酸杆菌细胞质中分离纯化出L-山梨糖脱氢酶.L-山梨糖脱氢酶酶活与2KGA的形成呈正相关：L-山梨糖的转化是在细胞内进行的;亲缘关系相差甚远的伴生菌均能促进小菌产酸，且“伴生”效率相近;伴生菌通过促进产酸菌生长和提高其L-山梨糖脱氢酶比活力而提高发酵系统中L-山梨糖脱氢酶总活力，并且通过促进产酸菌合成新的RNA而增强其代谢力，从而促进产酸;通过对不同发酵时间L-山梨糖脱氢酶酶活及2KGA累积量的比较表明，此酶可作为生产上2KGA生成的实时监控的指示酶;环境因子通过提高酶活力促进产酸.