石油芳烃污染生物标记

从辽河油田不同石油污染地区采集土样，查明石油污染类型影响微生物群落生态分布。分离筛选得到6株优势菲降解菌B1（假单胞菌属），B2（黄单胞菌属），E3（黄杆菌属），E4 (假单胞菌属），E5（微杆菌属），E6（黄杆菌属）。B2、E4, E6含有质粒，大小均在25Kb左右。初步确定菲降解功能是由质粒控制的。菌株降解菲的能力与无细胞粗提液含有的菲双加氧酶活力的高低呈正相关。随着环境中菲浓度的增加。，菲双加氧酶活力、分子量为46KDa的蛋白量、降解质粒含量均随之增加，RNA不仅整体含量在增加，而且分子量为0. 45Kb的条带增加显著。 从E4菌分离纯化菲双加氧酶。分子量约为46KDa,表观分子量为120KDa；酶活最适pH为7.0,最适温度是29 ℃，最稳定的pH是中性，在温度超过40℃时，酶稳定性明显下降；乙酸钠抑制酶活性；H_2O_2浓度为0.4%时，双加氧酶活力提高最大；纯酶只氧化菲，有很强的底物特异性；当菲的浓度增加到80uM时，酶促反应速率达到最大，米氏常数约为40uM；0.1mM菲咯琳对菲双加氧酶有明显的抑制作用；二价铁离子不仅可以提高酶活性而且对双加氧酶有明显的激活作用。