有机磷降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

从沈阳苏家屯地区长期受有机磷污染的土壤中分离到10株以敌敌畏（DDVP）为唯一碳源生长的细菌，其中降解活性最高的菌株经生理生化鉴定和16SrDNA同源性比较,鉴定为甲基杆菌属(Methylobacterium sp.)，将其命名为DDV-1(GenBank Accession NO. FJ225120)。该菌株最适生长条件： pH 7.0，温度 30℃。 对菌株DDV-1降解性能的研究表明，该菌株降解敌敌畏的最适条件为：pH 7.0，30℃，在此条件下，500 mg/L敌敌畏经过DDV-1菌株代谢5天后，降解率可达74.9%。装液量对菌株生长及降解率影响不大。DDV-1对敌敌畏有较高的耐受度，在初始量浓度为 1 500 mg/L敌敌畏的高浓度下同样能进行降解。敌敌畏的降解速率与起始接种量呈正比。正交设计实验结果表明6个因素对敌敌畏降解率影响的程度依次为C(pH)、D（温度）>B(N源)>E（接种量）>A（C源）>F（DDVP浓度）。 除了敌敌畏，菌株DDV-1还能以甲基异硫磷、辛硫磷、敌百虫、甲胺磷、对硫磷为唯一碳源，对有机磷类农药有广谱降解性。 酶学方面，酶的定位试验表明，菌株DDV-1的有机磷水解酶为胞内酶。该水解酶最适反应条件为：pH 7.0，温度30℃；粗酶液在20-40℃稳定性良好，在pH6.0-9.0都能保持活力，最适产酶碳、氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。 在分子生物学方面，通过功能基因扩增，扩增到有机磷水解酶基因（mpd基因）。该片段为818碱基，其与已知的有机磷水解酶基因不具有同源性。 实验室条件下模拟有机磷污染土壤修复的研究表明，农药的初始浓度和接种量对敌敌畏降解影响较大，最适接种量为1000000个细胞/g土壤。