姚虻唾液腺抗血栓活性物质 tablysin2的原核表达及活性研究

吸血节肢动物在长期的环境胁迫下,进化出一套有利于其完成吸血活动的分子机制。吸血节肢动物的唾液腺可分泌多种有助于完成吸血过程的活性物质，其中包括血小板聚集抑制分子、抗凝血物质、溶栓物质、血管扩张分子、血管收缩抑制分子及其他一些相互作用分子。 虻虫作为传统的抗血栓中药具有具有悠久的应用历史。早在两千多年前《神农本草经》中就有“虻虫，性苦，微寒，主逐淤血，破血积、通利血脉及九窍”这样的记载。但是目前关于牛虻唾液腺抗血栓活性物质的研究很少，因此我们研究了一种牛虻——姚虻的唾液腺作为研究材料，希望从中寻找具有药用价值的抗血栓活性物质。我们还希望能利用微生物发酵工程对其进行小规模生产，以检测这些活性物质的体内活性，毒性等指标，为大规模的工厂化生产及临床应用奠定基础。 我们成功地从姚虻唾液腺cDNA文库中筛选到了抗血栓活性物质tablysin2，并利用大肠杆菌pET表达系统成功地对其进行了表达，获得了具有纤溶酶活性和血小板聚集抑制活性的tablysin2。这一工作进展解决了姚虻唾液腺资源紧缺对研究tablysin2的限制，为tablysin2的体内研究及临床应用创造了条件。此外，我们通过动物实验，初步断定tablysin2在18 ug/ml的剂量范围内不会引起组织出血。