灵长类动物精子超低温冷冻保存的研究

精子的超低温冷冻保存为珍稀、濒危动物种质资源的保存、人类不育症的治疗、家畜繁殖以及辅助生殖技术（如人工授精、体外受精和胚胎移植）的进一步发展奠定了基础。灵长类动物精子的冷冻保存距今已有30多年的历史，到目前为止，全世界两百余种灵长类动物中仅有约15个物种的精子被冷冻保存的报道，而用冷冻精液人工授精产下后代的报道仅见于大猩猩、黑猩猩、食蟹猴、械猴和称猴等5种灵长类动物。冻精人工授精率如此之低主要是因为人们对灵长类动物精子的低温生物学知识、精子的冷冻损伤机制以及某些物质的冷冻保护作用机理缺乏了解，导致了冷冻复苏精子的存活率降低，受精力急剧下降。为了探讨灵长类动物精子冷冻损伤的机理，提高精子的冷冻保存效率，本论文以食蟹猴和称猴为动物模型，以冷冻复苏精子的运动度、质膜完整率和顶体完整率为检测指标，对．影响灵长类动物精子冷冻保存效果的因素作了积极的探讨和研究：1）研究了脯氨酸、谷氨酞胺和甘氨酸对食蟹猴精子冷冻保存的影响，发现一定浓度的氨基酸有利于食蟹猴精子的冷冻保存，但高浓度的氨基酸却会对冷冻复苏精子产生负面影响；2）首次建立了灵长类动物精子成分确定防冻液的冷冻保存方法，为准确分析研究精子冷冻损伤机制和某些物质的冷冻保护机理莫定了基础；3）对比研究了不同类型冷冻保存稀释液及不同渗透性防冻剂在食蟹猴精子冷冻保存中的作用以及对冷冻复苏精子功能的影响，筛选、优化出了凡种适合于食蟹猴精子冷冻保存的稀释液和渗透性防冻剂；4）比较研究了几种不同类型防冻液对食蟹猴和称猴精子冷冻保存的效果，发现适合食蟹猴精子冻存的防冻液也同样适合于称猴精子。本研究的结果既有利于改进现有的灵长类动物精子冷冻保存方法，又有利于对精子的冷冻损伤机制和保护性物质的作用机理作进一步的研究，为低温生物学和生物多样性的保护作贡献。