含硒抗体酶及酶法合成~（13）C尿苷二磷酸葡萄糖

胞质谷胱甘肽过氧化物酶（cGPX）是生物体内重要的抗氧化含硒酶，在保护机体免受活性氧损伤方面起着重要作用，因此利用抗体酶技术进行cGPX的人工模拟具有重要意义。本文在疏水腔修饰法指导下，设计合成了两种新的具有GSH特征的半抗原Hp4和Hp5。通过单克隆抗体及化学诱变技术制备得到三种针对半抗原Hp4的含硒抗体酶和两种针对Hp5 特异的含硒抗体酶。其中SeHB5(1867 U/μmol)和SeIA7（3567U/μmol）活力达到和天然酶同一数量级，进一步验证了疏水腔修饰法。本文还对含硒抗体酶SeHB5和SeIA7的酶学性质进行了系统的研究。生物活性实验表明含硒抗体酶对不同浓度H_2O_2损伤的小鼠心肌细胞均有一定程度的保护作用。本文同时报道了三种硒代β-环糊精作为cGPX模拟物的活力，其中6,6'-(O-亚苯基）二硒基桥联-β-环糊精二聚体的活力超过目前被认为最理想的补硒试剂Ebselen。~（13）C标记UDPG在利用核磁手段发现新的UDPG依赖糖基转移酶和检测新的糖基化合物，确定糖基间连接方式，合成同位素标记寡糖和多糖等方面具有广阔的应用前景。本文首次从植物培养细胞Rauvolfia serpentina经四步纯化得到具有一定纯度的UDPG焦磷酸化酶，并应用该酶建立了经济，简便，高产率的从葡萄糖出发，酶法大量合成UDPG的方法。利用该方法首次合成得到0.5克级的UDP-[4-~（13）C]-glucose，产率高达～70%。在NMR谱学方面确定了UDPG中葡萄糖基上4位C的归属，从而纠正了文献中关于UDPG核磁谱归属中的部分错误。