竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒五种磷脂酶A_(2)的分离纯化和氨基酸序列分析

用超细Sephadex G-75凝胶色谱和C4反相高效液相色谱从竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒中分离纯化5种磷脂酶A_(2),并分别命名为PLA_(2)-Ⅰ(SWISS-PROT,P82892)、Ⅱ(SWISS-PROT,P82893)、Ⅲ(SWISS-PROT,P82894)、Ⅳ(SWISS-PROT,P82895)、Ⅴ(SWISS-PROT,P82896)。SDS-PAGE测定它们的分子量分别为14.0、15.8、15.0、14.0和14.0kDa。等电聚焦电泳测得PLA_(2)-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ呈碱性,等电点大于8.8;PLA_(2)-Ⅳ和Ⅴ呈酸性,等电点分别为5.2和4.7。PLA_(2)-Ⅳ和Ⅴ有水解卵磷脂活性。用自动Edman降解法测定了PLA_(2)-Ⅴ的全部氨基酸序列和PLA_(2)-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的N-端部分氨基酸序列。PLA_(2)-Ⅴ由122个氨基酸残基组成,有14个Cys,并与其它来源的PLA_(2)的氨基酸序列进行了比较。