一种质粒及其构建方法和在艾滋病毒载量测定上的应用

一种质粒及其构建方法和在艾滋病毒载量测定上的应用，属艾滋病防治领域。质粒为pSPgag737/JM109 CGMCC NO.0486。构建方法是将HIV－1前病毒DNA进行Sal I/sacI双酶切，与被同样双酶切的pSP64Poly(A)质粒发生粘性末端连接，得到含有HIV－lgag基因片断的pSPgag737重组质粒，转化至JM109感受态细胞，经酶切/PCR鉴定，得到阳性克隆子。体外转录阳性克隆子，获得病毒载量定量测定的RNA外参照，将PCR技术与Kodak电泳图谱分析系统相结合，建立了HIV感染者和艾滋病人血浆病毒载量的定量测定方法。本发明操作简单，价格便宜，特异性好，灵敏度高，可重复性好，作为艾滋病的科学研究与防治的工具。