小鼠Bicc1基因RNAi序列的筛选与鉴定
Data(s) |
2010
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Resumo |
通过网上提供的生物信息学分析软件进行搜索和比对,初步筛选到3个较好的针对小鼠双尾-C(Bicc1)基因的RNA干扰(RNAi)序列。合成这3个干涉序列片段后克隆到pRS-HushshRNA载体中。构建Bicc1基因的真核表达载体pEGFP-C3-Bicc1,将绿色荧光蛋白(GFP)标签标记在Bicc1蛋白上。利用细胞转染技术将pEGFP-C3-Bicc1与3个干涉序列载体共转染至体外培养的HEK-293细胞中,最后通过细胞荧光强度、半定量PCR和Westernblotting鉴定出其中两个序列(pRS-Hush-RNAi-Bicc1-N/-C)能明显降低Bicc1蛋白在HEK-293细胞中的表达水平,为下一步建立起低表达Bicc1的稳定细胞株和研究小鼠Bicc1的功能提供了良好的材料。 |
Identificador | |
Idioma(s) |
中文 |
Fonte |
周亮, 杨君兴.小鼠Bicc1基因RNAi序列的筛选与鉴定.动物学研究,2010,31(1):84-88 |
Palavras-Chave | #小鼠Bicc1基因 #RNA干扰 #pRS-Hush #pEGFP-C3-Bicc1 #转染 |
Tipo |
期刊论文 |