非放射性标记探针分离番茄渗透调节蛋白基因

从栽培蕃茄（Lycopersilon esculentum Mill.）和秘鲁蕃茄（L. peruvianum Mill.）叶子中提取核DNA用EcoRI、BamHI、 HindⅢ限制性内切酶酶切，经Southern转移与digoxigenin标记的渗透调节蛋白cDNA探针进行杂交。从杂交图谱上可以看出两种蕃茄中都至少有两类渗调蛋白基因，同时两种蕃茄在杂交图谱上有差异。栽培蕃茄核DNA经HindⅢ酶切后的5kb和10kb两个片段从电泳凝胶中回收，插入到puc-19载体质粒中，宿主菌为JM109。然后以渗调蛋白cDNA为探针，进行菌落原位杂交，得到几个阳性克隆。