豌豆β-微管蛋白基因的分离

微管蛋白是在进化过程中最为保守的蛋白质中的一组。高等植物的微管蛋白基因与酵母的微管蛋白基因具有同源性。据此进行了如下实验：从豌豆（A561），大豆（黑农26）苗中提出的核DNA用EcoRI、BamHI和SalI限制性内切酶酶切，经Southern转移与32P标记的酵母β-微管蛋白cDNA进行杂交。从杂交图谱上可以看出豌豆、大豆均有两个拷贝的β-微管蛋白基因。豌豆核DNA经BamHI酶切后的5kb和10kb两个片段从电泳凝胶中回收，插入到puc9质粒中，宿主菌为JM83。然后以酵母β-微管蛋白基因为探针，用菌落原位杂交和Southern斑点杂交的方法筛选出含有豌豆β-微管蛋白基因编码序列的克隆。所克隆到的DNA序列的限制性酶切图谱及序列分析尚有待进一步研究。