Ação molecular da 1,25(OH)2D3 em células endoteliais humanas submetidas a diferentes concentrações de leptina

Altas concentrações plasmáticas de leptina têm sido relacionadas ao aumento da formação de espécies reativas de oxigênio (ROS) que podem desempenhar um papel regulador central em eventos inflamatórios e cardiovasculares. Estudos recentes têm demonstrado que a vitamina D é capaz de reduzir marcadores do estresse oxidativo, bem como modular a produção de citocinas inflamatórias. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do pré-tratamento com concentração fisiológica (10-10 M) e suprafisiológica(10-7 M) de 1,25(OH)2D3 na produção do ânion superóxido (O2) e nos fatores de transcrição NF-κB e Nrf2,em células endoteliais humanas estimuladas com diferentes concentrações de leptina (1 e 10 ng/mL). Quando as células foram pré-tratadas com 1,25(OH)2D3, e estimuladas com leptina (1 e 10 ng/mL), a 1,25(OH)2D3 reduziu (p<0,05) a produção de ânion superóxido (O ), principalmente na concentração de 10-7 M. O fator de transcrição NF-κB foi positivamente ativado em células incubadas com 10 ng/mL de leptina, entretanto, quando se realizou o pré-tratamento com 1,25(OH)2D3 houve redução da translocação do NF-κB, assim como a produção de citocinas reguladas por este fator de transcrição. Também foi observado que o pré-tratamento com 10-7 M de 1,25(OH)2D3 aumentou de forma significativa (p<0,05) a expressão do fator de transcrição Nrf2 na fração nuclear em comparação ao controle, principalmente quando associada à 10 ng/mL de leptina (p<0,05). Tomados em conjunto, nossos resultados indicam que o tratamento com ambas as concentrações, 10-10 e 10-7 M de 1,25(OH)2D3 em células endoteliais humanas, foram eficazes em inibir a produção do ânion superóxido (O2), citocinas pró-inflamatórias, bem como inibir a translocação nuclear do fator de transcrição NF-κB, e ativar a via antioxidante Nrf2. Estes achados sugerem que o pré-tratamento com ambas as concentrações (fisiológica e suprafisiológica) de 1,25(OH)2D3 na presença de alta concentração de leptina, pode ter um efeito positivo no endotélio através da regulação de marcadores de inflamação e atividade antioxidante

High plasma concentrations of leptin have been related to increased formation of reactive oxygen species (ROS) that can play a central regulatory role in inflammatory and cardiovascular events. Recent studies have shown that vitamin D is able to reduce oxidative stress markers, as well as interfere with the production of inflammatory cytokines. The aim of this study was to evaluate the effect of pre-treatment with physiological (10-10 M) and supraphysiological (10-7 M) concentrations of 1,25(OH)2D3 in the production of superoxide anion (O2) and transcription factors NF-κB and Nrf2 in human endothelial cells stimulated with different leptin concentrations (1 and 10 ng/mL). When cells were pre-treated with 1,25(OH)2D3, and were stimulated with leptin (1 and 10 ng/mL), 1,25(OH)2D3 reduced (p <0.05) superoxide anion production (O2), especially atthe concentration of 10-7 M. The NF-κB transcription factor has been positively activated in cells incubated with 10 ng/mL of leptin, however, when using the pre-treatment with 1,25(OH)2D3 decreased the translocation of NF-κB as well as the production of cytokines regulated by this transcription factor. It was also observed that the pre-treatment with 10-7 M of 1,25(OH)2D3 increased significantly (p<0.05) the expression of transcription factor Nrf2 in nuclear fraction compared to control, particularly when associated with 10 ng/mL leptin (p<0.05). Taken together, our results indicate that treatment with both concentrations, 10-10 and 10-7 M, of 1,25(OH)2D3 in endothelial human cells were effective in inhibiting the production of superoxide anion (O2), pro-inflammatory cytokines and inhibit the nuclear translocation of the transcription factor NF-κB, as well as activate the antioxidant Nrf2 pathway. These findings suggest that pre-treatment with with both concentrations (physiological and supraphysiological) of 1,25(OH)2D3 in the presence of high concentration of leptin, can have a positive effect on the endothelium through the regulation of markers of inflammation and antioxidant activity