The factor V HR2 haplotype: Prevalence and association of the A4070G and A6755G polymorphisms

Recently, a polymorphism was identified in exon 25 of the factor V gene that is possibly a functional candidate for the HR2 haplotype. This haplotype is characterized by a single base substitution named R2 (A4070G) in the B domain of the protein. A mutation (A6755G; 2194Asp→Gly) located near the C terminus has been hypothesized to influence protein folding and glycosylation, and might be responsible for the shift in factor V isoform (FV1 / FV2) ratio. This study investigated the prevalence of these two factor V HR2 haplotype polymorphisms in a cohort of normal blood donors, patients with osteoarthritis and women with complications during pregnancy, and in families of factor V Leiden individuals. A high allele frequency for the two polymorphisms was found in the blood donor group (6.2% R2, 5.6% A6755G). No significant difference in allele frequency was observed in the clinical groups (obstetric complications and osteoarthritis, 4.1-4.9% for the two polymorphisms) when compared with that of healthy blood donors. We confirm that the factor V A6755G polymorphism shows strong linkage to the R2 allele, although it is not exclusively inherited with the exon 13 A4070G variant and can occur independently. © 2001 Lippincott Williams & Wilkins.

Psip1/Ledgf p52 binds methylated histone H3K36 and splicing factors and contributes to the regulation of alternative splicing

Increasing evidence suggests that chromatin modifications have important roles in modulating constitutive or alternative splicing. Here we demonstrate that the PWWP domain of the chromatin-associated protein Psip1/Ledgf can specifically recognize tri-methylated H3K36 and that, like this histone modification, the Psip1 short (p52) isoform is enriched at active genes. We show that the p52, but not the long (p75), isoform of Psip1 co-localizes and interacts with Srsf1 and other proteins involved in mRNA processing. The level of H3K36me3 associated Srsf1 is reduced in Psip1 mutant cells and alternative splicing of specific genes is affected. Moreover, we show altered Srsf1 distribution around the alternatively spliced exons of these genes in Psip1 null cells. We propose that Psip1/p52, through its binding to both chromatin and splicing factors, might act to modulate splicing.

Total transcriptome, proteome, and allergome of Johnson grass pollen, which is important for allergic rhinitis in subtropical regions

Background Genomic data are lacking for many allergen sources. To circumvent this limitation, we implemented a strategy to reveal the repertoire of pollen allergens of a grass with clinical importance in subtropical regions, where an increasing proportion of the world's population resides. Objective We sought to identify and immunologically characterize the allergenic components of the Panicoideae Johnson grass pollen (JGP; Sorghum halepense). Methods The total pollen transcriptome, proteome, and allergome of JGP were documented. Serum IgE reactivities with pollen and purified allergens were assessed in 64 patients with grass pollen allergy from a subtropical region. Results Purified Sor h 1 and Sor h 13 were identified as clinically important allergen components of JGP with serum IgE reactivity in 49 (76%) and 28 (43.8%), respectively, of patients with grass pollen allergy. Within whole JGP, multiple cDNA transcripts and peptide spectra belonging to grass pollen allergen families 1, 2, 4, 7, 11, 12, 13, and 25 were identified. Pollen allergens restricted to subtropical grasses (groups 22-24) were also present within the JGP transcriptome and proteome. Mass spectrometry confirmed the IgE-reactive components of JGP included isoforms of Sor h 1, Sor h 2, Sor h 13, and Sor h 23. Conclusion Our integrated molecular approach revealed qualitative differences between the allergenic components of JGP and temperate grass pollens. Knowledge of these newly identified allergens has the potential to improve specific diagnosis and allergen immunotherapy treatment for patients with grass pollen allergy in subtropical regions and reduce the burden of allergic respiratory disease globally.

Genetic disorders of the LRP5-Wnt signalling pathway affecting the skeleton

Osteoporosis is a common, increasingly prevalent and potentially debilitating condition of men and women. Genetic factors are major determinants of bone mass and the risk of fracture, but few genes have been definitively demonstrated to be involved. The identification of these factors will provide novel insights into the processes of bone formation and loss and thus the pathogenesis of osteoporosis, enabling the rational development of novel therapies. In this article, we present the extensive genetic and functional data indicating that the LRP5 gene and the Wnt signalling pathway are key players in bone formation and the risk of osteoporosis, and that LRP5 signalling is essential for normal morphology, developmental processes and bone health.

Exigências nutricionais de caprinos da raça alpina em crescimento. 3. exigências nutricionais de energia, proteína, cálcio e fósforo1

This experiment was conducted to estimate the energy, protein, calcium, and phosphorus requirements for kid goats in the growing phase. Fifteen four-month-old male kid goats, average live weight of 20 kg and fed an isocaloric and isoprotein diet with increased levels of calcium, were used. The experimental period was 27 days. The animals were slaughtered to determine body composition and to estimate the body contents of energy, protein, ether extract, calcium, and phosphorus. The estimates per kg of gain were: net energy, 1,802 to 1,632 kcal; net protein, 0.168 to 0.183 g; calcium, 6.993 to 6.758 mg; and phosphorus, 5.865 to 6.430 mg for animals from 18 to 26 kg of live weight.

Levedura como pronutriente em dietas para matrizes e alevinos de tilápia-do-nilo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Fitase e digestibilidade aparente de nutrientes de rações por tilápias-do-nilo

Objetivou-se determinar a digestibilidade aparente de nutrientes de rações com diferentes níveis de fitase formuladas com alimentos de origem vegetal, em 90 juvenis de tilápia-do-nilo, pesando em média 120,0 g, alojados em nove tanques-rede (dez peixes/tanque). Adotou-se delineamento inteiramente casualizado, com nove tratamentos e seis repetições. Os tratamentos consistiram de uma ração suplementada com fósforo (controle) e de oito sem suplementação de fósforo, porém com 500, 1.000, 1.500, 2.000, 2.500, 3.000, 3.500 e 4.000 unidades de fitase (UF)/kg de ração, todas isoenergéticas e isoprotéicas. A inclusão de 1.500 UF melhorou a digestibilidade da MS e da EB e a disponibilidade de cálcio e fósforo das rações. O nível de 1.000 UF melhorou a disponibilidade de zinco e manganês.

Forma física da ração e pesos de abate nas características de carcaça de cordeiros em creep feeding

Avaliaram-se 20 cordeiros machos ¾ mestiços Suffolk submetidos a dietas isoprotéicas (21% proteína bruta) e isoenergéticas (2,9 Mcal EM/kg MS), nas formas farelada e peletizada, e abatidos com 26 e 28 kg de peso vivo. Os cordeiros tiveram acesso ao creep feeding, permanecendo com as ovelhas até atingirem o peso de abate. A ração peletizada promoveu maior rendimento de carcaça quente (54,18% para ração peletizada e 52,04% para ração farelada) e maior rendimento verdadeiro (58,37% peletizada e 56,66% farelada). O peso vivo final não interferiu nos pesos das carcaças quente e fria (12,79 e 13,05 kg para 26 e 28 kg de peso vivo final, respectivamente). Não houve interferência da forma física da ração e do peso vivo final dos animais na área do olho de lombo e no comprimento do lombo. A largura do lombo e a máxima espessura de gordura foram maiores nas carcaças dos animais que receberam ração peletizada e a mínima espessura foi inferior nos animais abatidos com 26 kg de peso vivo (1,48 e 1,77 cm para os cordeiros abatidos com 26 e 28 kg, respectivamente). Concluiu-se que o uso da ração peletizada proporcionou aos cordeiros melhoria dos índices de rendimento de carcaça quente, rendimento biológico, profundidade do lombo e índice de compacidade da carcaça. O peso vivo de 26 kg apresentou-se como o mais satisfatório para o abate de cordeiros, por apresentar características de carcaça semelhantes àqueles abatidos com 28 kg.

Performance, carcass characteristics and gain cost of feedlot cattle fed a high level of concentrate and different feed additives

The objective of this study was to evaluate the effects of feeding cattle with isoprotein and isoenergetic diets, with and without the addition of polyclonal antibody preparation (PAP), yeasts (YST) or monensin sodium (MON) on performance, carcass characteristics and gain cost in feedlot. Ninety-five 20-month old bullocks (323.3±21.8 kg) were distributed in 25 pens. The completely randomized experimental design had a 2 × 2 + 1 factorial arrangement and the treatments were replicated 5 times. There was no effect of MON for DMI throughout the feedlot period; however, MON reduced the dry matter intake (DMI) in g/kg of BW in the first 28 days when compared with the other treatments. The gain cost decreased with MON addition in relation to the other treatments. Inclusion of YST decreased average daily gain (ADG), final body weight, hot carcass weight, carcass weight, gain to feed ratio and DMI in g/kg body weight, worsening feed conversion and increasing the gain cost in the feeding periods. Inclusion of PAP increased ADG and decreased the gain cost, besides improving feed conversion. For MON and PAP, a difference was found for kidney-pelvic fat and kidney-pelvic fat per 100 kg of hot carcass weight. For MON and YST, there was a difference in ADG, feed conversion, gain cost and carcass yield and kidney-pelvic fat per 100 kg of hot carcass. Treatment YST worsened performance in relation to the non-supplemented treatments. Feeding PAP to animals did not influence performance and carcass characteristics of bullocks in feedlot negatively. Thus, PAP shows potential to substitute MON in cattle feeding using isoprotein and isoenergetic diets.

Desempenho produtivo da tilápia-do-nilo arraçoada com dieta contendo farelo de nabo forrageiro

Alternative protein sources have been studied in order to reduce feed costs. In a completely random experimental design (five treatments and six replicates) 180 Nile tilapia fingerlings were distributed in 30 aquaria (50 L). The fish were fed isoprotein (28% digestible protein) and isoenergetic (3000 kcal digestible energy kg(-1)) diets where soybean meal was substituted by fodder radish meal at the following levels: 0, 12.5, 25, 50 and 75% Performance and chemical composition of the fillet were determined after 90 days. It was conclude that fodder radish meal can substitute soybean meal up to 25% without any interference on performance and fillet composition of Nile tilapia fingerlings.

Medidas objetivas e composição tecidual da carcaça de cordeiros alimentados com diferentes níveis de energia em creep feeding

O trabalho foi desenvolvido no Setor de Ovinocultura da Universidade de Marília, SP, objetivando avaliar o efeito dos três níveis de energia (2,6; 2,8 e 3,0 Mcal EM/kg MS) sobre as medidas objetivas das carcaças e do lombo, pesos e rendimentos dos cortes, além da composição tecidual e musculosidade da carcaça de cordeiros alimentados em creep feeding. As rações foram isoprotéicas (18,50% PB), fornecidas ad libitum, duas vezes ao dia. Os cordeiros permaneceram com as ovelhas até o abate, quando atingiam o peso preestabelecido de 31 kg. Posteriormente, os animais foram submetidos a jejum alimentar, registrando-se o peso vivo ao abate. Durante o resfriamento na câmara de refrigeração a 5ºC, por 24 horas, as carcaças foram penduradas pelas articulações tarso metartasiana, distanciadas em 17 cm; sendo em seguida mensuradas. As carcaças foram seccionadas ao meio e a metade esquerda dividida em sete regiões anatômicas (paleta, perna, lombo, costelas falsas, costelas verdadeiras, baixo e pescoço), possibilitando o cálculo dos pesos e rendimentos dos cortes. Posteriormente, efetuou-se as mensurações no músculo Longissimus dorsi e a perna esquerda foi dissecada e determinados os pesos dos músculos, da gordura e dos ossos, além de calculado o índice de musculosidade. Os resultados revelaram diferenças significativas para as medidas de profundidade do tórax, peso e rendimento das costelas verdadeiras e gordura intermuscular da perna, sendo que o nível de 3,0 Mcal em na ração proporcionou os melhores resultados, para cordeiros Suffolk alimentados e terminados em creep feeding.

Níveis de feno de alfafa e forma física da ração no desempenho de cordeiros em creep feeding

Com o objetivo de avaliar o desempenho de cordeiros em creep feeding e confinados, foram realizados dois experimentos. No primeiro, 32 cordeiros ¾ mestiços Suffolk foram criados em creep feeding, desmamados aos 56 dias de idade e, em seguida, confinados. Os cordeiros receberam os seguintes tratamentos: 1. sem suplementação; 2. suplementação com ração à base de milho e soja; 3. ração à base de milho e soja com 15% de feno de alfafa; 4. ração à base de milho e soja com 30% de feno de alfafa. Após o desmame, os cordeiros suplementados foram confinados, recebendo a mesma ração do creep feeding até atingirem de 30 a 32 kg de peso vivo. No segundo experimento, foram utilizados 32 cordeiros ¾ mestiços Suffolk, alimentados em creep feeding, recebendo ração farelada ou peletizada até os pesos de abate: 26 e 28 kg. As dietas eram isoprotéicas (21% PB) e isoenergéticas (2,9 Mcal EM/kg MS). Os animais suplementados na fase de aleitamento obtiveram ganho de peso de 147,4g/dia a mais, quando comparados aos não suplementados. Não houve efeito dos níveis de feno de alfafa na ração sobre o desempenho dos animais. Entretanto, no confinamento, a máxima eficiência de ganho de peso esperada para os machos, conforme a análise de regressão, situou-se em 18,7% de inclusão de feno de alfafa na ração. A ração peletizada propiciou maior desenvolvimento dos animais, quando comparada à ração farelada. Os machos que receberam ração peletizada atingiram os pesos de abate de 26 e 28 kg aos 55 e 60 dias de idade, respectivamente.

Fontes de óleo vegetal na dieta de cordeiros em confinamento

Objetivou-se avaliar a ingestão de matéria seca, o ganho de peso diário, a conversão alimentar, o peso vivo ao abate e o período de confinamento em cordeiros Santa Inês puros e ½Dorset ½Santa Inês, alimentados com dietas isoenergéticas (76,59% de NDT) e isoprotéicas (17,48% de PB) contendo diferentes fontes de óleo vegetal (óleos de soja, canola e linhaça) e uma dieta controle (sem inclusão de óleo vegetal). A relação volumoso:concentrado foi de 30:70 e utilizou-se feno de aveia como volumoso. Realizou-se também um ensaio de digestibilidade, utilizando quatro cordeiros não-castrados, distribuídos em delineamento quadrado latino, avaliando-se ingestão, excreção fecal e digestibilidade total dos nutrientes das rações. A ingestão de matéria seca, expressa em porcentagem do peso vivo, foi menor nos cordeiros que receberam dieta contendo óleo de canola que naqueles que receberam dieta controle. Porém, todas as rações proporcionaram ganhos de peso e conversão alimentar satisfatórios. Os valores de digestibilidade total da matéria seca (76,02%) e matéria orgânica (76,82%) da dieta controle foram superiores aos da dieta contendo óleo de linhaça (72,11% e 72,97%, respectivamente), embora não tenham diferido das dietas contendo óleos de soja (72,94 e 73,71%) e canola (73,45 e 74,25%). A digestibilidade do extrato etéreo foi menor na dieta controle (84,02%), enquanto as demais dietas apresentaram valor médio de 91,98%. Os óleos vegetais reduziram a digestibilidade da matéria seca e da matéria orgânica, não afetando a ingestão e digestão dos demais nutrientes.

Valor nutritivo e estudo cinético do trato digestivo de dietas contendo grãos secos ou ensilados de sorgo de baixo e alto tanino para eqüinos

Quatro éguas sem raça definida (idade e peso corporal médios de seis anos e 400 kg) foram distribuídas em delineamento experimental em quadrado latino para se avaliar o valor nutritivo e o estudo cinético do trato digestivo de grãos secos ou ensilados de sorgo de baixo e alto conteúdos de tanino na alimentação de eqüinos. Os tratamentos consistiram de dietas contendo dois híbridos de grãos de sorgo (baixo e alto níveis de tanino) e dois métodos de conservação (secos e ensilados). As dietas foram isoprotéicas (12,4% PB), com ingestão diária de MS estabelecida em 1,5% PV (relação feno:concentrado de 50: 50). Os parâmetros de trânsito gastrintestinal avaliados foram: k1 (taxa de passagem pelo intestino grosso), k2 (taxa de passagem pelo estômago), TT (tempo de trânsito), TMR (tempo médio de retenção) e TMRT (tempo médio de retenção total). Os tratamentos não afetaram os coeficientes de digestibilidade aparente (CDa) da MS e do amido, cujos valores médios foram 54,04 e 98,91%, respectivamente. Verificou-se efeito benéfico da ensilagem dos grãos de sorgo de alto conteúdo de tanino sobre a digestibilidade da PB e FDN. A CDa da PB e FDN para a dieta contendo grãos secos de sorgo de alto teor de tanino foi de 49,76 e 32,20% e para as dietas com grãos de sorgo de baixo conteúdo de tanino (seco ou ensilado) e grãos ensilados de sorgo de alto teor de tanino foi de 65,63 e 43,32%, respectivamente. Obteve-se somente efeito do método de conservação dos grãos de sorgo (secos vs ensilados) sobre o TMR, em que o valor para as dietas com silagens de grãos ensilados e secos foi, respectivamente, de 40,08 e 37,9h. Concluiu-se que os grãos de sorgo secos de alto teor de tanino não devem ser usados como principal grão energético nos concentrados para eqüinos, por diminuírem a digestibilidade da proteína e fibra.

Biophysical Characterization of Interactions Involving Importin-α during Nuclear Import

Proteins containing the classical nuclear localization sequences (NLSs) are imported into the nucleus by the importin-α/β heterodimer. Importin-α contains the NLS binding site, whereas importin-β mediates the translocation through the nuclear pore. We characterized the interactions involving importin-α during nuclear import using a combination of biophysical techniques (biosensor, crystallography, sedimentation equilibrium, electrophoresis, and circular dichroism). Importin-α is shown to exist in a monomeric autoinhibited state (association with NLSs undetectable by biosensor). Association with importin-β (stoichiometry, 1:1; K D = 1.1 × 10 -8 M) increases the affinity for NLSs; the importin-α/β complex binds representative monopartite NLS (simian virus 40 large T-antigen) and bipartite NLS (nucleoplasmin) with affinities (K D = 3.5 × 10 -8 M and 4.8 × 10 -8 M, respectively) comparable with those of a truncated importin-α lacking the autoinhibitory domain (T-antigen NLS, K D = 1.7 × 10 -8 M; nucleoplasmin NLS, K D = 1.4 × 10 -8 M). The autoinhibitory domain (as a separate peptide) binds the truncated importin-α, and the crystal structure of the complex resembles the structure of full-length importin-α. Our results support the model of regulation of nuclear import mediated by the intrasteric autoregulatory sequence of importin-α and provide a quantitative description of the binding and regulatory steps during nuclear import.