Modifying the bitterness of selected oral pharmaceuticals with cation and anion series of salts

Purpose. NaCl has proven to be an effective bitterness inhibitor, but the reason remains unclear. The purpose of this study was to examine the influence of a variety of cations and anions on the bitterness of selected oral pharmaceuticals and bitter taste stimuli: pseudoephedrine, ranitidine, acetaminophen, quinine, and urea.
Method. Human psychophysical taste evaluation using a whole mouth exposure procedure was used.
Results. The cations (all associated with the acetate anion) inhibited bitterness when mixed with pharmaceutical solutions to varying degrees. The sodium cation significantly (P < 0.003) inhibited bitterness of the pharmaceuticals more than the other cations. The anions (all associated with the sodium cation) also inhibited bitterness to varying degrees. With the exception of salicylate, the glutamate and adenosine monophosphate anions significantly (P < 0.001) inhibited bitterness of the pharmaceuticals more than the other anions. Also, there were several specific inhibitory interactions between ammonium, sodium and salicylate and certain pharmaceuticals.
Conclusions. We conclude that sodium was the most successful cation and glutamate and AMP were the most successful anions at inhibiting bitterness. Structure forming and breaking properties of ions, as predicted by the Hofmeister series, and other physical-chemical ion properties failed to significantly predict bitterness inhibition.

Hofmeister effects on the colloidal stability of poly(ethylene glycol)-decorated nanoparticles

The colloidal stability of poly(ethylene glycol)-decorated poly(methyl methacrylate), PMMA/Tween-20, particles was investigated by means of phase separation measurements, in the presence of sodium fluoride (NaF), sodium chloride, sodium bromide, sodium nitrate, or sodium thiocyanate (NaSCN) at 1.0 mol L-1. Following Hofmeister's series, the dispersions of PMMA/Tween-20 destabilized faster in the presence of NaF than with NaSCN. After the phase separation, the systems were homogenized and except for the dispersions in NaF, re-dispersed particles took longer to destabilize, indicating that anions adsorbed on the particles, creating a new surface. Except for F- ions, the adsorption of anions on the polar outmost shell was evidenced by means of tensiometry and small-angle X-ray scattering measurements. Fluoride ions induced the dehydration of the polar shell, without affecting the polar shell electron density, and the formation of very large aggregates. A model was proposed to explain the colloidal behavior in the presence of Hofmeister ions.

Effect of the Hofmeister anions upon the swelling of a self-assembled pH-responsive hydrogel

We report the effect of a range of monovalent sodium salts on the molecular equilibrium swelling of a simple synthetic microphase separated poly(methyl methacrylate)-block-poly(2-(diethylamino)ethyl methacrylate)-block-poly(methyl methacrylate) (PMMA88-b-PDEA223-b-PMMA88) pH-responsive hydrogel. Sodium acetate, sodium chloride, sodium bromide, sodium iodide, sodium nitrate and sodium thiocyanate were selected for study at controlled ionic strength and pH; all salts are taken from the Hofmeister series (HS). The influence of the anions on the expansion of the hydrogel was found to follow the reverse order of the classical HS. The expansion ratio of the gel measured in solutions containing the simple sodium halide salts (NaCl, NaBr, and NaI) was found to be strongly related to parameters which describe the interaction of the ion with water; surface charge density, viscosity coefficient, and entropy of hydration. A global study which also included nonspherical ions (NaAce, NaNO3 and NaSCN) showed the strongest correlation with the viscosity coefficient. Our results are interpreted in terms of the Collins model,(1) where larger ions have more mobile water in the first hydration cage immediately surrounding the gel, therefore making them more adhesive to the surface of the stationary phase of the gel and ultimately reducing the level of expansion.

Effects of self energy of the ions on the double layer structure and properties at the dielectric interface

Although numerous theoretical efforts have been put forth, a systematic, unified and predictive theoretical framework that is able to capture all the essential physics of the interfacial behaviors of ions, such as the Hofmeister series effect, Jones-Ray effect and the salt effect on the bubble coalescence remain an outstanding challenge. The most common approach to treating electrostatic interactions in the presence of salt ions is the Poisson-Boltzmann (PB) theory. However, there are many systems for which the PB theory fails to offer even a qualitative explanation of the behavior, especially for ions distributed in the vicinity of an interface with dielectric contrast between the two media (like the water-vapor/oil interface). A key factor missing in the PB theory is the self energy of the ion.

In this thesis, we develop a self-consistent theory that treats the electrostatic self energy (including both the short-range Born solvation energy and the long-range image charge interactions), the nonelectrostatic contribution of the self energy, the ion-ion correlation and the screening effect systematically in a single framework. By assuming a finite charge spread of the ion instead of using the point-charge model, the self energy obtained by our theory is free of the divergence problems and gives a continuous self energy across the interface. This continuous feature allows ions on the water side and the vapor/oil side of the interface to be treated in a unified framework. The theory involves a minimum set of parameters of the ion, such as the valency, radius, polarizability of the ions, and the dielectric constants of the medium, that are both intrinsic and readily available. The general theory is first applied to study the thermodynamic property of the bulk electrolyte solution, which shows good agreement with the experiment result for predicting the activity coefficient and osmotic coefficient.

Next, we address the effect of local Born solvation energy on the bulk thermodynamics and interfacial properties of electrolyte solution mixtures. We show that difference in the solvation energy between the cations and anions naturally gives rise to local charge separation near the interface, and a finite Galvani potential between two coexisting solutions. The miscibility of the mixture can either increases or decreases depending on the competition between the solvation energy and translation entropy of the ions. The interfacial tension shows a non-monotonic dependence on the salt concentration: it increases linearly with the salt concentration at higher concentrations, and decreases approximately as the square root of the salt concentration for dilute solutions, which is in agreement with the Jones-Ray effect observed in experiment.

Next, we investigate the image effects on the double layer structure and interfacial properties near a single charged plate. We show that the image charge repulsion creates a depletion boundary layer that cannot be captured by a regular perturbation approach. The correct weak-coupling theory must include the self-energy of the ion due to the image charge interaction. The image force qualitatively alters the double layer structure and properties, and gives rise to many non-PB effects, such as nonmonotonic dependence of the surface energy on concentration and charge inversion. The image charge effect is then studied for electrolyte solutions between two plates. For two neutral plates, we show that depletion of the salt ions by the image charge repulsion results in short-range attractive and long-range repulsive forces. If cations and anions are of different valency, the asymmetric depletion leads to the formation of an induced electrical double layer. For two charged plates, the competition between the surface charge and the image charge effect can give rise to like- charge attraction.

Then, we study the inhomogeneous screening effect near the dielectric interface due to the anisotropic and nonuniform ion distribution. We show that the double layer structure and interfacial properties is drastically affected by the inhomogeneous screening if the bulk Debye screening length is comparable or smaller than the Bjerrum length. The width of the depletion layer is characterized by the Bjerrum length, independent of the salt concentration. We predict that the negative adsorption of ions at the interface increases linearly with the salt concentration, which cannot be captured by either the bulk screening approximation or the WKB approximation. For asymmetric salt, the inhomogeneous screening enhances the charge separation in the induced double layer and significantly increases the value of the surface potential.

Finally, to account for the ion specificity, we study the self energy of a single ion across the dielectric interface. The ion is considered to be polarizable: its charge distribution can be self-adjusted to the local dielectric environment to minimize the self energy. Using intrinsic parameters of the ions, such as the valency, radius, and polarizability, we predict the specific ion effect on the interfacial affinity of halogen anions at the water/air interface, and the strong adsorption of hydrophobic ions at the water/oil interface, in agreement with experiments and atomistic simulations.

The theory developed in this work represents the most systematic theoretical technique for weak-coupling electrolytes. We expect the theory to be more useful for studying a wide range of structural and dynamic properties in physicochemical, colloidal, soft-matter and biophysical systems.

The role of salt and shear on the storage and assembly of spider silk proteins

Major ampullate silk fibers of orb web-weaving spiders have impressive mechanical properties due to the fact that the underlying proteins partially fold into helical/amorphous structures, yielding relatively elastic matrices that are toughened by anisotropic nanoparticulate inclusions (formed from stacks of beta-sheets of the same proteins). In vivo the transition from soluble protein to solid fibers involves a combination of chemical and mechanical stimuli (such as ion exchange, extraction of water and shear forces). Here we elucidate the effects of such stimuli on the in vitro aggregation of engineered and recombinantly produced major ampullate silk-like proteins (focusing on structure-function relationships with respect to their primary structures), and discuss their relevance to the storage and assembly of spider silk proteins in vivo. (C) 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.

Determination of tartaric acid in wines by FIA with tubular tartrate-selective electrodes

A flow injection analysis (FIA) system comprising a tartrate- (TAT) selective electrode has been developed for determination of tartaric acid in wines. Several electrodes constructed for this purpose had a PVC membrane with a complex of quaternary ammonium and TAT as anion exchanger, a phenol derivative as additive, and a more or less polar mediator solvent. Characterization of the electrodes showed behavior was best for membranes with o-nitrophenyl octyl ether as solvent. On injection of 500 μL into a phosphate buffer carrier (pH = 3.1; ionic strength 10–2 mol/L) flowing at 3 mL/min, the slope was 58.06 ± 0.6 with a lower limit of linear range of 5.0 × 10–4 mol/L TAT and R2 = 0.9989. The interference of several species, e.g. chloride, bromide, iodide, nitrate, gallic acid, tannin, sucrose, glucose, fructose, acetate, and citrate, was evaluated in terms of potentiometric selectivity coefficients. The Hofmeister series was followed for inorganic species and the most interfering organic ion was citrate. When red and white wines were analyzed and the results compared with those from an independent method they were found to be accurate, with relative standard deviations below 5.0%.

Diphtheria toxoid conformation in the context of its nanoencapsulation within liposomal particles sandwiched by chitosan

Chitosan (alpha alpha-(1-4)-amino-2-deoxy-beta beta-D-glucan) is a deacetylated form of chitin, a polysaccharide from crustacean shells. Its unique characteristics, such as positive charge, biodegradability, biocompatibility, nontoxicity, and rigid structure, make this macromolecule ideal for an oral vaccine delivery system. We prepared reverse-phase evaporation vesicles (REVs) sandwiched by chitosan (Chi) and polyvinylic alcohol (PVA). However, in this method, there are still some problems to be circumvented related to protein stabilization. During the inverted micelle phase of protein nanoencapsulation, hydrophobic interfaces are expanded, leading to interfacial adsorption, followed by protein unfolding and aggregation. Here, spectroscopic and immunological techniques were used to ascertain the effects of the Hoffmeister series ions on diphtheria toxoid (Dtxd) stability during the inverted micelle phase. A correlation was established between the salts used in aqueous solutions and the changes in Dtxd solubility and conformation. Dtxd alpha alpha-helical content was quite stable, which led us to conclude that encapsulation occurred without protein aggregation or without exposition of hydrophobic residues. Dtxd aggregation was 98% avoided by the kosmotropic, PO

Quantifying hydrogel response using laser light scattering

The pH and counter-ion response of a microphase separated poly(methyl methacrylate)-block-poly(2-(diethylamino)ethyl methacrylate)-block-poly(methyl methacrylate) hydrogel has been investigated using laser light scattering on an imprinted micron scale topography. A quartz diffraction grating was used to create a micron-sized periodic structure on the surface of a thin film of the polymer and the resulting diffraction pattern used to calculate the swelling ratio of the polymer film in situ. A potentiometric titration and a sequence of counter ion species, taken from the Hofmeister series, have been used to compare the results obtained using this novel technique against small angle X-ray scattering (nanoscopic) and gravimetric studies of bulk gel pieces (macroscopic). For the first time, the technique has been proven to be an inexpensive and effective analytical tool for measuring hydrogel response on the microscopic scale.

Transport phenomena in hydrogel membranes

In this thesis the factors surrounding the permeation of alkali and alkaline earth metal salts through hydrogel membranes are investigated. Although of relevance to aqueous separations in general, it was with their potential application in sensors that this work was particularly concerned. In order to study the effect that the nature of the solute has on the transport process, a single polymer matrix, poly (2-hydroxyethyl methacrylate), was initially studied. The influence of cation variation in the presence of a fixed anion was looked at, followed by the effect of the anion in the presence of a fixed cation. The anion was found to possess the dominant influence and tended to subsume any influence by the cation. This is explained in terms of the structure-making and structure-breaking characteristics of the ions in their solute-water interactions. Analogies in the transport behaviour of the salts are made with the Hofmeister series. The effect of the chemical composition of the polymer backbone on the water structuring in the hydrogel and, consequently, transport through the membrane, was investigated by preparing a series of poly (2-hydroxyethyl methacrylate) copolymer membranes and determining the permeability coefficient of salts with a fixed anion. The results were discussed in terms of the `free-volume' model of permeation and the water structuring of the polymer backbone. The ability of ionophores to selectively modulate the permeation of salts through hydrogel membranes was also examined. The results indicated that a dualsorption model was in operation. Finally, hydrogels were used as membrane overlays on coated wire ion-selective electrodes that employed conventional plasticised-PVC-valinomycin based sensing membranes. The hydrogel overlays were found to affect the access of the analyte but not the underlying electrochemistry.

Understanding the cation specific effects on the aqueous solubility of amino acids: from mono to polyvalent cations

The interactions established by mono and polyvalent cations in natural media have important implications on the structure formation, function and physico-chemical behavior of biomolecules, playing therefore a critical role in biochemical processes. In order to further elucidate the molecular phenomena behind the cation specific effects in biological environments, and clarify the influence of the charge of the ions, solubility measurements and molecular dynamics simulations were performed for aqueous solutions of three amino acids (alanine, valine and isoleucine), in the presence of a series of inorganic salts comprising mono-, di- and trivalent cations (LiCl, Li2SO4, K2SO4, CaCl2, AlCl3 and Al-2(SO4)(3)). The evidence gathered indicates that the mechanism by which (salting-in inducing) polyvalent cations affect the solubility of amino acids in aqueous solutions is different from that of monovalent cations. A consistent and refined molecular description of the effect of the cation on the solubility of amino acids based on specific interactions of the cations with the negatively charged moieties of the biomolecules is here proposed.

Étude de propriétés physico-chimiques des membranes lipidiques chargées d’acide palmitique/stérol et de stéarylamine/cholestérol

Les stérosomes, des vésicules artificielles composées d’amphiphiles monoalkylés et d’un grand pourcentage de stérols, sont prometteurs dans plusieurs domaines comme les industries pharmaceutiques et alimentaires. Il existe des stérosomes chargés négativement, positivement et neutres. Dans ce mémoire, nous avons approfondi nos connaissances sur les propriétés physico-chimiques des stérosomes chargés : acide palmitique (PA)/stérol et stéarylamine (SA)/cholestérol (Chol). Premièrement, afin de mesurer la diffusion latérale de PA dans les membranes PA/stérol (30/70 mol/mol) par RMN à gradients pulsés, nous avons tenté de former des bicouches liquide-ordonnées (lo) orientées magnétiquement avec ce mélange. En s'inspirant de l’idée que l’ajout de 1,2-dihexanoyl-sn-glycéro-3-phosphocholine (DHPC), un lipide à courtes chaînes, dans le système 1,2-dimyristoyl-sn-glycéro-3-phosphocholine (DMPC) mène à la formation de bicouches orientées, nous avons étudié la formulation PA perdeutéré/acide hexanoïque (HA)/Chol avec une proportion molaire de 25/18/57 à plusieurs températures; aucune formation de bicouches orientées n’a été observée. Ce résultat pourrait être expliqué par la solubilisation partielle de HA en milieu aqueux. Alors, une quantité insuffisante serait insérée dans la bicouche pour induire son orientation. La formulation PA perdeutéré/DHPC/Chol n’a pas conduit, elle non plus, à des bicouches orientées magnétiquement à des températures et concentrations lipidiques variées. En étudiant le mélange DMPC/DHPC/Chol (67/17/14), nous avons remarqué que la présence de Chol inhibait l'orientation magnétique des bicouches. Tandis que le mélange DMPC/DHPC/stigmastérol (SS) avec les proportions molaires 67/19/14 et 72/21/7 conduisait à des bicouches orientées avec leur normale (n) perpendiculaire au champ magnétique à 40 °C et 50 °C. Ces résultats suggèrent que le mélange PA/SS avec une proportion de lipide à courtes chaînes, HA et DHPC, pourrait mener à des bicouches orientées magnétiquement. Le mélange PA/Chol avec un lipide à courtes chaînes pourrait aussi être étudié en présence des lanthanides. Deuxièmement, nous avons examiné la possibilité de moduler la libération de matériel encapsulé dans des liposomes essentiellement composés de PA et d’un stérol. Il est connu que le mélange PA/Chol (30/70) à pH ≥ 7,5 forme des liposomes très peu perméables. Il est avantageux de pouvoir moduler la perméabilité pour avoir un contrôle sur le temps de libération de leur contenu, qui est un paramètre de grande importance pour les formulations liposomales de médicaments. D’abord, il a été montré que l’acide oléique (OA)/Chol (30/70) est capable de former des vésicules, ce qui n’avait jamais été prouvé auparavant. Par contre, les bicouches OA/Chol (30/70) ne sont pas plus perméables que les bicouches PA/Chol (30/70). L’ajout de 1-palmitoyl-2-oléoyl-sn-glycéro-3-phosphatidylcholine (POPC) dans le mélange PA/Chol n’augmente pas plus la perméabilité. En effet, les cinétiques de relargage de calcéine des vésicules PA/POPC/Chol (15/27.5/57.5), POPC/Chol (40/60) et POPC étaient très semblables à celle de PA/Chol (30/70). Il a été remarqué que les études littéraires se contredisent à propos de la perméabilité à la calcéine des bicouches de phosphatidylcholine (PC). L’explication de ces divergences est inconnue pour le moment. En remplaçant la moitié de la proportion molaire de Chol par le cholate de sodium (SC) dans le mélange PA/Chol (30/70), la membrane n’était pas plus apte à libérer son contenu. Il se pourrait que le SC se retrouvant dans la bicouche n’induit pas une diminution d’empilement. Il est aussi possible que le SC ne s'insère pas dans la membrane à cause de son hydrophilie considérable et il pourrait alors former seul des micelles. En remplaçant complètement le Chol par le sulfate de cholestérol (SChol), un stérol chargé négativement, et en préparant les vésicules à un bas pH, la formulation PA/SChol (30/70) mène à une très grande perméabilité à pH 7.5; le relargage est provoqué par un saut de pH. Nos travaux suggèrent qu'il serait possible de moduler la perméabilité des liposomes en les préparant avec le mélange PA/SChol/Chol en variant les proportions entre 30/63/7 à 30/70/0. Le diagramme pH-composition du mélange PA/SChol/Chol indique que ces proportions conduisent, à pH 7.4, à la coexistence de phases solide et lo en différentes proportions, ce qui pourrait moduler la perméabilité membranaire. Troisièmement, les résultats de perméabilité obtenus avec la calcéine et les difficultés survenues lors de l’extrusion des vésicules encapsulant cette sonde nous ont amené à nous demander si la calcéine interagit avec les bicouches chargées. L’impact de certains anions, dont la calcéine, a été examiné sur les bicouches chargées positivement SA/Chol (50/50). La calorimétrie différentielle à balayage (DSC, de l’anglais differential scanning calorimetry), indique qu’il n’y a aucune transition entre 25 et 90 °C pour les liposomes SA/Chol (50/50) à pH = 7.4. L’ajout de chlorure de sodim (375 mM) n’a pas mené à la formation d’agrégats et aucune transition n’a été observée sur le thermogramme. La formation d’agrégats macroscopiques instantanément après l’ajout d’hydrogénophosphate de sodium (125 mM), de sulfate de sodium (125 mM) et de calcéine (3 mM) a été observée. Une transition a été observée sur les thermogrammes en présence de ces sels. Les agrégats observés pourraient être associés à la transition de phase. L’effet des anions sur la température et l’enthalpie de transition suivent le même ordre que la série d’Hofmeister : sulfate > hydrogénophosphate > chlorure (pas de pic). La calcéine avait l’impact le plus prononcé sur l’agrégation; ceci illustre que la calcéine n’est pas une sonde fluorescente inerte avec le mélange SA/Chol. Elle pourrait être un chaotrope volumineux. De plus, les interactions SA-calcéine plus fortes, menant à l’agrégation des vésicules, que les interactions PC-calcéine pourraient s’expliquer par le fait que la SA est chargée positivement.

Étude de propriétés physico-chimiques des membranes lipidiques chargées d’acide palmitique/stérol et de stéarylamine/cholestérol

Les stérosomes, des vésicules artificielles composées d’amphiphiles monoalkylés et d’un grand pourcentage de stérols, sont prometteurs dans plusieurs domaines comme les industries pharmaceutiques et alimentaires. Il existe des stérosomes chargés négativement, positivement et neutres. Dans ce mémoire, nous avons approfondi nos connaissances sur les propriétés physico-chimiques des stérosomes chargés : acide palmitique (PA)/stérol et stéarylamine (SA)/cholestérol (Chol). Premièrement, afin de mesurer la diffusion latérale de PA dans les membranes PA/stérol (30/70 mol/mol) par RMN à gradients pulsés, nous avons tenté de former des bicouches liquide-ordonnées (lo) orientées magnétiquement avec ce mélange. En s'inspirant de l’idée que l’ajout de 1,2-dihexanoyl-sn-glycéro-3-phosphocholine (DHPC), un lipide à courtes chaînes, dans le système 1,2-dimyristoyl-sn-glycéro-3-phosphocholine (DMPC) mène à la formation de bicouches orientées, nous avons étudié la formulation PA perdeutéré/acide hexanoïque (HA)/Chol avec une proportion molaire de 25/18/57 à plusieurs températures; aucune formation de bicouches orientées n’a été observée. Ce résultat pourrait être expliqué par la solubilisation partielle de HA en milieu aqueux. Alors, une quantité insuffisante serait insérée dans la bicouche pour induire son orientation. La formulation PA perdeutéré/DHPC/Chol n’a pas conduit, elle non plus, à des bicouches orientées magnétiquement à des températures et concentrations lipidiques variées. En étudiant le mélange DMPC/DHPC/Chol (67/17/14), nous avons remarqué que la présence de Chol inhibait l'orientation magnétique des bicouches. Tandis que le mélange DMPC/DHPC/stigmastérol (SS) avec les proportions molaires 67/19/14 et 72/21/7 conduisait à des bicouches orientées avec leur normale (n) perpendiculaire au champ magnétique à 40 °C et 50 °C. Ces résultats suggèrent que le mélange PA/SS avec une proportion de lipide à courtes chaînes, HA et DHPC, pourrait mener à des bicouches orientées magnétiquement. Le mélange PA/Chol avec un lipide à courtes chaînes pourrait aussi être étudié en présence des lanthanides. Deuxièmement, nous avons examiné la possibilité de moduler la libération de matériel encapsulé dans des liposomes essentiellement composés de PA et d’un stérol. Il est connu que le mélange PA/Chol (30/70) à pH ≥ 7,5 forme des liposomes très peu perméables. Il est avantageux de pouvoir moduler la perméabilité pour avoir un contrôle sur le temps de libération de leur contenu, qui est un paramètre de grande importance pour les formulations liposomales de médicaments. D’abord, il a été montré que l’acide oléique (OA)/Chol (30/70) est capable de former des vésicules, ce qui n’avait jamais été prouvé auparavant. Par contre, les bicouches OA/Chol (30/70) ne sont pas plus perméables que les bicouches PA/Chol (30/70). L’ajout de 1-palmitoyl-2-oléoyl-sn-glycéro-3-phosphatidylcholine (POPC) dans le mélange PA/Chol n’augmente pas plus la perméabilité. En effet, les cinétiques de relargage de calcéine des vésicules PA/POPC/Chol (15/27.5/57.5), POPC/Chol (40/60) et POPC étaient très semblables à celle de PA/Chol (30/70). Il a été remarqué que les études littéraires se contredisent à propos de la perméabilité à la calcéine des bicouches de phosphatidylcholine (PC). L’explication de ces divergences est inconnue pour le moment. En remplaçant la moitié de la proportion molaire de Chol par le cholate de sodium (SC) dans le mélange PA/Chol (30/70), la membrane n’était pas plus apte à libérer son contenu. Il se pourrait que le SC se retrouvant dans la bicouche n’induit pas une diminution d’empilement. Il est aussi possible que le SC ne s'insère pas dans la membrane à cause de son hydrophilie considérable et il pourrait alors former seul des micelles. En remplaçant complètement le Chol par le sulfate de cholestérol (SChol), un stérol chargé négativement, et en préparant les vésicules à un bas pH, la formulation PA/SChol (30/70) mène à une très grande perméabilité à pH 7.5; le relargage est provoqué par un saut de pH. Nos travaux suggèrent qu'il serait possible de moduler la perméabilité des liposomes en les préparant avec le mélange PA/SChol/Chol en variant les proportions entre 30/63/7 à 30/70/0. Le diagramme pH-composition du mélange PA/SChol/Chol indique que ces proportions conduisent, à pH 7.4, à la coexistence de phases solide et lo en différentes proportions, ce qui pourrait moduler la perméabilité membranaire. Troisièmement, les résultats de perméabilité obtenus avec la calcéine et les difficultés survenues lors de l’extrusion des vésicules encapsulant cette sonde nous ont amené à nous demander si la calcéine interagit avec les bicouches chargées. L’impact de certains anions, dont la calcéine, a été examiné sur les bicouches chargées positivement SA/Chol (50/50). La calorimétrie différentielle à balayage (DSC, de l’anglais differential scanning calorimetry), indique qu’il n’y a aucune transition entre 25 et 90 °C pour les liposomes SA/Chol (50/50) à pH = 7.4. L’ajout de chlorure de sodim (375 mM) n’a pas mené à la formation d’agrégats et aucune transition n’a été observée sur le thermogramme. La formation d’agrégats macroscopiques instantanément après l’ajout d’hydrogénophosphate de sodium (125 mM), de sulfate de sodium (125 mM) et de calcéine (3 mM) a été observée. Une transition a été observée sur les thermogrammes en présence de ces sels. Les agrégats observés pourraient être associés à la transition de phase. L’effet des anions sur la température et l’enthalpie de transition suivent le même ordre que la série d’Hofmeister : sulfate > hydrogénophosphate > chlorure (pas de pic). La calcéine avait l’impact le plus prononcé sur l’agrégation; ceci illustre que la calcéine n’est pas une sonde fluorescente inerte avec le mélange SA/Chol. Elle pourrait être un chaotrope volumineux. De plus, les interactions SA-calcéine plus fortes, menant à l’agrégation des vésicules, que les interactions PC-calcéine pourraient s’expliquer par le fait que la SA est chargée positivement.